Saggio di immunoassorbimento enzimatico

Il saggio di immunosorbente enzimatico è un saggio di immunosorbente enzimatico. Viene utilizzato per rilevare l'antigene (o l'anticorpo) da testare che viene rivestito nel pozzetto della piastra in fase solida. Cioè, l'anticorpo è etichettato con un enzima e l'antigene o l'anticorpo noto viene adsorbito sulla superficie del portatore di fase solida, e la reazione antigene-anticorpo viene effettuata sulla superficie del portatore di fase solida e il componente libero nella fase liquida viene lavato via mediante lavaggio e infine agito dall'enzima. Il colore viene sviluppato dopo il substrato per giudicare il risultato. La profondità della reazione del colore è proporzionale alla quantità dell'anticorpo o antigene corrispondente nel campione. Questa reazione di colore può essere determinata quantitativamente da un rivelatore ELISA, che combina la sensibilità della reazione chimica enzimatica con la specificità della reazione antigene-anticorpo, rendendo il metodo ELISA un metodo di rilevazione sia specifico che sensibile. Informazioni di base Classificazione degli specialisti: classificazione dei controlli di crescita e sviluppo: esame immunologico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: non il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Normale. positivo: Il corpo umano si trova in un equilibrio dinamico e in uno stato malsano. Suggerimenti: rilassati durante il controllo. Valore normale Il tipo e la proporzione della flora nel corpo sono normali e il corpo umano è in uno stato di equilibrio dinamico e salute. Significato clinico Il saggio di immunoassorbimento enzimatico è la tecnica più utilizzata nel saggio immunoenzimatico. I metodi ELISA comunemente usati includono un metodo sandwich a doppio anticorpo e un metodo indiretto, il primo per rilevare gli antigeni macromolecolari e il secondo per misurare specifici anticorpi. In termini di malattie parassitarie, viene utilizzato per la diagnosi sierologica di Plasmodium, Amoeba, Liegemann, Tripanosoma, Schistosomiasi, Cisticercosi, Toxoplasma, Schistosomiasi, Fluke epatico, Bloodworm, Trichinosi Questo è importante sia per i medici che per i veterinari. È stato usato per rilevare anticorpi contro Streptococco, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida, ecc. E può anche essere usato per l'antitossina tetanica e l'antitossina di Vibrio cholerae. È possibile diagnosticare la determinazione e il rilevamento di anticorpi contro l'infezione da rickettsia rickettsia. La Rickettsia può anche essere utilizzata per identificare specie strettamente correlate. Ci sono anche rapporti per l'esame degli anticorpi contro la Chlamydia psittaci. Virus dell'influenza, virus della parotite, morbillo, rosolia, rotavirus, virus dell'herpes, citomegalovirus, virus EB, adenovirus, enterovirus, virus dell'encefalite, virus della febbre gialla, rabbia Tossici e poliovirus, ecc., Sono più sensibili dei metodi di ispezione attualmente utilizzati. Nelle malattie immunologiche, ci sono test per il rilevamento di malattie autoimmuni e la diagnosi di allergie, come anticorpi contro vari allergeni, anticorpi DNA e anticorpi contro la tireoglobulina, anticorpi eritematosici e simili. In igiene, può essere utilizzato per rilevare l'enterotossina stafilococcica e la tossina salmonella negli alimenti. I risultati positivi possono essere malattie: epidermolisi bollosa acquisita, tripanosomiasi, schistosomiasi e malattie epatobiliari, sclerite da toxoplasmosi, sindrome di Gestman, toxoplasmosi congenita neonatale, colpo di fegato, Rickettsia siberiano febbre maculata, piriflagellate intestinali, precauzioni di diarrea turistica 1. Substrato: Vari enzimi hanno specificità per il substrato, quindi l'uso di diversi tipi di enzimi richiede substrati diversi. Una volta determinato il coniugato enzimatico (ad es. AP o HRP), la gamma di substrati disponibili per la selezione è molto limitata. Come selezionare un substrato adatto nell'ambito di questo substrato limitato dovrebbe essere selezionato in base alle seguenti condizioni: (1) Il substrato deve essere incolore prima di essere catalizzato dall'enzima e avere un colore evidente dopo essere stato catalizzato dall'enzima. Cambia, in modo che i risultati possano essere chiaramente distinti; (2) il colore è facile da asciugare ed eluire; (3) il prodotto dopo lo sviluppo del colore deve essere stabile, la sostanza colorata prodotta nella determinazione quantitativa dovrebbe essere solubile; (4) il prezzo Economico, facile da ottenere e non tossico. Pertanto, per il coniugato enzimatico AP, viene generalmente utilizzato nitrofenil fosfato, il colore è arancione dopo lo sviluppo del colore e il colore è stabile, la reazione termina con 2 mol / L NaOH e il valore OD può essere misurato a una lunghezza d'onda di 403 nm. 2. Detersivo e diluente: Al fine di massimizzare la quantità di anticorpo specificamente legato, l'antigene rivestito nel pozzetto della micropiastra dovrebbe essere leggermente in eccesso. Tuttavia, durante l'incubazione o il lavaggio, parte dell'antigene adsorbito può essere lavato via dal supporto solido. Pertanto, è probabile che le proteine ​​diverse dall'anticorpo specifico aggiunto al siero del test si assorbano nel bianco del pozzetto rivestito di antigene originale, aumentando il colore di fondo e generando una reazione falsa positiva, fattore che limita la specificità dell'ELISA. Molti studiosi hanno aggiunto vari agenti protettivi ai diluenti e ai detergenti per inibire l'adsorbimento competitivo delle proteine ​​non specifiche. Processo di ispezione Il metodo di base consiste nell'adsorbire un antigene o anticorpo noto sulla superficie di un veicolo in fase solida (piastra di micro-reazione in polistirene), reagire alla reazione antigene-anticorpo marcata con enzima sulla superficie della fase solida e lavare i componenti liberi nella fase liquida mediante lavaggio. Inoltre. Secondo il vettore in fase solida utilizzato in ELISA, è suddiviso in tre tipi: uno è ELISA che utilizza la micropiastra di polistirene come vettore, che è l'ELISA (ELISA della micropiastra) a cui di solito facciamo riferimento; l'altro utilizza la membrana di nitrocellulosa come vettore. L'ELISA è chiamato spot ELISA (Dot-ELISA); l'altro è ELISA che utilizza un panno in poliestere idrofobo come supporto, chiamato tessuto ELISA (C-ELISA). Nella micropiastra ELISA, è ulteriormente suddiviso in ELISA indiretto, ELISA sandwich doppio anticorpo, ELISA doppio sandwich, ELISA da competizione, ELISA bloccante e ELISA cattura anticorpo in base alle sue proprietà. Non adatto alla folla Non ci sono tabù speciali. Reazioni e rischi avversi Non ci sono complicazioni e pericoli correlati.