การทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนทางอ้อม

การตรวจทางอิมมูโนอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์เป็นแอนติบอดีที่จับกับแอนติบอดี (ในที่นี้เรียกว่าแอนติบอดีปฐมภูมิ) ที่จับกับแอนติเจนและใช้แอนติบอดีที่สอดคล้องกับแอนติบอดีปฐมภูมิ (เช่นแอนติบอดีรอง) โมเลกุลของฟลูออไรเซียนจะถูกจับคู่กับเซลล์และทำการสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การตรวจโรคติดเชื้อและการจำแนกประเภท: การตรวจภูมิคุ้มกัน เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร เคล็ดลับ: อย่ากินอาหารที่มันโปรตีนสูงเกินไปวันก่อนที่จะเจาะเลือดหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ค่าปกติ <1:64 ความสำคัญทางคลินิก ผลลัพธ์ที่ผิดปกติ: ซีรั่ม titer เดียวที่≥1: 64 หรือเพิ่มขึ้นสองเท่าในซีรัม titer หรือการปรากฏตัวของแอนติบอดี IgM สามารถวินิจฉัยได้ว่าเป็นการติดเชื้อ rickettsial วิธีนี้ไม่แยกความแตกต่างระหว่างชนิดของ rickettsia ที่ติดเชื้อโดยผู้ป่วย การปรากฏตัวของแอนติบอดี IgM ที่เฉพาะเจาะจงต่อ rickettsia แสดงให้เห็นการติดเชื้อเมื่อเร็ว ๆ นี้ ผู้ที่ต้องทำการทดสอบ: การติดเชื้อ แต่กำเนิด toxoplasma, ไข้รากสาดใหญ่เฉพาะถิ่น, ไข้, โรคปอดบวมจากเด็ก, โรคแท้งติดต่อ, โรคแท้งติดต่อเป็นต้น ข้อควรระวัง ก่อนการตรวจสอบ: อย่ากินอาหารที่มันโปรตีนสูงเกินไปวันก่อนที่จะเจาะเลือดหลีกเลี่ยงการดื่มหนัก ปริมาณแอลกอฮอล์ในเลือดมีผลโดยตรงต่อผลการทดสอบ หลัง 20.00 น. ในวันก่อนการตรวจร่างกายควรทำการอดอาหารเพื่อหลีกเลี่ยงการตรวจพบตัวชี้วัดเช่นระดับน้ำตาลในเลือดในท้องฟ้าที่สอง เมื่อตรวจสอบ: ควรพักผ่อนหลีกเลี่ยงการหดตัวของหลอดเลือดที่เกิดจากความกลัวเพิ่มความยากลำบากในการเก็บเลือด กระบวนการตรวจสอบ 1. เพิ่ม 0.01 mol / L, pH 7.4 PBS ไปยังชิ้นงานที่จะทดสอบและทิ้งหลังจาก 10 นาทีเพื่อให้ชิ้นงานอยู่ในระดับความชื้น 2. เพิ่มสารละลายแอนติบอดีที่มีการติดฉลากฟลูออเรสเซ็นซ์ที่เจือจางอย่างเหมาะสมเพื่อให้ครอบคลุมชิ้นงานอย่างสมบูรณ์และวางไว้ในกล่องเคลือบที่เคลือบไว้ในช่วงระยะเวลาหนึ่ง (อ้างอิง: 30 นาที) 3. นำสไลด์ออกแล้ววางบนที่ยึดสไลด์ล้างด้วย 0.01 mol / L, pH 7.4 PBS จากนั้นแช่ใน PBS สามกระบอกด้วย 0.01 mol / L, pH 7.4, 3-5 นาทีต่อสูบ เป็นครั้งคราวสั่น 4. นำสไลด์ออกและใช้กระดาษกรองเพื่อกำจัดน้ำส่วนเกิน แต่อย่าทำให้ชิ้นงานแห้งเพิ่มกลีเซอรีนที่บัฟเฟอร์แล้วหยดหนึ่งและคลุมด้วยผ้าคลุม 5. สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ทันที สังเกตความเข้มของฟลูออเรสเซนต์เฉพาะของชิ้นงานทดสอบซึ่งโดยทั่วไปสามารถแสดงด้วย "+": (-) ไม่มีฟลูออเรสเซนต์ (±) ฟลูออเรสเซนต์ที่น่าสงสัยมาก ๆ (+) ฟลูออเรสเซนต์นั้นอ่อนแอ แต่มองเห็นได้ชัดเจน (++) ฟลูออเรสเซนต์สว่าง; (+++ - ++++) ความเข้มของฟลูออเรสเซนต์เฉพาะของชิ้นงานทดสอบคือ "++" หรือมากกว่าและการควบคุมต่าง ๆ คือ (±) หรือ (-) ซึ่งสามารถตัดสินได้ว่าเป็นค่าบวก ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่มีข้อห้าม ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อนและอันตรายที่เกี่ยวข้อง