gonorré
Introduktion
Introduktion till gonorré Gonoré är en purulent infektion i könsdelssystemet orsakat av Neisseria gonorrhoeae (kallas Neisseria gonorrhoeae). Det kan också invadera ögonen, svalg, rektum och bäcken, såväl som spridda infektioner. Det är en av de vanliga sexuellt överförda sjukdomarna. . Gonoré överförs genom samlag, och ett litet antal kan också överföras genom patientens pusföroreningar, som kan överföras till barnet genom födelsekanalen. Grundläggande kunskaper Andelen sjukdom: 0,012% Känsliga människor: förekommer oftast hos unga män och kvinnor Sändningssätt: sexuell överföring Komplikationer: Prostatit, seminal vesikulit, epididymit, uretrit, uretral strängning, bäckeninflammatorisk sjukdom, bäckenabcess, buksmärta
patogen
Orsak till gonorré
Morfologi och färgning (25%):
Neisseria gonorrhoeae är ovala eller bönformade. Längden på bakterierna är 0,6-0,8 μm och bredden är cirka 0,5 μm. De är ofta arrangerade i par, och de angränsande ytorna är plana eller något konkava, som två bönor parade ihop, inga flageller, inga sporer. I kroppen av akut infektion är dess morfologi mer typisk, mestadels i cytoplasma, i den kroniska fasen är utanför cellen, den gonokocka Gram-fläcken är negativ, när de är färgade med alkaliskt metylenblått, är bakterierna blå, färgade med Pappehheim Saathof Just nu är cellerna röda och bakgrunden är himmelblå, vilket är mycket tydligt. Neisseria gonorrhoeae har fem olika koloniformer på konstgjord medium, nämligen T1, T2, T3, T4, T5, varav T1 och T2 är virulens, T3 och T4 är sterilt hår och kan inte infektera människor.
Cellstruktur (20%):
Patogeniciteten hos Neisseria gonorrhoeae är nära besläktad med strukturen utanför cellerna. Den yttre strukturen hos Neisseria gonorrhoeae är det yttre membranet. Huvudkomponenterna i det yttre membranet är membranproteiner, lipopolysackarid och pili, och membranproteiner kan vidhäfta det mänskliga slemhinnan. Genom cellfagocytos i mänskliga celler, multiplikation i cellerna, vilket leder till cellens sönderdelning, spridning av gonokocker till submukosa för att orsaka infektion, pili tenderar att hålla fast vid ytan av livmoderhålet och orala epitelceller, patogena och smittsamma.
Resistens (25%):
Neisseria gonorrhoeae är mer känslig, mest rädd för torrhet, lämplig för tillväxt under fuktighet, temperatur på 35 ~ 36 ° C, innehållande 2,5% ~ 5,0% koldioxid, det optimala pH för tillväxt är 7,0 ~ 7,5, de fysisk-kemiska faktorerna för Neisseria gonorrhoeae Motståndet är ganska dåligt. Det kommer att dö inom 1 ~ 2 timmar i en helt torr miljö. Men om den är fäst vid underkläderna och sängkläderna, kan den överleva i 18 till 24 timmar. Den kan överleva i flera dagar på tjocka pus eller våta föremål. 50 ° C kan bara överleva i 5 minuter, Neisseria gonorrhoeae är mycket svag mot vanligt använda mukobakteriella svampmedel, det är särskilt känsligt för lösliga silversalter, 1: 4000 silvernitratlösning kan få den att dö inom 7 min, så att Neisseria gonorrhoeae i pus 2min Inom dödsfallet kan 1% fenol (kolsyra) -lösning döda den inom 3 min. Utöver den resistenta stammen är Neisseria gonorrhoeae känslig för antibiotika, men den minsta hämmande koncentrationen av antibiotika förbättras gradvis.
Patogenen är neisseria gonorrhoeae, även känd som gonococcus, benämnd Neisseria gonorrhoeae, som tillhör familjen Neisseria, Neisseria.
1. Hittade att Neisser isolerade gonorré från 1879 av 35 sekretioner av akut uretrit, vaginit och akut konjunktivit hos neonatal. 1885 användes Bumm i serummedium för humant, nötkreatur eller får. Odlingen av Neisseria gonorrhoeae var framgångsrik och samma symtom kunde framkallas genom inokulering av stammen i urinröret hos friska människor. Vid denna tidpunkt har slutsatsen att Neisseria gonorrhoeae är patogenet för gonoré har fastställts.
2. Kultur och biokemiska egenskaper växer bra på medium som innehåller animaliskt protein såsom blod, serum, äggula, ascites, etc. Den lämpliga temperaturen för odling är 35-36 ° C, lämpligt pH är 7,5, och det måste odlas i 5% koldioxidmiljö. .
I den mänskliga urinröret kan glukos fermenteras, men fruktos kan inte fermenteras. Därför kan denna egenskap användas som ett glukosfermenteringstest för att identifiera sig med meningococcus, som inte ger en sputmatris och vätesulfid. Produktionen av oxidaser har en viss betydelse vid tidig identifiering.
3. Näringsämnesklassificering Enligt den aminosyra- och nukleinsyranäringsstiftelse som krävs för gonokockkultur kan Neisseria gonorrhoeae delas in i 35 näringstyper, bland vilka Arg, Hyx, Ura-typ Neisseria gonorrhoeae kan orsaka asymptomatisk gonoré och spridd gonoré. Resistent mot serum, men känslig för penicillin och andra läkemedel.
patogenes
(1) Affinitet till epitelet: Neisseria gonorrhoeae har en speciell affinitet för det columnar epitelet och det övergångsepitelet. Den manliga och kvinnliga urinröret, den kvinnliga livmoderhalsen täcker det columnar epitelet och det övergångsepitelet, så det är känsligt för gonokockinvasion, medan den kvinnliga scaphhoid och Det stratifierade skivepitelet är täckt med starkt motstånd, vanligtvis inte invaderat, eller inflammation är mycket lätt, så gonokock vaginit är sällsynt hos vuxna kvinnor. Eftersom den vaginala slemhinnan är columnar epitel är den unga flickan mottaglig för infektion och huden är inte lätt gonokock. Infektion, sällsynta fall av primär gonokock hudinfektion, människor har ingen medfödd immunitet mot gonokockbakterier, återinfektion kan uppstå efter återhämtning.
(2) Vidhäftning: Den specifika receptorn på gonococcal pili kan binda till motsvarande del av slemhinnecellen; det yttre membranproteinet II kan förmedla vidhäftningsprocessen; det kan också frisätta det IgAl-sönderdelande enzymet för att motstå avstötningen av cellen, Neisseria gonorrhoeae och epitelceller vidhäftar snabbt varandra, och pH i mikromiljön, jonbrygga, hydrofob struktur och könshormoner kan också främja vidhäftningsprocessen.
(3) Invasion och infektion: Neisseria gonorrhoeae adsorberar på mikrovilliet hos epitelceller, och det yttre membranproteinet I överförs till cellmembranet och sedan Neisseria gonorrhoeae fagocytoseras i cellerna, och Neisseria gonorrhoeae kan adsorberas på spermierna, som kan snabbt Stigande till livmoderhalskanalen kan livmoderhalsens slem tillfälligt förhindra Neisseria gonorrhoeae till livmoderhålet, och i livmoderhalsens kolumner kommer det att orsaka sjukdom. När gonokockcellerna invaderar cellerna kommer de att sprida sig och skada epitelcellerna. Cocci i submucosal utrymme, vilket orsakar infektion i submucosa.
(4) Bildande av lesioner: Neisseria gonorrhoeae invaderar det submukosala lagret och fortsätter att sprida sig. Det kommer att föröka sig i den första generationen inom 36 timmar. Genom den synergistiska effekten av endotoxin-lipopolysackarid, komplement och IgM, kommer det att bilda en inflammatorisk reaktion, vilket orsakar slemhinnans rodnad och svullnad och samtidigt på grund av vita blodkroppar. Aggregering och död, nekros och utgjutning av epitelceller, pus dök upp, och lesioner var mest allvarliga i körtlar och kryptöppningar.
(5) spridning spridning: inflammation orsakad av gonokockinfektion kan spridas längs urinvägarna, könsorganets spridning, hos män kan utsträckas till prostata, magsäckar, vas deferens och epididymis, hos kvinnor kan spridas till livmodern, äggledarna och bäckenet, allvarliga Neisseria gonorrhoeae kan komma in i blodomloppet och spridas till olika vävnader och organ i kroppen, vilket kan leda till spridning av infektioner.
Förebyggande
Gonorré förebyggande
Förhindrande av gonoré bör också noteras att patienter med gonoré bör förbjudas att sova med barn, särskilt flickor, bad eller offentliga bad, badhanddukar, etc. I områden med hög prevalens bör alla nyfödda behandlas med silvernitratlösning eller andra effektiva antibiotika. Ögondroppar.
1. Främja kunskap om sexuellt överförda sjukdomar, främja ädla moral och förbjuda prostitution.
2. Använd en kondom för att minska förekomsten av gonokockinfektion.
3. Profylaktisk användning av antibiotika kan minska risken för infektion. Du kan ta norfloxacin eller amoxicillin före och efter sexuellt samlag, vilket effektivt kan förhindra sexuellt överförda infektioner.
4. Sexuella partners behandlas samtidigt.
5. Patienter uppmärksamma personlig hygien och isolering, inte till sängen med familjen, barn, särskilt flickor och bad.
6. Implementera ett system med neonatal silvernitratlösning eller andra antibiotikadroppar för att förhindra gonokock-oftalmia.
Komplikation
Gonorrékomplikationer Komplikationer Prostatit Seminal vesikulit Epididymit Uretrit Uretral striktur Bäckensinflammationssjukdom Bäckenabcess Abdominal smärta
Komplikationer hos manlig gonoré
1, gonoré i kombination med symtom på prostatit: 1 dag eller en halv dag före början av akut prostatit stoppar ofta pus eller pusreducering, patienter har hög feber, täta urinering och smärta, rektal undersökning visade förstoring av prostata, ömhet, urin Flytande grumlighet, om behandlingen inte är i rätt tid, kan prostatan bilda abscesser, patienter med kronisk prostatit har i allmänhet inga uppenbara symtom, den första urinering efter vaknande, urinrörets öppning har ett tätningsfenomen, en liten mängd vita sekret släpps ut när penis pressas, utsöndringar Undersökning kan avslöja epitelceller, några pusceller och gonococcus.
2, gonoré i kombination med symtom hos vesikulit i seminalen: akut feber, täta urinering, dysuri, terminal urinblåsning och blod, rektal undersökning kan beröra den svullna magsäcken och svår ömhet, kroniska symtom, ingen rektal undersökning Det visar att den seminala vesikeln är hård och fibrotisk.
3, gonoré med epididymit symtom: vanligtvis i kombination med akut uretrit, ensidig, mestadels låg feber, epididymal svullnad och ömhet, ipsilateral ljumsken och nedre buken har reflex smärta, palpation visar epididymal svullnad, det finns Intensiv ömhet, urinbryggighet.
4, manlig gonoré kan kombineras med urinriktad striktur: upprepad gonoré kan orsaka urinremsa striktur, ett litet antal vas deferens eller till och med infarkt, och sedan sekundär spermcyst och infertilitet.
Komplikationer hos kvinnlig gonoré
Kvinnlig gonoré och symtom på gonokock bäckeninflammatorisk sjukdom, inklusive akut salpingit, endometritis, sekundär äggledsabcess i ovarier och bäcken, vilket orsakas av brott, peritonit, etc. på grund av behandling, missbehandling, kvinnliga gonorépatienter, extrem Det är lätt att utveckla från genitourinärinfektion till bäcken- och tillbehörsinfektioner, vilket orsakar allvarliga konsekvenser som infertilitet, buksmärta och till och med livshotande.
Symptom
Symtom på gonoré Vanliga symtom Brist på ryggsmärta, vitt slem, urin, illamående, libido, svår smärta, inflammation, aptitlöshet, anal klåda
De kliniska manifestationerna av gonokockinfektion beror på infektionsgraden, känsligheten hos organismen, bakteriens virulens, infektionens placering och infektionens längd. Samtidigt är det relaterat till kroppens hälsa, om sexlivet är överdrivet och alkoholism. Enligt kliniska manifestationer kan gonoré delas in i ingen gonoré och komorbid gonoré, asymptomatisk och symptomatisk gonoré, spridd gonoré och akut och kronisk gonoré.
För det första ingen komplikation gonoré
(a) hane ingen komplikation gonoré
Akut gonokock uretrit (akut gonoré): Inkubationsperioden är 1-14 dagar, ofta 2-5 dagar. Från början, akut uretrit, rodnad, klåda och lätt stickningar i urinröret, följt av tunt slemavlopp, vilket orsakade urinering av urinering. Efter cirka 2 dagar blev utsöndringen klibbig, urinröret flödade över och pus var djup. Gul eller gulgrön, åtföljd av ökade symtom på urinvägar obehag, rodnad och svullnad utvecklas i hela penan glans och en del av urinröret, täta urinering, brådskande, dysuri, svårighet att urinera, obekvämt rörelse och ofta penad erektion på natten. Det kan vara svullnad i lymfkörtlarna, rodnad och smärta och kan också vara purulent. Den första veckan med akuta symptom är den allvarligaste. Om de inte behandlas, minskar symtomen gradvis eller försvinner efter ungefär en månad. Två veckor efter början av akut främre uretrit har cirka 50-70% av patienterna gonokockinvasion av den bakre urinröret, som kännetecknas av urinbesvär, täta urineringar och akut urinretention. Det kännetecknande för dysuri är att smärtan eller smärtan förvärras i slutet av urinationen och att den är akupunkturliknande. Ibland finns det en perineal smärta och det kan inte finnas någon hematuri. Efter 1-2 veckor försvann symptomen gradvis. Systemiska symtom är i allmänhet milda, några kan ha feber upp till 38 ° C, allmän sjukdom, aptitlöshet och så vidare.
Kronisk gonokock uretrit (kronisk gonorré): Symtom som varar mer än 2 månader kallas kronisk gonokock uretrit. Eftersom behandlingen inte är grundlig kan Neisseria gonorrhoeae döljas i urinrörskroppen, parauretrala körtlar och urinrörskrypt för att göra sjukdomskursen kronisk. Om patientens konstitution är svag, som lider av anemi, tuberkulos, börjar tillståndet med en kronisk process, mestadels för den främre infektionen och den bakre urinrörsinfektionen, bra invasion av urinrörsbulan, membranet och prostata. Kliniska manifestationer av urinröret har ofta klåda, brännande känsla eller mild stickningar, fint urinflöde, urineringssvaghet, droppar. De flesta patienter har en liten mängd serös sputumtätning i urinvägarna tidigt på morgonen. Om könsorganen eller penilrötterna pressas, flyter det tunna slemet över. Urinen är i grunden klar, men det finns siden.
(2) Kvinnor utan komplikation gonoré
Huvuddelen av den primära kvinnliga gonokockinfektionen är livmoderhalsen. Neisseria gonorrhoeae kan vidhäfta det skiktade squamösa epitelet. Infektionsstället för Neisseria gonorrhoeae observeras vid korsningen av det skivepiteliga epitelet i livmoderhalsen. Patienter med gonorécervicit har ofta inga symtom i ett tidigt skede, så inkubationsperioden är svår att fastställa. Cervikal trängsel, ömhet, ökad purulent utsöndring, ofta könsgenia och brännande känsla, ibland lägre buksmärta och smärta i ryggen. Dessa atypiska symtom gör att patienter ofta inte går till kliniken, så de blir den viktigaste källan till infektion; gonokock uretrit uppträder ofta 2-5 dagar efter sexuellt samlag, urinvägsstoppning, ömhet och purulent sekretion, mild Frekvent urinering, brådskande, dysuri, brännande känsla under urinering, purulent urladdning i urinröret; gonokock vestibulär körtelinflammation ofta ensidig, rodnad och svullnad i öppningen av körtlarna, svår smärta, svår abscessbildning. Det finns feber och andra systemiska symtom; gonokockvaginit är mindre vanligt, de äldres symtom är milda, vissa patienter har svullnad i buken, ryggsmärta, vaginal urladdning, vissa patienter har lägre buksmärta och menorrhagi; kvinnor gonokock vulva Vaginit, manifesterad som vulvar och vaginal inflammation. Det finns mer vaginal purulent sekret, ibland gula och gröna sekret i slidan och urinröret, smärtsam urinering och rodnad i vulven. Utsöndringar kan strömma till anus och orsaka irritation. I svåra fall kan den infektera ändtarmen och orsaka gonokockproctit.
För det andra finns det komplikationer av gonoré
(a) Män har komorbid gonorré:
Gonoré uretrit har olika komorbiditeter, främst prostatit, seminal vesikulit, epididymit.
1. Prostatit: Akut prostatit orsakas av utsläppsröret och körteln av Neisseria gonorrhoeae som kommer in i prostata. Det finns feber, frossa, perineal smärta och urinvägsinfektioner åtföljda av dysuri. Prostatan är svullen och öm när den undersöks. Neisseria gonorrhoeae är emellertid inte en vanlig orsak till akut prostatit. Prostatan orsakad av Neisseria gonorrhoeae kännetecknas huvudsakligen av kroniska lesioner, symtomen är milda, det är perinealt obehag, smärta i penis, det finns ett "mun" -fenomen på morgonen urinrörets öppning och lymfen i urinen ses. Prostatamasseringsvätskan har pus och lecitin. , smet eller kultur för att hitta gonococcus, analundersökning kan röra vid små knölar på prostata, och det finns obehag eller smärta, dränering av pus nära dräneringsröret för att bilda ärrkontraktion påverkar utlösning, vilket resulterar i infertilitet.
2. Epididymit: uppstår vanligtvis efter akut uretrit, oftast på ena sidan. Det är låg feber, epididymis svullnadsmärta, ipsilateral ljumsken och nedre buken har reflexsmärta, början och testikelgränserna är tydliga, gradvis oklara, testikel ömhet, svullnad, svår ömhet. Urinen är ofta molnig. Det kan finnas prostata och seminal vesikulit samtidigt.
3. Seminal vesikulit: feber, frekvent urinering, brådskande, dysuri, ingen urinlöshet och blod. Rektal undersökning kan beröra den svullna seminala vesikeln och ha svår ömhet. Kronisk seminal vesikulit har i allmänhet inga symtom. Rektal undersökning visar att den seminala vesikeln är hård och fibrotisk.
4. Urinrörsinflammation: förekommer i perineum eller runt, det finns fingerstorlekar, smärta, akut suppuration och magsår, komprimering av urinröret och dysuri, kan ha systemiska symtom som feber, långsam framsteg.
5. Uretral striktur: upprepade författare kan orsaka urinriktad striktur, ett litet antal vas deferens eller hinder kan förekomma, dysuri, tunnare urinvägar och svår urinretention. Sekundära vas deferens, blåscystor i seminala vesiklar och infertilitet.
(2) Kvinnor har komorbid gonorré
Den huvudsakliga komplikationen av kvinnlig gonoré är gonokockboxinflammation, såsom akut salpingit, endometritis, sekundär äggledare i ovarier och bäckenabcess orsakad av brist, peritonit. Plötsligt börjar efter menstruation, det finns hög feber, frossa, huvudvärk, illamående, kräkningar, smärta i nedre del av buken, ökad purulent leukorré. Båda sidorna av fästet är förtjockade och mjuka.
För det tredje, andra delar av gonoré:
1. Gonoré konjunktivit: Nyfödda förekommer mer än 2-3 dagar efter födseln, främst bilateral, svullnad i ögonlocken, purulent sekretion, vuxna mestadels självinokulering, ofta ensidig, med samma nyfödda. På grund av pusflödet, om "pustögat" är försenat, är hornhinnan ångande och hornhinnan perforerad. Leda till blindhet.
2. gonokock faryngit: främst sett i oralsex, den så kallade "mun" västerländska homoseksuella eller heteroseksuella är vanligare, manifesteras som akut faryngit eller akut tonsillit, ibland feber och livmoderhalscancer lymfadenopati. Det finns symtom som torr halsbesvär, ont i halsen, ont i halsen.
3. Neisseria gonorrhea: främst sett i manlig homosexualitet. Kvinnor orsakas främst av vaginala infektioner. Bordet är brådskande och tungt, det finns pus och blod, slamhinnor i analkanalen, purulent utsöndring, positiv gonokockkultur.
Fjärde, spridd gonokockinfektion
Den spridda gonokockinfektionen beror på spridningen av gonokockbakterier genom blodomloppet till hela kroppen, vilket resulterar i en allvarligare systeminfektion. Incidensen är cirka 1% av patienterna med gonoré. De flesta av de stammar som orsakar spridd gonokockinfektion är AHU-näringsrika. Stammen har stabil resistens mot normalt humant serum. Dessutom har normalt humant serum IgM-antikropp mot gonokock lipopolysackarid. Med hjälp av komplement är den stor. De flesta gonococcus har en bakteriedödande effekt, och patienter som saknar C5, C6, C7 och C8 komplementkomponenter är benägna att gonococcal sepsis eller gonococcal meningitis.
(1) gonococcal sepsis: patienten börjar ha feber, kroppstemperaturen kan vara så hög som 40 ° C, men vanligtvis mellan 38 ° C och 40 ° C, frossa är inte vanliga, vissa patienter har hudpapper, ecchymoser, pustler, hemorragiska Eller nekrotiserande hudskador, vissa hudskador har smärtsymtom. I lesionerna kan fluorescerande immunfärgning användas för att detektera tillväxten av Neisseria gonorrhoeae eller odlade Neisseria gonorrhoeae och PCR för att detektera Neisseria gonorrhoeae DNA-positiva. Den patologiska vävnaden i lesionen är ytligt magsår med pusbildning, diffus inflammation i dermis och subkutan vävnad, polymorfonukleär leukocytinfiltration, involvering av små blodkärl, trombos och lokal nekros.
(B) gonokockartrit: svullnad i lederna, smärta, för en eller flera septiska artrit. Generellt asymmetriska, som sällan involverar höft-, axel- och ryggleden. Ledvätsketestet har närvaron av gonoré, vilket kan leda till fibros orsakad av benförstörelse och stelhet i benen och lederna.
(C) gonokock keratos: kan bero på gonokocker eller dess gifter, kan inte hitta gonokockskador i hudskadorna, ofta med gonokock artrit, hudskador är bra för händer och fötter, vristhäl och midja . Fläckar eller plack som vanligtvis är plattade och svagt svullna, koniska, gula eller kopparröda eller gråaktiga. Hudlesionerna i palmar sputum visade kåt hyperplasi och stor keratinisering.
(D) gonokock endokardit: gonokock är den huvudsakliga patogenen för endokardit under de första decennierna av antibiotikabruk, gonokock endokardit är nästan osynlig, gonokock endokardit och andra typer Endokardit har samma kliniska manifestationer. Endokardit involverar ofta aorta- eller mitralventil, subakut eller akut endokardit på grund av snabb förstörelse av ventilen, vilket leder till dödsfall.
(5) gonokock meningit: ovanligt, kan vara förknippat med artrit och ett typiskt utslag för att särskilja meningokock meningit.
För det femte gonorréens påverkan på graviditet och nyfödda
När en kvinna går gonorré med salpingit kan det leda till infertilitet. Förekomsten av infertilitet orsakad av kvinnlig gonorré är cirka 20%, och förekomsten av infertilitet ökar med ökningen av antalet infektioner. För kvinnor som är smittade med gonoré mer än tre gånger kan förekomsten av infertilitet uppgå till 70%. Cervikal gonokockinflammation kan leda till tidigt bristning av membran, intra-amniotisk infektion, intrauterin infektion, intrauterin tillväxtfördröjning och tidig förlossning. Nyfödda har hög sjuklighet och dödlighet på grund av för tidig födsel, låg kroppsvikt och sepsis. Uppströms infektion av gonokockbakterier efter födseln kan orsaka endometritis, puerperalfeber, svår postpartum sepsis, neonatal gonokock konjunktivit och vaginal vaginal vulvitis.
Undersöka
Gonoréundersökning
Laboratorieinspektion:
Neisseria gonorrhoeae laboratorietester inkluderar utstryk, kultur för att kontrollera Neisseria gonorrhoeae, antigendetektion, test av läkemedels mottaglighet och PPNG-bestämning och genetisk diagnos.
(1) Utseendeundersökning:
Ta patientens urinriktade sekretioner eller livmoderhalsutsöndringar för Gram-fläck och hitta Gram-negativa i polymorfonukleära leukocyter
Diplococcus, smet för patienter med enkel gonokock anterior uretrit med ett stort antal purulenta sekret, den positiva frekvensen för denna metod är cirka 90%, kan initialt diagnostiseras, kvinnliga kolonutsöndringar, fler bakterier, dålig känslighet och specificitet Den positiva frekvensen är bara 50-60%, och det finns en falsk positiv. Därför rekommenderar Världshälsoorganisationen att använda en kulturmetod för att kontrollera kvinnliga patienter. Kronisk gonoré har färre positiva gonokockbakterier i sekreten, så den positiva frekvensen är låg. Därför bör prostatamassagelösningen tas. Öka detekteringsgraden.
Det svällande smetet konstaterade att Gram-negativ diplococcus inte kunde diagnostisera gonoré, eftersom andra Neisseria-arter är normala i svalget, och smet positivt för atypiska symtom bör undersökas ytterligare.
(2) Utbildning och inspektion:
Neisseria gonorrhoeae-kultur är ett viktigt bevis för diagnos. Kulturmetoden är en känslig metod för män med milda eller asymptomatiska symtom. Så länge kulturen är positiv kan diagnosen bekräftas. Innan den genetiska diagnosen rekommenderas kulturen av Världshälsoorganisationen. Det enda sättet att screena för gonoré är att använda modifierat Thayer-Martin (TM) medium och New York City (NYC) medium. Den inhemska användningen av chokladagar eller blodagarmedium innehåller antibiotika, valfritt Hämmar tillväxten av många andra bakterier, kultur vid 36 ° C, 70% fuktighet, 5% -10% CO2 (ljus) miljö, 24-48 timmars observation, kolonimorfologi, Gramfärg, oxidation Identifiering genom enzymtest och sockerfermentationstest, den positiva kulturen är 80% -95% för män och 80-90% för kvinnor.
(tre) antigendetektion
1. Fast fasenzymimmunanalys (EIA): Det kan användas för att upptäcka gonokockantigener i kliniska prover.Det kan användas i kvinnopopulationer i områden med hög prevalens och kan inte odlas eller prover behöver skickas under lång tid. För att diagnostisera gonokockinfektioner.
2. Direkt immunofluorescensanalys: direkt detektion genom detektion av monoklonala antikroppar mot det yttre membranproteinet I i Neisseria gonorrhoeae
Epidemisk fluorescensprov, men för närvarande är känsligheten för manliga och kvinnliga bipolära prover inte hög, specificiteten är dålig och bedömningsnivån för experimenteraren, så experimentet kan inte rekommenderas för diagnos av gonokockinfektion.
(fyra) genetisk diagnos
1. Genprobdiagnos av Neisseria gonorrhoeae
Proberna för gonokockgenprober är: plasmid-DNA-prober, kromosomala genprober och rRNA-genprober.
(1) Plasmid-DNA-sond
1 Dold plasmid-DNA-sond, Neisseria gonorrhoeae-plasmid är uppdelad i tre typer: zygositetsplasmid, den största molekylen, 36 kb DNA; läkemedelsresistent plasmid består av två plasmider, DNA-längd 5,6 kb respektive 7,1 kb; dold plasmid 4,2 kb, Den kryptiska plasmiden finns i 96% av kliniska isolat av Neisseria gonorrhoeae. Andra Neisserias innehåller inte denna plasmid, så dess sekvens kan användas som en specifik DNA-sond för att detektera Neisseria gonorrhoeae. Torres använder nukleinsyrahybridiseringsteknik för att detektera Neisseria gonorrhoeae. För att dölja plasmiden användes sonden för att detektera 134 stammar av Neisseria gonorrhoeae och 131 relaterade stammar. 124 stammar av Neisseria gonorrhoeae var positiva för hybridisering, svarande för 93%. De kunde också korsreagera med andra Neisseria-arter. Nålens känslighetstest visade att 102 CFU Neisseria gonorrhoeae kunde detekteras. Det visade sig att CPPB-gensekvensen i den kryptiska plasmiden var i alla gonokockkromosomer (inklusive stammar utan plasmiden), så CPPB-gensonden har god specificitet och känslighet. Sex, Torres et al. Använde CPPB-genproben för att detektera 201 kliniska prover med användning av ett icke-radioaktivt digoxinmärkningssystem med känslighet och specificitet på 95% respektive 98%.
2 läkemedelsresistent plasmid-DNA-sond
Neisseria gonorrhoeae-resistenta plasmider kan delas in i:
1 Den toxinproducerande gonokockbakterien (PPNG) är positiv för ß-laktamas;
2 har en hög nivå av plasmidmedierad resistens mot tetracyklin gonokock (TRNG).
PPNG-stammen isolerades först i laboratoriet 1976. Stammen innehåller en gen som kodar för ett serotoninproducerande enzym. Genen kan integreras i kromosomen eller i plasmid-DNA, och det senare kallas mestadels det blå. Toxinenzymplasmid, två typer av plasmider, 7,4 kb respektive 5,3 kb, Pescador utformade en specifik sond för att detektera gonokock-p-laktamasgen 1998, som märktes med enzymkemiluminescens, flytande fashybridisering. Den fotometriska mätningen är mängden specifika hybrider 104-105 CFU av PPNG-stam kan detekteras inom 4 timmar. Trots att TRNG-stam är resistent mot tetracyklin är den vanligtvis känslig för ß-laktamas- och kinolonantibiotika. Därför i experimentet Känslighetstestet kan klassificeras som känsliga bakterier Pescador använder en oligonukleotidprobe mot tetracyklin gonococcal (TRNG) tetmgen, som medieras av tetracyklin, märkt med enzymkemiluminescens och hybridiserad i flytande fas. 1,5 x 104 CFu Neisseria gonorrhoeae innehållande tetm-genen detekterades direkt från kliniska prover.
(2) Kromosomsond
Kromosomala prober inkluderar kända genprober, såsom pili-DNA-prober och paI-genprober, som spelar viktiga roller i processen för gonokockinfektion av mänskliga celler; genprober med okänd funktion, dessa prober Sekvensen är komplementär till den specifika sekvensen för kromosomen, men funktionen för dessa gensekvenser är inte känd för närvarande. Ovanstående två kromosomala prober har lågt detektionsnummer på grund av det låga kopieringsnumret för den komplementära sekvensen i Neisseria gonorrhoeae, så detektions känsligheten är låg, så den används i allmänhet inte om Det finns särskilda forskningsändamål.
(3) rRNA-gensond
RRNA-gensonden använder ett DNA som är komplementärt till rRNA som en sond, och målsekvensen för sonden är en rRNA-sekvens, och gensonden för rRNA kännetecknas av:
1 kan öka känsligheten för sondetektering, rRNA-gensond kan samtidigt detektera rRNA-molekyler och DNA-molekyler;
2rRNA är evolutionärt bevarad;
3 hybridiseringsmetod är enkel och snabb;
4 Eftersom innehållet i rRNA är högt behöver inte provet anrikas. Gonokockdetekteringssonden PACE C som produceras av Gen-Probe i USA använder rRNA och dess gen som målsekvens för detektering och är radioaktivt märkt och kan detekteras inom 2 timmar. Peter använde denna sond för att detektera 395 kliniska prover. Känsligheten och specificiteten var 92,9% respektive 99,4%. Han trodde att PACE C-systemet var en pålitlig metod för screening av gonokockbakterier i kliniska prover. Sonden kan också upptäcka Asymptomatiska gonokockinfektioner, som för närvarande är svåra att uppnå.
2, gonokock genamplifiering detektion
Den ovan beskrivna sondtekniken upptäcker gonokockmetoden, även om den har en stor förbättring av känslighet, specificitet och bekvämlighet än odlingsmetoden, men den har fortfarande vissa begränsningar, såsom Neisseria gonorrhoeae som kräver prov i de flesta fall. Koncentrationen är mycket hög, och utseendet på PCR-teknik och ligaskedjereaktion förbättrar ytterligare känsligheten för att upptäcka Neisseria gonorrhoeae.Den har fördelarna med snabb, känslig, specifik och enkel och kan direkt upptäcka en mycket liten mängd patogener i kliniska prover.
(1) Extraktion av Neisseria gonorrhoeae DNA
1 DNA-extraktion från kultur
Den odlade Neisseria gonorrhoeae löstes i ett alkaliskt lysat i en koncentration av 102 cfu / ml. Lysatet bestod av 1 M NaCl 1 M NaOH och 1% natriumdodecylsulfat. Lysatet blandades och kokades under 1 min, sedan 100 | il. Det alkaliska lysatet neutraliserades med 1 M Tris pH 7,0, extraherades en gång med Tris-jämviktfenol, extraherades en gång med fenol-kloroform och utfälldes sedan med absolut etanol eller isopropanol. Det extraherade DNA löstes i 30 ul destillerat vatten eller TE-buffert. I vätskan.
2 extraktion av klinisk bomullspinneprov
Bomullspinnarna med utsöndringarna pressades i 2 ml steril fysiologisk saltlösning eller PBS-buffert under 1 min för att lösa proverna i lösningen så mycket som möjligt och bomullspinnarna kasserades och suspensionen var vid 2-3000 r / Centrifugera under 5 minuter vid min, aspirera supernatanten och lösa upp cellerna igen i 100 ul 1 x PCR-buffert innehållande 0,4% Tween 20 och 200 μg / ml proteinas K. Cellsuspensionen värmdes vid 50-60 ° C under 1 timme, värmdes sedan vid 95 ° C under 10 minuter. Det inaktiverade proteinas K centrifugerades vid 12000 r / min under 10 minuter, och supernatanten innehöll en DNA-mall.
(2) Design av PCR-primrar
Eftersom CPPB-genen från Neisseria gonorrhoeae är närvarande i gonokockkromosomen och i den 4,2 kb kryptiska plasmiden och i 96% av Neisseria gonorrhoeae är många PCR-primrar designade i CPPB-genregionen.
Målgenprimersekvensfragmentlängd (bp)
CPPB NG1 5'GTT TGG CTG GTT GAT TCA AG 3 '633
NG2 5'GCA AGA TTT CCG ATTT GGC G 3 '
CPPB HO1 5'GCT ACG CAT ACC CGC GTT GC 3 '390
HO2 5'CGA AGA CCT TCG AGC AGA CA 3 '
rRNA Primer 1 5'-AGG CTG TTG CCA ATA TCG GC-3 '206
Primer 2 5'-ACA CTC GAG TCA CCC AGT TC-3 '
CPPB GC1 5'CTT ATC GTT TGG CTG GTT GAT TC 3 '435
GC2 5'ACC AAG ACC AAA GGT TTG ACA CTG 3 '
GC3 5'ATT TTC CAG TGT CAA AC 3 '241
GC4 5'TAT TCA AGC CCT ATC TG 3 '
(3) PCR-förstärkning
Ta 2 μl Neisseria gonorrhoeae-DNA-extrakt och tillsätt 28 μl av reaktionslösningen.Den slutliga PCR-reaktionslösningen innehåller 100 μmol / L dNTP, 0,5 μmol / L primers, 1 U Taq DNA-polymeras, 1,5 mmol / L Mg2 + och steril paraffinolja. 30 ul, 1000 r / min centrifugering under 30 s, PCR-amplifieringscykel, reaktionsförhållanden: 94 ° C denaturering 1 min, sedan 94 ° C 30s, 57 ° C 1min, 72 ° C 1min, totalt 30 cykler och slutligen 72 ° C förlängning 5min.
Den amplifierade produkten elektroforesades på en 2% agarosgel under 30 minuter, färgades med etidiumbromid och det amplifierade DNA-fluorescerande bandet observerades under ultraviolett ljus. Storleken på den amplifierade molekylen skulle vara förenlig med storleken på den amplifierade målsekvensen.
(4) Känslighet och specificitet för PCR
Eftersom CPPB också innehåller CPPB-genen på gonokockkromosomen som inte innehåller den kryptiska plasmiden, kommer 96% av gonokockbakterierna att ha en kryptisk plasmid. Därför har primrarna som använder CPPB som målsekvens extremt hög känslighet. Experiment visar att den allmänna traditionen Enstegs PCR (GC1-GC2) -metod kan detektera tre Neisseria gonorrhoeae, medan enkelrörs-kapslade PCR (GC2-GC4) kan detektera ≤0,3 Neisseria gonorrhoeae (9 CPPB-gener). Dessa primers testades med specificitet. Det kan förstärka DNA från Neisseria gonorrhoeae, men producerar inte specifika produkter för N. gonorrhoeae.
(5) PCR-metod med enkel rör
Baserat på den traditionella kapslade PCR var två par PCR-primrar specialdesignade. De två yttre primrarna (GC1, GC2) var 25b, glödgningstemperaturen var relativt hög (68 ° C) och de kapslade inre två primrarna, GC3-GC4. För 17b-glödgningstemperaturen är lägre (46 ° C) är de andra komponenterna i PCR-reaktionslösningen desamma som den allmänna PCR, så att den yttre primern förstärks först genom att kontrollera glödgningstemperaturen (68 ° C), efter 20-30 cykler (första gången) PCR), och reducera sedan glödgningstemperaturen (46 ° C) för att få de inre primrarna att använda den första PCR-produkten som en mall för kapslad amplifiering, PCR-känsligheten kan nå 0,3 Neisseria gonorrhoeae.
(6) Neisseria gonorrhoeae ligasekedjereaktion (LCP) detektionsmetod
För närvarande används metoden för PCR-detektion av Neisseria gonorrhoeae i stor utsträckning, och dess specificitet och känslighet förbättras kontinuerligt. Samtidigt tillämpas en annan genetisk diagnosteknik, ligaskedjereaktion (LCP), med dess höga specificitet och höga känslighet. Vid detektering av cocci skiljer sig LCP från PCR genom att LCP använder fyra par primrar, det använda enzymet är ligas, ligas kan koppla samman två angränsande primrar och de två primrarna kan användas som mallar för de andra två primrarna. Det senare kan ligeras under verkan av ligas och kan användas som en mall för 30-40 cykler. Mallbehandlingsmetoden som används för LCP motsvarar framställningen av PCR-mall. Sonden som används för LCP kan utformas på CPPB-genen. Abbott Laboratories är designad på kromosomala gensekvenser, såsom opa-1-genen, och designade fyra LCP-prober i 48 bp-regionen i opa-1-genen, eftersom opa-1-genen är 11 gånger i gonokockkromosomen. Upprepa därför uppsättningen av LCP-sonder har hög känslighet och specificitet, LCP-reaktionsprocess:
Mallen sattes till LCP-reaktionslösningen, LCP-reaktionslösning: 20 mmol / L Tris-HCl pH 7,6; 100 mmol / L KCl 10 mmol / L MgCl2; 1 mmol / L EDTA; 10 mmol / L NAD +; 10 mmol / L DTT , två intilliggande prober med märkning av varje 40fmol / L, omärkt sond varje 40fmol / L, 15U värmebeständigt ligas, reaktionsbetingelser: 97 ° C 1s, 55 ° C 1s, 62 ° C 50s, 40 cykler 100 ul av reaktionsprodukten sattes till mikroplattan på mikroplattan, och färgreaktionen genomfördes. Slutligen avlästes ljusvärdet av en mikroplåtläsare. Enligt Buimers experiment erhölls LCP-känsligheten för detektering av den uretriska bomullspinnenprovet för manliga 100%, och urinen erhölls. Provet var 88,9%, den kvinnliga cervikalsvampen var 95,4% och specificiteten för LCP-metoden var så hög som 100%, vilket var signifikant högre än PCR-specificiteten och undviker förekomsten av falska positiver.
3. Försiktighetsåtgärder för klinisk genetisk diagnos av Neisseria gonorrhoeae
För närvarande använder den genetiska diagnosmetoden för klinisk detektion av Neisseria gonorrhoeae huvudsakligen PCR-metoden, men denna metod bör uppmärksamma flera problem vid klinisk detektion.
(1) Grundkonstruktion Förutom de gonokocka PCR-primrarna som anges ovan kan den också utformas från andra gener, men
Det är primersekvensen som bör vara specifik, eftersom bakteriens kromosom är stor, många gensekvenser är inte tydliga; samtidigt finns det en viss homologi mellan bakterierna, och det finns också homologi mellan plasmidsekvenserna i bakterierna. Därför måste primrar utformas för jämförande analys av gendatabaser och specificitet och känslighetsförsök bör genomföras och primrar bör väljas för klinisk detektion.
(2) Klinisk provbearbetning För kliniska prov, desto renare PCR-mallen kräver, desto bättre ska ställningen tas när man samlar prov. För asymptomatiska patienter bör lämplig provtagning utföras för att säkerställa insamling av patogena bakterier. På grund av komplexiteten hos de kliniska proverna är PCR-amplifieringen av proverna ibland inte idealisk. Detta kan bero på överdrivna föroreningar, som kräver ytterligare rening. Exempelvis kommer rening genom extraktion av fenol-kloroform att förbättras. Denna reningsmetod är besvärlig och ett kommersiellt tillgängligt DNA-reningskit är för närvarande tillgängligt för relativt enkel extraktion av DNA med hög renhet från kliniska prover.
(3) Detekteringsmetod för PCR-produkter Nyligen använder klinisk PCR-detektion av Neisseria gonorrhoeae nästan alla elektrofores för att identifiera PCR-produkter. Denna metod har många problem, såsom falska positiva och falska negativa resultat på grund av subjektivitet av makroskopisk observation. Hybridkolorimetri används för närvarande istället för elektrofores för att förbättra resultatens specificitet och känslighet.
Sammanfattningsvis har PCR-metoden och LCP-metoden avsevärt förbättrat känsligheten och specificiteten jämfört med den traditionella kulturmetoden, och tiden förkortas också kraftigt. Med den kontinuerliga förbättringen av genteknologiteknologin upptäcks PCR-metoden och LCP-metoden i gonococcus Blir en rutinmässig detekteringsmetod.
(5) Mottaglighetstest: ytterligare känslighetstest efter odlingspositivt, känslighetstest med pappersdiffusionsmetod eller minimal hämmande koncentration (MIC) med agarplattans utspädningsmetod för att vägleda valet av antibiotika.
(6) PPNG-upptäckt : ß-laktamas, med hjälp av kvantitativ metod med pappersyror, med hjälp av Whatman I-filterpapper PP-NG, kan stammen göra sin färgändring från blå till gul, positiv för PPNG, negativ för N-PPNG.
Diagnos
Diagnostik av gonoré
1. Sjukdomar identifierade av män och kvinnor med gonoré
(1) Icke-specifik uretrit: Det finns ofta uppenbara orsaker till sjukdomen, såsom infogning av katetern, urinrörssonden, könsdelstarmkanalen eller inflammation i angränsande organ, och utsöndringssprutfläcken kan upptäcka grampositiva kockor.
(2) NGU: kliniska symtom liknar gonoré, men lättare, inkubationsperioden är längre än gonoré, upp till 1 till 3 veckor, utsöndringen är liten och serös, dysuri är sällsynt, inga systemiska symptom och utsöndringar tas för undersökning. Klamydia eller mykoplasma kan ofta hittas.
(3) mjuk knäböj: skada är vanligtvis belägen i det yttre könsdelområdet, inträffar i urinröret, den scapular fossa har purulenta sekret, urinrödhet och svår smärta, magsår kan upptäcka Ducrey Haemophilus.
(4) Genital herpes: orsakad av HSV, skadorna är klusterblåsor, vanligtvis belägna i yttre könsorgan, perianal, ibland i livmoderhalsen, inträffar i urinröret, det kan finnas en liten mängd utsöndringar och urinrör stickande eller obehag, ofta åtföljt av lokal brännande känsla Smärtan är uppenbar och kan upprepas.
(5) fast läkemedelsutbrott: det finns en historia av medicinering eller injektionsmedicin, främst orsakad av sulfonamider, barbiturater, salicylater eller tetracykliner, uppträder ofta i könsslemhinnans slemhinnorytem, ödem, blåsor, Erosion och utsöndring etc. med klåda eller smärta, ingen rodnad och valgus i urinröret.
(6) tuberkulös uretrit: kan ha stickningar i urinröret och en liten mängd sekret, men ingen historia av sexuell kontakt, kan inte hitta gonokocker, kan hittas tuberkulos, tillsammans med andra delar av symtomen på tuberkulos.
2. Sjukdomar identifierade med manlig gonoré
(1) Förhudsbalanit: vanligtvis i förhuden är för lång eller phimos, främst orsakad av smegma-stimulering och sekundär pyogen infektion, intracapsular innerblad, glans och koronar sulcus rodnad, mer smuts och purulent sekret , inga urinvägsymtom och rodnad och svullnad i urinröret, pus osv.
(2) Uringrumlighet: Urinen är mjölkvit och det finns saltkristalliserat sediment efter att ha stått, utan åtföljande symtom.
3. Sjukdomar identifierade med kvinnlig gonoré
(1) Candida vaginitis: klåda i köns- och vaginalöppningen, mer vaginal urladdning, såsom vattnig eller ostmassig, rodnad i vaginal slemhinna, erosion, kan ha en vit film fäst vid vaginalväggen, ta en vit film smeta mikroskopisk undersökning synliga bakterier Silke och sporer.
(2) Trichomonas vaginit: medvetet vaginal pruritus i slidan, vaginal sekret ofta rosa skum, vaginal slemhinna mer blödande, livmoderhalsen kan ha jordgubbliknande utsprång och punktlig blödning, vaginal sekret Trichomonas kan upptäckas.
(3) Bakteriell vaginos: främst eldfast leukorré, gråvit, icke-suppurativ, med en "fiskliknande" lukt, Gardner bacilli och anaeroba bakterier kan upptäckas från vaginal sekret.
(4)幼女金葡菌性外阴炎：多见于学龄前或学龄期女孩，好发于夏季，外阴，肛周红肿，有脓疱或脓性分泌物，伴疼痛或瘙痒，分泌物涂片可检出Gram阳性球菌。
4.与GPID鉴别的疾病
有急性阑尾炎，感染性流产，盆腔子宫内膜异位症，异位妊娠，卵巢囊肿蒂扭转或破裂等。
