Immunologische Tests auf Unfruchtbarkeit

Immunologische Untersuchungen der Unfruchtbarkeit schließen männliche Anti-Spermien-Autoimmun-Unfruchtbarkeit, weibliche allogene Anti-Spermien-Unfruchtbarkeit und weibliche Anti-Zona-Pellucida-Unfruchtbarkeit ein. Kontrolldiät: 1, die meisten Testgegenstände erfordern morgens eine Blutentnahme auf nüchternen Magen, sollten mit Kaffee, starkem Tee, viel Zucker und Cola gefastet werden, 2, Leberfunktion, Blutfette, Blutgerinnung und andere Gegenstände erfordern 12-16 Stunden Fasten Abendessen einen Tag im Voraus sollte vermeiden, Alkohol zu trinken, fettreiche, proteinreiche Ernährung zu verbieten; 3, Diät hat einen erheblichen Einfluss auf die Blutfettwerte, mindestens innerhalb von 3 Tagen vor der Blutabnahme, um darauf zu achten, eine normale Ernährung aufrechtzuerhalten. Grundlegende Informationen Fachklassifikation: Eugenik- und Überlegenheitsuntersuchung Klassifikation: Körperflüssigkeitsuntersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Normalwert: Nein Überdurchschnittlich: Negativ: Das Ergebnis des negativen Tests sollte normal sein. Positiv: Ein positiver Test zeigt eine Krankheit an, die unfruchtbar sein kann. Tipps: Unterbrechen Sie den Geschlechtsverkehr für 4 bis 7 Tage. Testosteronpropionat, Testosteronphenylacetat und Nantrolonphenylpropionat konnten 1 Woche vor dem Test nicht verwendet werden. Normalwert Die Ergebnisse verschiedener immunologischer Tests waren normal und negativ. Klinische Bedeutung Abnormale Ergebnisse Mehrere immunologische Tests weisen auf Unfruchtbarkeit hin. Die Patienten mit männlicher Unfruchtbarkeit und weiblicher Unfruchtbarkeit müssen untersucht werden. Positive Ergebnisse können Krankheiten sein: Unfruchtbarkeit, männliche Unfruchtbarkeit, weiblicher Pseudohermaphroditismus, Vorsichtsmaßnahmen gegen Genitalfehlbildungen bei Männern Unangemessene Personen: noch nicht bekannt. Tabu vor der Inspektion: Erstens beim Sammeln von Sperma: 1. Vor dem Verlassen des Samens sollte der Patient den Geschlechtsverkehr für 4 bis 7 Tage unterbrechen. Testosteronpropionat, Testosteronphenylacetat und Nantrolonphenylpropionat konnten 1 Woche vor dem Test nicht verwendet werden. Das Trinken sollte innerhalb eines Monats vor dem Test eingestellt werden. 2, wenn Sperma, weiche Seife oder Paraffinöl für die Penismassage verwendet werden können, werden die Proben in sterilen Reagenzgläsern gesammelt, Kondome können verwendet werden (sauber gewaschen, keine Spermizide) oder Sperma kann durch Geschlechtsverkehr gesammelt werden, aber auf diese Weise Die gesammelte Menge ist oft klein. 3. Wenn das Sperma nicht mit der obigen Methode gewonnen wird, können das Samenbläschen und das Ende der Samenleiter durch das Rektum massiert werden, und der Urin kann gesammelt werden, um zu überprüfen, ob sich Sperma im Sediment befindet. 4. Setzen Sie das Sperma keinen überhitzten und kalten Umgebungen aus. Geben Sie es nicht länger als 30 Minuten dem Arzt. Halten Sie es bei kaltem Wetter warm und stecken Sie es beim Senden in die Unterwäschetasche. 5. Wenn eine Bakterienkultur durchgeführt werden soll, sollte die Harnröhrenöffnung gespült und desinfiziert werden, und der Samen sollte in einem sterilen Reagenzglas gesammelt werden. Zweitens vor den Anforderungen an die Serumsammlung: (1) Kontrolle der Ernährung 1. Die meisten Inspektionsgegenstände erfordern morgens eine Blutentnahme auf leeren Magen. Kaffee, Tee, zuckerhaltige Getränke und Cola sollten gefastet werden. 2, Leberfunktion, Blutfette, Blutgerinnung und andere Elemente erfordern 12-16 Stunden Fasten, und einen Tag vor dem Abendessen sollte das Trinken vermeiden, fettreiche, proteinreiche Ernährung zu verbieten. 3, Diät hat einen signifikanten Einfluss auf die Blutfettwerte, mindestens innerhalb von 3 Tagen vor der Blutentnahme, um darauf zu achten, eine normale Ernährung aufrechtzuerhalten. (B) Arzneimittelwirkungen zu vermeiden Die Wirkungen von Arzneimitteln auf biochemische Tests und Bakterienkulturen sind komplex. Aus diesem Grund sollte die Testperson nach Möglichkeit 1-2 Tage vor dem Test die Einnahme aller Medikamente einstellen. Wenn zur Behandlung Medikamente erforderlich sind, sollten die Auswirkungen des Arzneimittels bei der Analyse der Testergebnisse berücksichtigt werden. (3) Vermeiden Sie die Auswirkungen von Sport 1, anstrengende Übung kann viele Blutbestandteile ändern, auch für mehr als 24 Stunden, so sollte nach intensiver Übung nicht sofort Blut abnehmen und schnell gehen, mindestens 10-15 Minuten nach dem Ausruhen, dann Blut abnehmen. 2, sollte in einem ruhigen Zustand sein, um Blut zu ziehen, um emotionale Aufregung zu vermeiden. Anforderungen an die Inspektion: 1. Um zu gewährleisten, dass Sie Ihre körperlichen Untersuchungsergebnisse nach der ärztlichen Untersuchung genau nachvollziehen können, füllen Sie bitte vor der ärztlichen Untersuchung das ärztliche Untersuchungsformular und jedes Prüfblatt sorgfältig aus. 2, nachdem Sie Serum genommen haben, sollten Sie noch für 15-20 Minuten sitzen. Inspektionsprozess -, Anti-Spermien-Unfruchtbarkeits-Check Die Antispermienimmunität umfasst die humorale Antispermienimmunität (Antispermienantikörper) und die Antispermienzellimmunität. (1) Nachweis von Anti-Spermien-Antikörpern 1. Test nach dem Geschlechtsverkehr: Nehmen Sie den Zervixschleim innerhalb von 6 bis 24 Stunden nach dem Geschlechtsverkehr und beobachten Sie die Anzahl der Spermien, die unter einem Hochleistungsmikroskop gezählt wurden. In jedem Hochleistungsfeld gibt es ≥ 21 extrem lebhafte spermaspezifische Faktoren. Wenn der Serumtiter ≥ 1: 32 ist, kann davon ausgegangen werden, dass er Spermienantikörper enthält. Andere haben Kapillaragglutination und Plattenagglutination, die weniger verwendet werden. 2. Komplementabhängiger Zytotoxizitätstest und Spermienbremsungstest: Der Spermienantikörper bindet an das Spermienantigen, aktiviert das Komplementsystem und schädigt die Zellmembrandurchlässigkeit und -integrität. Wenn es sich um einen Bremsantikörper handelt, verliert er seine Aktivität und bremst. Ein Wert von ≥ 2 ist positiv, wenn es sich um einen cytotoxischen Antikörper handelt, wird er mit bestimmten Farbstoffen positiv gefärbt, was eine Spermienmotilität von> 70% erfordert. Die Mikromethode benötigt nur wenige Mikroliter der Probe. Bei Proben mit niedriger Spermienaktivitätsrate kann das lebende Sperma durch die Upstream-Methode extrahiert werden und die Überlebensrate kann über 90% erreichen. Die Praxis kann nur Antikörper nachweisen, die auf den Spermaschwanz einwirken. Starke Spezifität, schlechte Empfindlichkeit und hohe Rate falsch negativer Ergebnisse. 3. Passive Hämagglutinationsmethode: Die behandelten roten Blutkörperchen werden mit dem Spermienextrakt und dem Samenplasma sensibilisiert, und die sensibilisierten roten Blutkörperchen werden mit dem verdünnten Serum, das auf der Mikroreaktionsplatte getestet werden soll, umgesetzt, und die Agglutination der roten Blutkörperchen ist positiv. Diese Methode wird durch die Lebensfähigkeit der Spermien, die Zählung, mikrobielle oder Gewebefragmente in Spermien nicht beeinträchtigt.Die Forscher sind der Ansicht, dass diese Methode spezifisch und sensitiv ist, es gibt jedoch nur wenige Berichte, und ihre Zuverlässigkeit und Praktikabilität muss noch bestätigt werden. 4. Enzymgebundener Immunosorbens-Assay (ELISA) und Biotin-Avidin-Enzymgebundener Immunosorbens-Assay (BA-ELISA): Aufbringen eines intakten Spermien- oder Spermienmembran-Antigen-beschichteten Festphasenträgers, Spermien-Antikörper in der zu testenden und zu kultivierenden Probe Es kann sich dann an die Oberfläche des Antigens binden. Anschließend kann der zweite Antikörper der Enzymmarkierung auch an die Oberfläche binden, und dann wird das Enzymsubstrat zugegeben, und das Ergebnis wird gemäß der Farbentwicklung des Substrats beurteilt. Kann mit dem bloßen Auge beobachtet werden, kann auch mit einem Mikrotiterplatten-Lesegerät gemessen werden, das letztere objektiv und genau ist, im Allgemeinen mehr als eine Gruppe von negativen optischen Serumdichte plus 2 mal die Standardabweichung ist positiv. Da das intakte Sperma leicht unspezifisch adsorbiert wird, wenn es mit löslichem Spermamembranantigen beschichtet ist, ist das Verfahren empfindlich, spezifisch, objektiv und quantitativ und kann die Art des Antikörpers bestimmen und ist leicht zu handhaben. Der BA-ELISA ist eine neue Generation quantitativer Assays, die auf der Grundlage eines herkömmlichen ELISA entwickelt wurden und eine höhere Empfindlichkeit und Spezifität aufweisen als herkömmliche Methoden. 5. Immunbad-Test (1mmunbeadTest, IBT): Mit Anti-Human-Immunglobulin-Antikörper beschichtete Polyacrylamid-Mikrosphären können an die mit Spermienantikörper gebundene Spermienoberfläche binden, und Immunbeads können mit Spermien unter einem Phasenkontrastmikroskop oder einem Elektronenmikroskop gesehen werden. Laufen Sie, wenn der Anteil der Spermien, die mit einem oder mehreren Immunobeads kombiniert sind, ≥lo% positiv ist. Diese Methode bestimmt die Stelle, den Typ und den Anteil der gebundenen Spermien und kann Antikörper nachweisen, die an die Oberfläche lebender Spermien gebunden sind. Die Empfindlichkeit, Spezifität und Reproduzierbarkeit sind gut, die Operation ist etwas umständlich und es sind nur wenige Proben zum Testen erforderlich. Es kann zum Nachweis von Spurenproben wie Zervixschleim und Eileiterflüssigkeit verwendet werden. 6. Radioaktiv markiertes Immunglobulin oder Protein A-Verfahren: Isotopenmarkiertes Anti-Human-Immunglobulin oder Traubenkernprotein Ein Protein wird an Spermienantikörper gebunden, die an die Oberfläche der Spermien gebunden sind, und die Radioaktivität der Oberfläche wird mit einem x-Zähler gemessen. Wenn lebendes Sperma als Antigen verwendet wird, sind seine Spezifität und Empfindlichkeit hoch und der Antikörpertyp kann bestimmt werden. Aufgrund der unterschiedlichen Quellen für lebende Spermien in jedem Experiment sind die Ergebnisse jedoch weniger reproduzierbar und die Ausrüstung ist teuer. Der Bediener ist anfällig für radioaktive Schäden, so dass diese Methode weniger berichtet wird. 7. Indirekter Immunfluoreszenztest: Nachdem die Oberfläche an das Antigen gebunden ist, kann sie an den zweiten mit Fluorescein markierten Antikörper binden, und der Anteil an positivem Sperma, der Fluoreszenz zeigt, wird unter einem Fluoreszenzmikroskop beobachtet. Da der Test eine Methanolfixierung erfordert, um die Membran zu beschädigen, wird das interne Antigen freigelegt, und der Antikörper gegen das interne Antigen ist bei den überflüssigen Personen allgegenwärtig, so dass das falsche Positiv zu hoch ist und keinen klinischen praktischen Wert hat. In den letzten Jahren wurde die Flüssigphasenkultur während des Experiments nicht fixiert und der Gebrauchswert dieser Methode wurde neu definiert. 8. Direkte Kontrolle der Interaktion zwischen Eiern (1) Spermatransparenter Bandbindungs- oder Penetrationstest: Die durch Laparoskopie gewonnene menschliche Eizelle ist nach Inkubation unter bestimmten Bedingungen besser als die Spermien, und ob die Spermien durch die Zona pellucida in den Raum um die Eizelle gelangen können, wenn die Spermien nicht getragen werden können Bestehen Sie die Zona Pellucida und prüfen Sie, ob ein Bremsantikörper vorhanden ist. Dieser Test wird auch durch andere Faktoren gestört. (2) Sperma-de-transparenter Hamstereipenetrationstest (SPA): Das optimierte extrahierte lebende Sperma wird mit den hamsterfreien Eiern gemischt und unter einem Phasenkontrastmikroskop beobachtet. Wenn das Ei einen geschwollenen Spermakopf (mit Schwanz) enthält Penetration. Das SPA kann verwendet werden, um Folgendes zu bestimmen: 1 die Befruchtungsfähigkeit von Spermien mit Samenplasma-Antikörpern, 2 die Bedeutung verschiedener Antikörper für die Verhinderung einer Schwangerschaft. Dieser Test kann auch durch eine Vielzahl von Faktoren beeinflusst werden. (zwei) Nachweis der Immunität gegen Spermien Es gibt nur wenige Studien zur zellvermittelten Anti-Spermien-Immunität, und jede Schlussfolgerung ist anders. Tierversuche und Tests am Menschen haben gezeigt, dass die zelluläre Antisense-Immunität eine der Ursachen für Unfruchtbarkeit sein kann. Die Assays zum Nachweis von zellvermittelten Antisense-Immunantworten umfassen einen Lymphozytentransformationstest, einen Leukozytenadhäsionsinhibitionstest, einen Leukozyten- oder Makrophagenmigrationsinhibitionstest, einen Hauttest und einen Aktivitätsassay für das Prokoagulans peripherer Blutleukozyten. Die verwendeten Antigene sind unterschiedlich, wie frisch gewaschenes Sperma, gefrorenes aufgetautes Sperma, halbgereinigtes Sperma und dergleichen. Da die verwendeten Antigene nicht einheitlich sind, unterscheiden sich die Nachweismethoden, die Anzahl der Forschungsfälle ist gering, die Spezifität jeder Methode ist schwer zu bewerten und die Ergebnisse sind schwer zu vergleichen. Zweitens, der Nachweis einer nicht transparenten Unfruchtbarkeit des Immunsystems Die Quelle für Zona pellucida beim Menschen ist begrenzt und schwer zu beschaffen, aber die Zona pellucida beim Menschen und die Zona pellucida beim Schwein weisen eine Kreuzantigenität auf. Daher wird in der Praxis die Zona pellucida beim Schwein anstelle der Zona pellucida beim Menschen zum Nachweis des Zona pellucida-Antikörpers im menschlichen Serum verwendet. Da das Vorhandensein von heterologem Lectin (hauptsächlich IgM) in einigen normalen Humanserum die experimentellen Ergebnisse beeinträchtigt, müssen frische rote Schweineblutkörperchen das Testserum vor dem Test absorbieren. 1. Scotch-Band-Präzipitationsreaktion: Nachdem die Oberfläche der Zona pellucida an den Antikörper gebunden hat, ändert sich der Brechungsindex unter einem Lichtmikroskop oder einem Dunkelfeldmikroskop. Diese Methode wird hauptsächlich zur Identifizierung von Serum verwendet, ist wenig sensitiv und in der klinischen Praxis schwierig anzuwenden. 2. Radioimmunoassay: Nach dem radioaktiv markierten Schweine-Zona-Pellucida-Antigen und dem zu testenden Serum wird der Antigen-Antikörper-Komplex isoliert und seine Radioaktivität gemessen. Diese Methode kann quantitativ, spezifisch und empfindlich sein. Aufgrund radioaktiver Schäden und der geringen Anzahl von Berichten ist es jedoch immer noch schwierig, diese Methode zu bestätigen. 3. Indirekter Immunfluoreszenztest: Nachdem sich der humane Anti-Zona-Pellucida-Antikörper an die Oberfläche des Schweineeis gebunden hat, bindet sich der mit Fluorescein markierte Anti-Human-Immunglobulin-Antikörper an die Oberfläche der Zona-Pellucida und zeigt unter einem Fluoreszenzmikroskop eine offensichtliche Peri-Fluoreszenz. Die Zuverlässigkeit dieses Gesetzes hängt von anderen objektiven Methoden ab. 4. ELISA- und BALISA-Methode: Der Festphasenträger wird mit dem Schweine-Zona-Pellucida-Antigen beschichtet, und das Serum, der zweite Antikörper und das zu testende Substrat werden zugegeben, und das Waschen wird schrittweise durchgeführt, und schließlich wird das Ergebnis anhand der Farbänderung des Substrats beurteilt. Diese Methode erfordert weniger Probengröße, erfordert keine spezielle Ausrüstung, ist einfach zu handhaben, kann Antikörper quantitativ bestimmen und den Antikörpertyp bestimmen und weist eine gute Spezifität und Empfindlichkeit auf. Der BA-ELISA hat die Vorteile eines herkömmlichen ELISA und seine Empfindlichkeit ist stark verbessert. 5. Passives Hämagglutinationsverfahren Das gereinigte Schweine-Zona-Pellucida-Antigen wird verwendet, um die roten Blutkörperchen anderer Spezies als Antigenziel zu beschichten, und in Gegenwart des Zona-Pellucida-Antikörpers agglutinieren die sensibilisierten roten Blutkörperchen. Es gibt nur wenige Berichte über diese Methode, und es ist schwierig, ihre Sensitivität und Spezifität zu bewerten. 6. Bandenbindungstest oder Penetrationstest für durchsichtige Spermien: Diese Methode kann positiv sein, wenn ein Zona Pellucida-Antikörper oder ein Anti-Spermien-Antikörper vorhanden ist. Da der Test stark von den Faktoren der Kulturumgebung beeinflusst wird, sind die Forschungsergebnisse verschiedener Laboratorien schwer zu vergleichen. Diese Methode kann in Verbindung mit anderen Methoden angewendet werden, um die Zuverlässigkeit der Ergebnisse zu gewährleisten. Nicht für die Menge geeignet Die Untersuchung ist weniger invasiv und weist im Allgemeinen keine Kontraindikationen auf. Nebenwirkungen und Risiken Dieser Test ist weniger invasiv und verursacht im Allgemeinen keine schwerwiegenden Komplikationen oder sonstigen Gefahren.