Test neutralizacji

Test neutralizacji opiera się na określeniu zakaźności wirusa i zdolności surowicy odpornościowej do neutralizacji wirusa na podstawie porównania resztkowej zakaźności wirusa po neutralizacji przez surowicę odpornościową. Gdy zwierzę jest zakażone wirusem, w ciele wytwarzane jest specyficzne przeciwciało neutralizujące, które specyficznie wiąże się z odpowiednim wirionem, zapobiegając w ten sposób adsorpcji wirusa na wrażliwej komórce lub hamując jego inwazję, tak że wirus traci zdolność do infekowania. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: Badanie chorób zakaźnych i klasyfikacja: badanie immunologiczne Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: nie na czczo Wyniki analizy: Poniżej normy: Wartość normalna: Nie Powyżej normalnego: Negatywne: Mniej niż 10 jest ujemne i nie ma wirusa. 10 do 49 jest podejrzanych. Pozytywne: Zasadniczo wskaźnik neutralizacji większy niż 50 jest uważany za dodatni i obecny jest wirus. Wskazówki: Zwróć uwagę na normalne nawyki żywieniowe i higienę osobistą. Wartość normalna Naprawiono metodę wirusów rozcieńczania surowicy: w przypadku wirusów zwykle wskaźnik neutralizacji jest większy niż 50, a od 10 do 49 jest podejrzanych, a mniej niż 10 jest ujemny. Wartość neutralna testu neutralizacji: ciało ludzkie jest w dynamicznej równowadze i jest zdrowe. Znaczenie kliniczne Ten test służy głównie do wykrywania przeciwciał z badanej surowicy lub do wykrywania wirusów z materiału chorobowego, tym samym diagnozując infekcje wirusowe; 2 w celu sprawdzenia toksyn w materiałach z surowicą antytoksynową lub do identyfikacji rodzaju toksyn w bakteriach; Wirusowe miano surowicy lub antytoksyn; 4 Identyfikacja i typowanie nowo izolowanych wirusów, test neutralizacji można przeprowadzić nie tylko na wrażliwych zwierzętach doświadczalnych, ale także na hodowlach komórkowych lub zarodkach kurzych. Metody testowe obejmują głównie prosty test jakościowy, metodę ustalonego rozcieńczenia wirusa w surowicy, metodę ustalonego rozcieńczenia wirusa w surowicy i metodę zmniejszania płytki nazębnej. Pozytywnymi wynikami mogą być choroby: świnka, AIDS, gorączka denga, japońskie zapalenie mózgu, wysypka wirusowa Coxsackie, pryszczyca, środki ostrożności wścieklizny Zabronione przed badaniem: Zwróć uwagę na normalne nawyki żywieniowe i zwróć uwagę na higienę osobistą. Wymagania dotyczące kontroli: Aktywnie współpracować z lekarzem. Proces kontroli (1) Prosty jakościowy test neutralizacji Ta metoda jest stosowana głównie do wykrywania wirusa w materiale chorobowym i może być również początkowo zidentyfikowana lub sfinalizowana. Zwierzęta testowe (lub zarodki kurze, hodowla komórkowa) i drogi szczepienia są najpierw wybierane na podstawie podatności na wirusy. Materiał miele się i rozcieńcza do określonego stężenia (około 100 LD50 ~ 1000 LD50 lub TCID50). Zanieczyszczone materiały należy dodać antybiotyki (200 do 1000 jednostek penicyliny i streptomycyny) lub przefiltrować przez filtr bakteryjny, zmieszać ze znaną surowicą odpornościową (odpowiednio rozcieńczoną lub nierozcieńczoną) i rozcieńczyć normalną surowicą Dla porównania Po zmieszaniu komórki zaszczepiono w 37 ° C przez 1 godzinę i co najmniej 3 zwierzęta w każdej grupie. Żywienie izolacyjne, obserwacja zachorowalności i śmiertelności. Zwierzęta kontrolne padły, podczas gdy zwierzęta w grupie neutralizacyjnej nie padły, co potwierdziło, że choroba zawierała wirusa odpowiadającego surowicy odpornościowej. Metodę tę można również zastosować do identyfikacji i typowania toksyn (takich jak toksyny). (2) Naprawiono metodę wirusa rozcieńczania surowicy W tej metodzie wirus rozcieńczano 10-krotnie w przyrostach i umieszczano dwie probówki, do pierwszej kolumny dodano normalną surowicę (grupa kontrolna), a do drugiej kolumny dodano surowicę do przetestowania (grupa testowa). Po zmieszaniu komórki zaszczepiono w 37 ° C przez 1 godzinę i każdą mieszaninę probówek zaszczepiono osobno wybranym zwierzętom testowym i do każdego rozcieńczenia użyto 3 do 5 zwierząt. Po zaszczepieniu obserwuj codziennie i rejestruj liczbę zgonów, a po obserwacji oblicz LD50 i wskaźnik neutralizacji (Tabela 7-1, Tabela 7-2). Metoda ta ma zastosowanie do wykrywania dużej liczby próbek. Ta metoda jest najczęściej stosowana do wykrywania neutralizujących przeciwciał w badanej surowicy. W przypadku wirusów wskaźnik neutralizacji jest zwykle większy niż 50 i jest dodatni, 10 do 49 jest podejrzany, a mniej niż 10 jest ujemny. (3) Naprawiono metodę surowicy rozcieńczania wirusa Metodę tę stosuje się do ustalenia ceny neutralizacji surowicy przeciwwirusowej. Badaną surowicę rozcieńcza się 2 razy i dodaje się roztwór wirusa o tej samej wartości toksycznej (miesza się z surowicą, każda dawka zawiera wirusa 100LD50), dobrze wstrząsa. Badane zwierzęta zaszczepiono w 37 ° C przez 1 godzinę. Uwaga: [1] Dawka inokulacyjna 0,1 ml, zawierająca wirusa 100LD50. [2] odnosi się do rozcieńczenia po zmieszaniu z wirusem. [3] Mianownik to liczba inokulacji, a licznik to liczba zabezpieczeń. [4] PD50 stanowi połowę ochrony, a jego metoda obliczania jest taka sama, jak obliczanie LD50. (4) metoda redukcji płytki nazębnej Test neutralizacji wirusa przeprowadzono na hodowli komórkowej, aw ostatnich latach często stosowano metodę redukcji łysinek. Najpierw wirus rozcieńcza się do odpowiedniego stężenia, dzięki czemu od 80 do 100 PFU (jednostka tworząca łysinki) na 0,2 ml miesza się z różnymi rozcieńczeniami badanej surowicy i umieszcza w temperaturze 37 ° C odpowiednio na 1–2 godziny, aby zmierzyć PFU. 50% rozcieńczenie płytki nazębnej to cena neutralizacji surowicy. Tabela 7–4. Tabela 7-4 Przykład testu neutralizacji dla metody redukcji płytki nazębnej Uwaga: [1] Surowicę rozcieńczono w 4-krotnych przyrostach. [2] Płytka zmniejsza się o 50% rozcieńczenia surowicy, a metoda obliczania jest taka sama jak obliczanie LD50. Nie nadaje się dla tłumu Osoby ze zmniejszoną funkcją krwiotwórczą, takie jak białaczka, różne niedokrwistości, zespół mielodysplastyczny lub osoby z trombocytopenią, powinny zwracać uwagę na pobieranie krwi i nie powinny pobierać więcej lub więcej krwi. Działania niepożądane i ryzyko 1. Po pobraniu krwi nie naciskać otworu igły, aby uniknąć krwiaka podskórnego. Jeśli we krwi jest mały siniak, jest on lekko delikatny, nie panikuj, możesz zrobić gorący kompres po 24 godzinach, aby przyspieszyć wchłanianie krwi. Ogólna niewielka ilość zatorów stopniowo wchłania się w ciągu 3 do 5 dni, a kolor staje się jaśniejszy i wraca do normy. 2. Po pobraniu krwi objawy, takie jak zawroty głowy, zawroty głowy, zmęczenie itp., Należy natychmiast oprzeć na wznak, wypić niewielką ilość syropu, a po ustąpieniu przejść badanie fizykalne.