beta-laktamas

P-laktamaset avser ett inaktiverande enzym som kan katalysera hydrolysen av en amidbindning i en p-laktamring i en biomolekyl. Bakterieproduktion av ß-laktamas är den huvudsakliga mekanismen för bakteriell resistens mot ß-laktamantibiotika. Β-laktamasantibiotika inklusive penicilliner, cefalosporiner, atypiska ß-laktamer etc. är de mest använda, de mest studerade och de mest använda läkemedlen. Grundläggande information Specialistklassificering: Inspektion och klassificering av infektionssjukdomar: biokemisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: inte fasta Tips: Enligt hela kroppens näringsstatus ges mjölk, ägg, frukt, sojamjölk etc. i måltiden. Normalt värde Florans typ och andel av kroppen är normal och människokroppen är i en dynamisk balans. Klinisk betydelse Mekanismen för bakteriell resistens: 1. Inaktiverade enzymer - huvudsakligen beta-laktamaser (mer än 200 typer), vilket gör antibiotika ineffektiva. 2, målförändringar - målet ändras med antibiotika, så att antibiotikans roll minskade. 3, förändring av bakteriellt membranpermeabilitet - så att antibiotika inte eller sällan kan komma in i bakterierna för att nå målet. Utvecklingen av bakteriell resistens från sjukhusstammar (såsom Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) till stammar utanför sjukhuset (såsom Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), resistens mot resistens mot ett enda läkemedel Läkemedlet utvecklas till resistens mot flera läkemedel, såsom Staphylococcus aureus-resistens mot penicillin; ESBL-stam är resistent mot en mängd vanliga antibiotika. Onormala resultat Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae och andra infektioner, men användningen av antibiotika är inte effektiv eller effekten är inte uppenbar, bakterier ger läkemedelsresistens. De personer som behöver undersökning har patienter med ovanstående tillstånd. försiktighetsåtgärder Olämplig folkmassa: Nej. Förbjudet före undersökning: Var uppmärksam på normala matvanor och var uppmärksam på personlig hygien. Krav för inspektion: Samarbeta aktivt med läkaren. Inspektionsprocess Detektion av ß-laktamas I kliniska prover befanns Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae och några få stammar av Enterococcus nyligen vara resistenta mot penicillin och ampicillin. Eftersom ovanstående stam producerar p-laktamas, hydrolyseras det ovannämnda antibiotikumet. Följande metoder används för att upptäcka enzymet: 1. Mikrobiell aktivitet försvinnande metod Denna metod är en indikatorstam av Bacillus subtilis som är mycket känslig för penicillin. Om stammen som ska testas ger β-laktamas och förstör penicillin finns det Bacillus subtilis-tillväxt på båda sidor av linjen, annars är indikatorn fortfarande mycket stor. Antibakteriell ring. 2, bestämning av stärkelse-jod Betalaktamas förstör beta-laktamringen, och joden kombineras med den öppnade beta-laktamringen för att omvandla det blå stärkelse-jodkomplexet till färglöst. METODER: En suspension av penicillin 6000 μg / ml bereddes med pH 6,0 fosfatbuffertlösning. 0,1 ml av lösningen placerades i en brunn i en mikroutspädningsplatta. Flera kolonier av teststammen valdes och suspenderades däri, skakades i 30 minuter och fick stå vid rumstemperatur under 1 timme. Tillsätt 2 droppar stärkelselösning, tillsätt 1 droppe jodlösning, blanda och observera färgförändringen omedelbart. När den positiva personen lägger till jodlösning, kommer den att visas blå omedelbart, som att försvinna blått inom 10 minuter, vilket tyder på att bakterierna producerar β-inre laktamas. 3. Syra mätning Penicillin hydrolyseras av p-endas till penicillinsyra, pH-värdet sjunker under 6,8, med fenolröd indikator, från röd (lila) färg (stamlösning: citratbuffert pH 8,5) → gul (pH 6,8 Följande). 4, cefalosporintiofenfärgereaktion P-laktamringen i Nitrocefin öppnas med ß-laktamas och matrisen ändras från gul till röd. Flytande metod: 10 mg cefa nitrothiofen löstes i 1 ml dimetylsulfoxid och späddes sedan 1:20 med 0,1 mol / L PBS (pH 7,0), och slutligen var koncentrationen 500 ug / ml, och lösningen var gul eller blekorange. Förvara 4 till 10 ° C i flera veckor. Ta 0,05 ml av lösningen i brunnen på mikroutspädningsplattan eller i det lilla provröret, välj testkolonin, gör en tjock suspension, blanda med matrisvätskan i det konkava hålet och ändra cefalosporin-nitrothiofen från gul till rumstemperatur vid rumstemperatur i 10 till 30 minuter. Röd är positiv. Om färgen inte är uppenbar kan observationen förlängas i 6 timmar. Det har rapporterats att resultaten av pappersmetoden för detektion av ß-laktamas av Haemophilus influenzae och Neisseria gonorrhoeae är korrekta, men för vissa stammar är en liten mängd ß-laktamas, som är tätt bundet till bakteriecellerna, såsom saprofytisk Staphylococcus, etc., bättre med flytande metod. Kvalitetskontroll tillämpas på någon av ovanstående detekteringsmetoder. Inte lämplig för publiken Generellt inga tabuer. Biverkningar och risker I allmänhet inga komplikationer och skador.