Elementi del test piastrinico

Il programma di test piastrinici è un'analisi quantitativa e qualitativa delle piastrine nel sangue per la diagnosi di anomalie piastriniche. Le funzioni di base delle piastrine sono adesione, aggregazione, secrezione, procoagulante e retrazione del coagulo di sangue. Attraverso queste funzioni viene mantenuta l'emostasi iniziale del normale corpo umano. Le malattie emorragiche causate da queste funzioni anormali comprendono ereditarie e acquisite e in alcune malattie la disfunzione piastrinica e il numero sono ridotti. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione dell'esame cardiovascolare: esame del sangue Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Suggerimenti: non mangiare cibi troppo grassi e ricchi di proteine ​​il giorno prima ed evitare di bere pesantemente. La gradazione alcolica nel sangue influenza direttamente i risultati del test. Dopo le 20:00 del giorno prima dell'esame medico, dovresti digiunare. Valore normale 100 × 109 ~ 300 × 109 / L. Significato clinico Risultato anormale (1) Conta piastrinica PLT Trombocitopenia ridotta, come anemia aplastica, leucemia acuta, ecc. Distruzione eccessiva come porpora trombocitopenica primaria. Un consumo eccessivo si osserva nella coagulazione intravascolare diffusa, trombocitopenia trombotica, ecc. Trombocitopenia causata da un'anomala distribuzione piastrinica Quando la milza è grande, oltre il 90% delle piastrine nel sangue viene immagazzinato nella milza, causando una diminuzione da lieve a moderata delle piastrine nel sangue. I campioni di sangue che riducono le pseudo-piastrine usando anticoagulanti EDTA possono indurre una riduzione significativa delle piastrine in un piccolo numero (0,1%); quando nel sangue sono presenti piastrine di grandi dimensioni, sono pseudo-ridotte perché non possono essere conteggiate. Questi due casi possono essere trovati nella sindrome piastrinica gigante. Si noti che i risultati piastrinici dell'emocromo venoso sono stabili e i fattori di interferenza sono piccoli. Il picco del prelievo di sangue può causare attivazione piastrinica, aggregazione e simili. (2) Volume piastrinico medio MPV Identificazione della trombocitopenia Quando la funzione ematopoietica del midollo spinale è compromessa, sia MPV che PLT riducono la distruzione piastrinica come ITP e MPV possono aumentare; se splenectomia, sia MPV che PLT possono essere elevati. Funzione ematopoietica del midollo osseo Nel valutare la funzione ematopoietica, MPV e PLT hanno mostrato una tendenza alla diminuzione continua, la funzione è stata gravemente inibita e l'MPV era più piccola. Quando la funzione ematopoietica è stata ripristinata, l'aumento di MPV era superiore a quello del PLT. MPV aumenta la sindrome piastrinica gigante e simili. La trombocitosi reattiva, come infezione, chirurgia, ecc., MPV è normale. (3) Volume specifico piastrinico PCT: qualsiasi aumento di PLT e / o MPV può portare ad un aumento della PCT, come la trombocitosi primaria e secondaria. (4) Larghezza di distribuzione del volume piastrinico PDW: l'aumento è significativo, il volume piastrinico è più uniforme e il PDW è più grande. Il significato clinico deve essere ulteriormente studiato. (5) P-LCR-large piastrine ratio Le piastrine possono essere divise in piccole, medie, grandi e giganti. Il grande aumento delle piastrine si riscontra principalmente nella porpora trombocitopenica idiopatica; nella sindrome piastrinica gigante si osserva un aumento piastrinico gigante. Le persone che devono essere esaminate hanno una pelle debole, debole, assonnata, pallida, mucose, palpitazioni, vertigini, mal di testa, acufeni, vertigini, disattenzione e letargia. Bassi risultati possono essere malattie: trombosi, gravidanza con porpora trombocitopenica idiopatica, alti risultati di leucemia possono essere malattie: considerazioni sull'anemia aplastica Persone inadatte: persone con una significativa tendenza a sanguinare. Tabù prima del test: non mangiare cibi troppo grassi e ricchi di proteine ​​il giorno prima del test, per evitare di bere pesantemente. La gradazione alcolica nel sangue influenza direttamente i risultati del test. Dopo le 20:00 del giorno prima dell'esame medico, dovresti digiunare. Requisiti per l'esame: durante l'assunzione di sangue, è necessario rilassare la mente per evitare la contrazione dei vasi sanguigni causata dalla paura e aumentare la difficoltà di raccolta del sangue. Processo di ispezione (I) Determinazione dei granuli di rilascio piastrinico e funzione di attivazione Il citoplasma piastrinico contiene particelle α2, particelle dense, lisosomi, ecc. E quando l'attrattivo viene aggiunto, provoca il rilascio di queste particelle, un processo chiamato rilascio piastrinico. Può essere valutato misurando 5HT o adenosina. Il saggio 5HT ha due tipi di spettrofotometria a fluorescenza e saggio isotopico. Il rilascio di particelle alfa è determinato principalmente dalla globulina beta-piastrinica plasmatica (βTG) e dal fattore piastrinico 4 (PF4). PF4 e βTG sono proteine ​​specifiche contenute nelle particelle alfa piastriniche e il test viene eseguito da ELISA. Il suo aumento indica che le piastrine sono attivate e rilasciate, ed è anche visto in stati ipercoagulabili e malattie trombotiche. La piastrina, una proteina di membrana granulare 140 (GMP140), nota anche come Pselection (Pselection), è essa stessa un indicatore relativamente affidabile dell'attività piastrinica. La quantità di GMP140 nella membrana plasmatica o piastrinica può essere quantificata rispettivamente da anticorpi monoclonali contro GMP140. La sua elevazione rappresenta malattie trombotiche, malattie autoimmuni [come il lupus eritematoso sistemico, porpora trombocitopenica idiopatica (ITP)] e malattie metaboliche (come il diabete complicato da una malattia vascolare periferica). GMP140 è considerato il "gold standard" per la risposta al rilascio di piastrine. Tuttavia, ad oggi, è nota la correlazione tra questi marker e i tassi di aggregazione piastrinica, specialmente nel caso di varie terapie farmacologiche antipiastriniche. Tuttavia, alcuni esperimenti hanno dimostrato che la degranulazione piastrinica viene rapidamente separata da GMP140 ma esiste ancora nella circolazione sanguigna ed è attiva. La citometria a flusso sanguigno intero (FCM) ha fatto grandi progressi nel rilevamento della funzione piastrinica, che può essere utilizzata per la diagnosi della disfunzione piastrinica, la quantificazione della densità del recettore superficiale, il rilevamento delle piastrine attivate e il monitoraggio della risposta piastrinica agli attivatori. Monitoraggio del metabolismo piastrinico, monitoraggio della terapia antipiastrinica, monitoraggio dei prodotti in trombocitopenia, immunoglobulina G associata a piastrine, sopravvivenza piastrinica e trasduzione del segnale. FCM è in grado di rilevare le piastrine attivate nel sangue in modo sensibile e specifico da specifici anticorpi piastrinici e coloranti utilizzando pochissimi campioni di sangue e valutare la sua funzione. Allo stesso tempo, FCM può essere utilizzato per prevedere le malattie cardiovascolari rilevando i marker di superficie piastrinica attivati. L'attuale FCM è stato applicato a malattie iperreattive piastriniche (cuore, trombosi cerebrale), malattia iporeactive piastrinica (debolezza piastrinica), valutazione dell'efficacia del trapianto di midollo osseo (piastrina neonatale), trombocitopenia (ITP) e antagonisti della GPIIb / IIIa Monitoraggio del trattamento e altri settori. Tuttavia, a causa dell'elevato prezzo del citometro a flusso, il costo di rilevazione è elevato e il funzionamento dello strumento è complicato; per evitare l'attivazione in vitro, il campione di sangue deve essere trattato entro 45 minuti e non può essere impostato per un lungo periodo; inoltre, il citometro a flusso rileva solo la funzione piastrinica nella circolazione e viene rilevato il βTG. PF4 e trombossano A2 (TXA2) possono riflettere l'attivazione delle piastrine sulla parete del vaso e non è possibile rilevare gli indicatori funzionali delle piastrine appena liberate. Questi fattori definiscono ulteriormente la loro applicazione. (B) Determinazione dei metaboliti AA Determinazione del trombossano al plasma B2 (trombossano B2, TXB2). Il principale prodotto attivo del metabolismo AA piastrinico è TXA2, che è molto instabile e si converte rapidamente in TXB2 stabile. TXB2 si riflette generalmente misurando TXB2. Il saggio TXB2 è stato eseguito da ELISA: la piastra di reazione marcata con enzima è stata rivestita con TXB2BSA, sono stati aggiunti il ​​plasma di prova e l'anticorpo TXB2, e il TXB2 è stato rivestito e il campione TXB2 è stato legato in modo competitivo a una certa quantità di anticorpo e sono stati aggiunti il ​​secondo anticorpo e il substrato. La reazione del colore determina il contenuto TXB2 del campione. Vale la pena notare che l'aumento continuo dei livelli di TXB2 non solo riflette l'attività COX1 non soppressa delle piastrine, ma riflette anche il livello di TXA2 prodotto da percorsi non COX1, pertanto i livelli di TXB2 sono il metodo più prezioso per rilevare la resistenza alla terapia antipiastrinica. (C) determinazione dell'adenosina monofosfato ciclico (cAMP) e guanosina monofosfato ciclico (cGMP) cAMP e cGMP sono secondi sistemi di messaggistica che regolano la funzione piastrinica. Quando la produzione di cAMP viene ridotta, le piastrine subiscono una reazione di aggregazione e quando aumenta la produzione di cAMP, le piastrine non subiscono una reazione di aggregazione; al contrario, le piastrine non subiscono una reazione di aggregazione quando la produzione di cGMP è ridotta e l'aggregazione di piastrine si verifica quando la produzione di cGMP aumenta. Intervallo di riferimento (ELISA): cAMP è (1518 ± 724) pmol per 109 piastrine e cGMP è (046 ± 024) pmol per 109 piastrine. (4) Altri test piastrinici 1. Rilevazione del coniugato leucocitario piastrinico: GMP140 sulla superficie delle piastrine può legarsi specificamente al glicoproteina ligando 1 GMP140 (PSGL1) sulla superficie dei leucociti. Quando vengono attivate piastrine e leucociti, aumentano sia GMP140 che PSGL1, riflettendo un aumento del legame delle piastrine con i leucociti. Questo è di grande significato per la diagnosi e la ricerca della trombosi. 2. Rilevazione di microparticelle piastriniche (PMP): dopo l'attivazione delle piastrine, le vescicole si formano per germogliamento o PMP si forma per frattura dello pseudo-piede. Il PMP è piccolo (da 01 a 10 μm di diametro) ma ha una struttura e una funzione di membrana complete. FCM rileva l'intervallo di riferimento di PMP: (58 ± 15) per 104 piastrine. L'aumento del PMP riflette la distruzione o l'attivazione piastrinica. Il PMP elevato rappresenta una malattia trombotica; ridotto nei disturbi metabolici congeniti di AA, assunzione di aspirina, sulfinpirazone, imidazolo e altri farmaci. 3. Nuovi marker di attivazione piastrinica: compresa l'attività procoagulante piastrinica, microparticelle e aggregazione piastrinica mononucleare. Molti esperimenti attuali hanno dimostrato che nell'angina stabile, intervento coronarico, infarto miocardico acuto, ecc., Gli aggregati piastrinici mononucleari sono più sensibili di GMP140 sulla superficie delle piastrine in termini di marker di attivazione piastrinica in vivo. Non adatto alla folla 1. I pazienti che hanno assunto contraccettivi, ormoni tiroidei, ormoni steroidei, ecc., Possono influenzare i risultati dell'esame e vietare i pazienti che hanno recentemente assunto la storia del farmaco. 2, malattie speciali: i pazienti con funzione ematopoietica per ridurre la malattia, come leucemia, anemia varia, sindrome mielodisplastica, ecc., A meno che l'esame non sia essenziale, cercano di prelevare meno sangue. Reazioni e rischi avversi 1, emorragia sottocutanea: a causa di un tempo di pressatura inferiore a 5 minuti o la tecnologia di prelievo del sangue non è sufficiente, ecc. Può causare sanguinamento sottocutaneo. 2, disagio: il sito della puntura può apparire dolore, gonfiore, tenerezza, ecchimosi sottocutanea visibile ad occhio nudo. 3, vertigini o svenimento: nel prelievo di sangue, a causa di sovraccarico emotivo, paura, riflesso causato dall'eccitazione del nervo vago, diminuzione della pressione sanguigna, ecc. Causato da insufficiente afflusso di sangue al cervello causato da svenimento o vertigini. 4. Rischio di infezione: se si utilizza un ago sporco, si può essere a rischio di infezione.