การทดสอบทางภูมิคุ้มกันสำหรับภาวะมีบุตรยาก

การตรวจสอบทางภูมิคุ้มกันของภาวะมีบุตรยากรวมถึงภาวะมีบุตรยากจากการต่อต้านสเปิร์มเพศชาย, ภาวะมีบุตรยาก allogeneic ป้องกันอสุจิของเพศหญิงและเพศหญิงป้องกัน Zona pellucida ภาวะมีบุตรยาก ควบคุมอาหาร: 1 รายการทดสอบส่วนใหญ่ต้องการการเก็บตัวอย่างเลือดในขณะท้องว่างในตอนเช้าควรจะอดกาแฟชาที่รัดกุมน้ำตาลสูงและเครื่องดื่มโคล่า 2 การทำงานของตับไขมันในเลือดการแข็งตัวของเลือดและรายการอื่น ๆ ต้องอดอาหารเป็นเวลา 12-16 ชั่วโมงและ อาหารเย็นล่วงหน้าหนึ่งวันควรหลีกเลี่ยงการดื่มแอลกอฮอล์ห้ามอาหารไขมันสูงโปรตีนสูง 3 อาหารที่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการทดสอบไขมันในเลือดอย่างน้อยภายใน 3 วันก่อนที่เลือดจะดึงดูดให้รักษาอาหารปกติ ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกประเภทผู้เชี่ยวชาญ: สุพันธุศาสตร์และการจำแนกประเภทการตรวจที่เหนือกว่า: การตรวจของเหลวในร่างกาย บังคับเพศ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: การอดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: ค่าปกติ: ไม่ เหนือปกติ: เชิงลบ: ผลของการทดสอบเชิงลบควรเป็นปกติ บวก: การทดสอบในเชิงบวกบ่งชี้ว่าเป็นโรคที่อาจมีบุตรยาก เคล็ดลับ: หยุดการมีเพศสัมพันธ์เป็นเวลา 4 ถึง 7 วัน ไม่สามารถใช้ฮอร์โมนเทสโทสเตอโรนโพรเพโอเนต, เทสโทสเทอโรนฟีนิลอะซิเตทและไม่สามารถใช้ 1 สัปดาห์ก่อนการทดสอบ ค่าปกติ ผลการทดสอบภูมิคุ้มกันต่าง ๆ เป็นปกติและลบ ความสำคัญทางคลินิก ผลลัพธ์ที่ผิดปกติการทดสอบทางภูมิคุ้มกันหลายรายการบ่งชี้ภาวะมีบุตรยาก ผู้ป่วยที่เป็นหมันชายและหญิงมีบุตรยากต้องได้รับการตรวจ ผลลัพธ์ในเชิงบวกอาจเป็นโรค: ภาวะมีบุตรยาก, ภาวะมีบุตรยากชาย, เทียมหญิงเทียม, ข้อควรระวังความผิดปกติของอวัยวะเพศชาย คนที่ไม่เหมาะสม: ยังไม่ทราบ ข้อห้ามก่อนการตรวจสอบ: ครั้งแรกเมื่อรวบรวมสเปิร์ม: 1. ก่อนออกน้ำอสุจิผู้ป่วยควรหยุดการมีเพศสัมพันธ์เป็นเวลา 4 ถึง 7 วัน ไม่สามารถใช้ฮอร์โมนเทสโทสเตอโรนโพรเพโอเนต, เทสโทสเทอโรนฟีนิลอะซิเตทและไม่สามารถใช้ 1 สัปดาห์ก่อนการทดสอบ ควรหยุดดื่มภายใน 1 เดือนก่อนการทดสอบซึ่งจะต้องทำ 2 เมื่อถ่ายน้ำอสุจิสบู่อ่อนหรือน้ำมันพาราฟินสามารถใช้สำหรับการนวดอวัยวะเพศชายตัวอย่างจะถูกเก็บในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อสามารถใช้ถุงยางอนามัย (ล้างทำความสะอาดไม่มียาฆ่าเชื้ออสุจิ) หรือน้ำอสุจิสามารถเก็บได้โดยการมีเพศสัมพันธ์ จำนวนที่เก็บได้มักจะน้อย 3. หากไม่ได้รับน้ำอสุจิจากวิธีการข้างต้นถุงน้ำเชื้อและปลาย vas deferens สามารถนวดผ่านทางทวารหนักและปัสสาวะสามารถเก็บเพื่อตรวจสอบว่ามีสเปิร์มในตะกอน 4. อย่าให้น้ำอสุจิไปยังสภาพแวดล้อมที่ร้อนจัดและเย็นเกินไป ส่งให้แพทย์เพื่อการอ้างอิงไม่เกิน 30 นาที ให้ความอบอุ่นในสภาพอากาศหนาวเย็นและเก็บไว้ในกระเป๋ากางเกงของคุณเมื่อคุณส่ง 5. หากจะทำการเพาะเชื้อแบคทีเรียควรเปิดท่อปัสสาวะและล้างและฆ่าเชื้อและควรเก็บน้ำอสุจิในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ ประการที่สองก่อนที่ความต้องการในการเก็บรวบรวมเซรั่ม: (1) การควบคุมอาหาร 1. รายการตรวจสอบส่วนใหญ่ต้องการการเก็บตัวอย่างเลือดในขณะท้องว่างในตอนเช้าควรชงกาแฟชาน้ำตาลสูงและเครื่องดื่มโคล่า 2, การทำงานของตับ, ไขมันในเลือด, การแข็งตัวของเลือดและรายการอื่น ๆ ที่ต้องอดอาหารเป็นเวลา 12-16 ชั่วโมงและหนึ่งวันล่วงหน้าก่อนอาหารเย็นควรหลีกเลี่ยงการดื่มห้ามมิให้อาหารไขมันสูงโปรตีนสูง 3 อาหารที่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการทดสอบไขมันในเลือดอย่างน้อยภายใน 3 วันก่อนที่จะดึงเลือดให้ความสนใจในการรักษาอาหารปกติ (B) เพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบของยา ผลกระทบของยาเสพติดในการทดสอบทางชีวเคมีและการเพาะเชื้อแบคทีเรียมีความซับซ้อน ดังนั้นถ้าเป็นไปได้ผู้ทดสอบควรหยุดทานยาทั้งหมด 1-2 วันก่อนการทดสอบ หากจำเป็นต้องใช้ยาในการรักษาผลของยาควรได้รับการพิจารณาเมื่อวิเคราะห์ผลลัพธ์ของการทดสอบ (3) หลีกเลี่ยงผลกระทบของการออกกำลังกาย 1 การออกกำลังกายหนักสามารถเปลี่ยนองค์ประกอบของเลือดจำนวนมากแม้เป็นเวลามากกว่า 24 ชั่วโมงดังนั้นหลังจากการออกกำลังกายแข็งแรงไม่ควรกินเลือดทันทีและเดินได้อย่างรวดเร็วอย่างน้อย 10-15 นาทีหลังจากพักผ่อนแล้วใช้เลือด 2 ควรอยู่ในสถานะสงบเพื่อดึงเลือดเพื่อหลีกเลี่ยงความตื่นเต้นทางอารมณ์ ข้อกำหนดสำหรับการตรวจสอบ: 1. เพื่อให้แน่ใจว่าคุณสามารถเข้าใจผลการตรวจร่างกายของคุณได้อย่างถูกต้องหลังการตรวจสุขภาพกรุณากรอกแบบฟอร์มการตรวจสุขภาพและเอกสารทดสอบแต่ละชุดอย่างรอบคอบก่อนการตรวจร่างกายการเขียนควรมีความชัดเจนโดยเฉพาะชื่อ 2 หลังจากการใช้ซีรั่มคุณควรนั่งนิ่งประมาณ 15-20 นาที กระบวนการตรวจสอบ - การตรวจภาวะมีบุตรยากป้องกันภูมิคุ้มกันสเปิร์ม ภูมิคุ้มกัน Antisperm รวมถึงแอนตี้ - สเปิร์ม humoral ภูมิคุ้มกัน (แอนตี้ - สเปิร์มแอนติบอดี) และแอนตี้ - เซลล์อสุจิภูมิคุ้มกัน (1) การตรวจหาแอนติบอดีต่อต้านสเปิร์ม 1. การทดสอบหลังมีเพศสัมพันธ์: นำมูกปากมดลูกภายใน 6 ~ 24 ชั่วโมงหลังจากมีเพศสัมพันธ์และสังเกตจำนวนอสุจิที่นับภายใต้กล้องจุลทรรศน์กำลังสูง ในแต่ละสนามพลังสูงนั้นมีปัจจัยเฉพาะสเปิร์มที่มีชีวิตชีวามากถึง 21 ≥ หาก titer ในซีรั่มเป็น≥1: 32 ก็ถือว่ามีแอนติบอดีสเปิร์ม คนอื่นมีการเกาะติดกันของเส้นเลือดฝอยและเกาะติดจานซึ่งใช้น้อย 2. การทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ส่วนประกอบที่สมบูรณ์และการทดสอบตัวอสุจิ: สเปิร์มแอนติบอดีจับกับตัวอสุจิแอนติเจนเปิดใช้งานระบบประกอบและทำให้เกิดความเสียหายต่อการซึมผ่านของเซลล์เยื่อหุ้มเซลล์และความสมบูรณ์หากเป็นแอนติบอดีเบรก ค่าของ≥ 2 เป็นค่าบวกหากเป็นแอนติบอดีต่อเซลล์พิษมันจะถูกย้อมด้วยสีที่เป็นบวกซึ่งต้องมีการเคลื่อนไหวของอสุจิ> 70% วิธีไมโครต้องการตัวอย่างเล็ก ๆ เพียงไม่กี่ไมโครลิตรสำหรับตัวอย่างที่มีอัตรากิจกรรมสเปิร์มต่ำสเปิร์มสดสามารถสกัดได้ด้วยวิธีอัปสตรีมและอัตราการรอดชีวิตสามารถเข้าถึงมากกว่า 90% การปฏิบัติสามารถตรวจพบแอนติบอดีที่กระทำกับหางอสุจิ ความจำเพาะที่แข็งแกร่งความไวต่ำและอัตราการลบที่ผิดพลาดสูง 3. วิธีการ hemagglutination แบบพาสซีฟ: เซลล์เม็ดเลือดแดงที่ผ่านการบำบัดจะไวต่อสารสกัดสเปิร์มและน้ำอสุจิและเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไวต่อปฏิกิริยาจะทำปฏิกิริยากับซีรั่มเจือจางเพื่อทดสอบบนแผ่นปฏิกิริยาขนาดเล็กและการเกาะติดกันของเซลล์เม็ดเลือดแดงเป็นบวก วิธีนี้ไม่ได้รับผลกระทบจากความมีชีวิตของสเปิร์มการนับเศษจุลินทรีย์หรือเนื้อเยื่อในตัวอสุจินักวิจัยเชื่อว่าวิธีนี้มีความเฉพาะเจาะจงและละเอียดอ่อน แต่มีรายงานน้อยและความน่าเชื่อถือและการใช้งานจริงยังไม่ได้รับการยืนยัน 4. เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนต์ (ELISA) และไบโอติน - อะวิดินการทดสอบด้วยอิมมูโนซอร์เบนต์ (BA-ELISA): การประยุกต์ใช้ตัวอสุจิเหมือนเดิมหรืออสุจิ จากนั้นสามารถจับกับพื้นผิวของแอนติเจน ต่อจากนั้นแอนติบอดีที่สองของฉลากเอนไซม์สามารถผูกกับพื้นผิวแล้วเพิ่มพื้นผิวของเอนไซม์และผลการตัดสินตามการพัฒนาสีของพื้นผิว สามารถมองเห็นได้ด้วยตาเปล่านอกจากนี้ยังสามารถวัดได้ด้วยเครื่องอ่าน microplate วัตถุประสงค์หลังและถูกต้องโดยทั่วไปมากกว่ากลุ่มของเซรั่มเชิงลบความหนาแน่นของแสงบวก 2 ครั้งส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานเป็นบวก เนื่องจากสเปิร์มที่ไม่บุบสลายนั้นไม่ได้ถูกดูดซับอย่างง่ายถ้ามันถูกเคลือบด้วยแอนติเจนเมมเบรนที่ละลายน้ำได้วิธีนี้จึงมีความไวเฉพาะเจาะจงวัตถุประสงค์และปริมาณและสามารถกำหนดประเภทของแอนติบอดีและใช้งานง่าย BA-ELISA เป็นการทดสอบเชิงปริมาณรุ่นใหม่ที่พัฒนาบนพื้นฐานของ ELISA แบบเดิมซึ่งมีความไวและความจำเพาะมากกว่าวิธีการทั่วไป 5. การทดสอบ Immunobath (1mmunbeadTest, IBT): polyacrylamide microspheres ที่เคลือบด้วยแอนติบอดีอิมมูโนโกลบูลินแอนติบอดีต่อต้านมนุษย์สามารถจับกับพื้นผิวของตัวอสุจิที่จับกับแอนติบอดีสเปิร์ม เรียกใช้หากสัดส่วนของสเปิร์มรวมกับภูมิคุ้มกันหนึ่งหรือมากกว่านั้นจะเป็นบวก วิธีการนี้จะกำหนดตำแหน่งประเภทและสัดส่วนของสเปิร์มที่ถูกผูกไว้และสามารถตรวจจับแอนติบอดีที่จับกับพื้นผิวของสเปิร์มสด ความไวความจำเพาะและความสามารถในการทำซ้ำของมันนั้นดีการใช้งานค่อนข้างยุ่งยากเล็กน้อยและตัวอย่างที่จำเป็นสำหรับการทดสอบมีเพียงไม่กี่ตัวเท่านั้นมันสามารถใช้สำหรับการตรวจจับตัวอย่างร่องรอยเช่นมูกปากมดลูกและของเหลวท่อนำไข่ 6. Radiolabeled อิมมูโนโกลบูลินหรือโปรตีน A: ไอโซโทปที่มีฉลากต่อต้านมนุษย์หรืออิมมูโนโกลบูลินต้นองุ่นโปรตีนถูกผูกไว้กับแอนติบอดีสเปิร์มที่จับกับพื้นผิวของสเปิร์มและกัมมันตภาพรังสีของพื้นผิว หากใช้อสุจิสดเป็นแอนติเจนความจำเพาะและความไวของมันจะสูงและสามารถระบุชนิดของแอนติบอดีได้ อย่างไรก็ตามเนื่องจากแหล่งที่มาของสเปิร์มที่มีชีวิตที่แตกต่างกันในการทดลองแต่ละครั้งผลลัพธ์จะถูกทำซ้ำได้น้อยกว่าและอุปกรณ์มีราคาแพงผู้ประกอบการมีความเสี่ยงต่อความเสียหายจากกัมมันตภาพรังสีดังนั้นวิธีนี้จึงมีรายงานน้อย 7. การทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อม: หลังจากพื้นผิวถูกผูกไว้กับแอนติเจนมันสามารถจับกับแอนติบอดีตัวที่สองที่มีฟลูออไรด์และมีการตรวจพบสัดส่วนของสเปิร์มเชิงบวกที่แสดงเรืองแสงภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เนื่องจากการทดสอบต้องการการตรึงเมทิลแอลกอฮอล์เพื่อทำให้เกิดความเสียหายต่อเยื่อหุ้มเซลล์, แอนติเจนภายในจะถูกเปิดเผยและแอนติบอดีต่อแอนติเจนภายในนั้นแพร่หลายในคนที่ซ้ำซ้อนดังนั้นค่าบวกที่ผิดพลาดจึงสูงเกินไปและไม่มีค่าในทางปฏิบัติทางคลินิก ในปีที่ผ่านมาวัฒนธรรมเฟสของเหลวไม่ได้รับการแก้ไขในระหว่างการทดลองและค่าการใช้งานของวิธีนี้ได้รับการนิยามใหม่ 8. การตรวจสอบโดยตรงจากไข่ที่ละเอียด (1) สเปิร์มรัดรัดหรือทดสอบทะลุ: ไข่มนุษย์ที่ได้จากการส่องกล้องดีกว่าตัวอสุจิหลังจากฟักตัวภายใต้เงื่อนไขบางประการหรือไม่และตัวอสุจิสามารถผ่านตัวอ่อน zona pellucida เข้าไปในช่องว่างรอบเซลล์ไข่ได้หรือไม่ ผ่าน zona pellucida และพิจารณาการมีแอนติบอดีเบรก การทดสอบนี้ถูกแทรกแซงโดยปัจจัยอื่น ๆ (2) การทดสอบการเจาะไข่ของหนูแฮมสเตอร์อสุจิเดอโปร่งใส (SPA): สเปิร์มสดที่สกัดแล้วผสมกับไข่ที่ปลอดแฮมสเตอร์และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์ระยะถ้าไข่มีหัวอสุจิบวม (มีหาง) เจาะ สปาสามารถใช้ในการพิจารณา: 1 ความสามารถในการปฏิสนธิของสเปิร์มกับแอนติบอดีในน้ำอสุจิ, 2 ความสำคัญของแอนติบอดีต่างๆในการป้องกันการตั้งครรภ์ การทดสอบนี้อาจได้รับผลกระทบจากปัจจัยหลายประการ (สอง) การตรวจสอบเซลล์ภูมิคุ้มกันต่อต้านสเปิร์ม มีการศึกษาน้อยเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันต่อต้านสเปิร์มที่เซลล์เป็นสื่อกลางและแต่ละข้อสรุปแตกต่างกัน การทดลองในสัตว์และการทดสอบในมนุษย์แสดงให้เห็นว่าการต่อต้านเซลลูลาร์นั้นอาจเป็นสาเหตุหนึ่งของการมีบุตรยาก ชุดตรวจสำหรับการตรวจจับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อต้านเซลล์ประกอบด้วยการเปลี่ยนแปลงของเม็ดเลือดขาวการทดสอบการยับยั้งการยับยั้งการยึดเกาะของเม็ดเลือดขาวเม็ดเลือดขาวหรือการทดสอบการยับยั้งการย้ายถิ่นของแมคโครฟาจการทดสอบทางผิวหนัง แอนติเจนที่ใช้นั้นแตกต่างกันเช่นสเปิร์มที่ถูกล้างใหม่, สเปิร์มที่ถูกแช่แข็งละลาย, สเปิร์มกึ่งบริสุทธิ์และไม่ชอบ ในปัจจุบันเนื่องจากแอนติเจนที่ใช้นั้นไม่เหมือนกันวิธีการตรวจจับมีความแตกต่างกันจำนวนของงานวิจัยมีขนาดเล็กความจำเพาะของแต่ละวิธีนั้นยากที่จะประเมินและผลลัพธ์ที่ยากต่อการเปรียบเทียบ ประการที่สองการตรวจสอบของภาวะมีบุตรยากภูมิคุ้มกันต่อต้านโปร่งใส แหล่งที่มาของมนุษย์ zona pellucida ถูก จำกัด และยากที่จะได้รับ แต่มนุษย์ zona pellucida และ porcine zona pellucida มีเซรุ่มข้ามแอนติบอดีดังนั้นในทางปฏิบัติจริงแล้ว porzine zona pellucida จะถูกใช้แทนมนุษย์ zona pellucida ในการตรวจจับ zona pellucida ในมนุษย์ เนื่องจากการมีอยู่ของเลคติน heterologous lectin (ส่วนใหญ่ IgM) ในซีรั่มมนุษย์ปกติบางอย่างขัดขวางผลการทดลองเซลล์เม็ดเลือดแดงเม่นสดจะต้องดูดซึมซีรั่มทดสอบก่อนการทดสอบ 1. ปฏิกิริยาการตกตะกอนแถบสก๊อตช์: หลังจากพื้นผิวของ zona pellucida จับกับแอนติบอดีดัชนีการหักเหของแสงจะเปลี่ยนไปภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงหรือกล้องจุลทรรศน์สนามมืด วิธีนี้ส่วนใหญ่จะใช้เพื่อระบุเซรั่มมีความไวต่ำและยากที่จะใช้ในการปฏิบัติทางคลินิก 2. Radioimmunoassay: หลังจากทำการทดสอบ radiolabeled porcine zona pellucida antigen และซีรัมแอนติเจนและแอนติบอดีจะถูกแยกออกและทำการวัดกัมมันตภาพรังสี วิธีนี้สามารถเชิงปริมาณเฉพาะและละเอียดอ่อน แต่เนื่องจากความเสียหายของกัมมันตภาพรังสีและรายงานไม่มากวิธีนี้ยังคงยากที่จะยืนยัน 3. การทดสอบทางอิมมูโนอิฟลูอิเรสเซนซ์ทางอ้อม: หลังจากแอนติบอดีต่อต้าน Zona pellucida ของมนุษย์จับกับพื้นผิวของไข่เม่นสุกรแอนติบอดีอิมมูโนโกลบูลินต่อต้านมนุษย์ที่ติดป้ายฟลูออไรซินจับกับพื้นผิวของ zona pellucida ความน่าเชื่อถือของกฎหมายนี้ขึ้นอยู่กับวิธีการอื่น ๆ 4. วิธี ELISA และ BALISA: ตัวพาโซลิดเฟสเคลือบด้วย porcine zona pellucida antigen และซีรั่มแอนติบอดีตัวที่สองและสารตั้งต้นที่จะทำการทดสอบและการซักจะถูกดำเนินการทีละขั้นตอนและในที่สุดก็ตัดสินผลตามการเปลี่ยนสีของพื้นผิว วิธีนี้ต้องใช้ขนาดตัวอย่างน้อยลงไม่ต้องใช้อุปกรณ์พิเศษใช้งานง่ายสามารถกำหนดปริมาณแอนติบอดีและกำหนดชนิดของแอนติบอดีและมีความจำเพาะและความไวที่ดี BA-ELISA มีข้อดีของ ELISA แบบเดิมและความไวของมันก็ดีขึ้นอย่างมาก 5. วิธีการ hemagglutination แบบพาสซีฟแอนติเจนของเมือกบริสุทธิ์เซนา pellucida ถูกนำมาใช้เพื่อเคลือบเซลล์เม็ดเลือดแดงของสายพันธุ์อื่น ๆ เป็นเป้าหมายของแอนติเจนและในการปรากฏตัวของแอนติบอดี zona pellucida เซลล์เม็ดเลือดแดงที่ไวต่อการเกาะติดกัน มีรายงานน้อยมากเกี่ยวกับวิธีนี้และเป็นการยากที่จะประเมินความไวและความเฉพาะเจาะจง 6. การทดสอบการเจาะหรือการเจาะรัดตัวของอสุจิ: วิธีนี้อาจเป็นไปในทางบวกหากมี zona pellucida antibody หรือแอนติบอดีต่อต้านสเปิร์ม เนื่องจากการทดสอบได้รับอิทธิพลอย่างมากจากปัจจัยสภาพแวดล้อมทางวัฒนธรรมผลการวิจัยของห้องปฏิบัติการที่แตกต่างกันจึงยากที่จะเปรียบเทียบ วิธีนี้สามารถนำมาใช้ร่วมกับวิธีอื่น ๆ เพื่อเสริมซึ่งกันและกันเพื่อให้มั่นใจในความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ ไม่เหมาะกับฝูงชน การตรวจไม่รุกรานและโดยทั่วไปแล้วไม่มีข้อห้าม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ การทดสอบนี้มีการบุกรุกน้อยกว่าและโดยทั่วไปจะไม่ก่อให้เกิดโรคแทรกซ้อนร้ายแรงหรืออันตรายอื่น ๆ