Proteinkonzentrationsbestimmung

Die Bestimmung der Proteinkonzentration ist die Bestimmung der Proteinkonzentration durch chemische oder physikalische Methoden und eine wichtige Methode, die häufig zur Berechnung der Wiederfindungsrate von Reinigungsmethoden verwendet wird. Die Biuret-Methode Die Biuret-Methode stellt die erste Methode zur Bestimmung der Proteinkonzentration mittels Kolorimetrie dar. Schwefelammonium beeinträchtigt nicht die Farbentwicklung, Cu2 + - und Proteinpeptidbindungen sowie Tyrosinreste, die zu Purpurblau komplexieren Die Verbindung hat eine maximale Absorption bei einer Wellenlänge von 540 nm. Das Biuret-Verfahren wird üblicherweise zur Bestimmung von Proteinlösungen im Bereich von 0,5 g / l bis 10 g / l verwendet. Grundlegende Informationen Fachklassifikation: kardiovaskuläre Untersuchung Klassifikation: Blutuntersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Häufig bei Krankheiten wie Mangelernährung. Normalwert: Normalwert: 60-80 g / l Überdurchschnittlich: Häufig bei Krankheiten wie Übergewicht. Negativ: Positiv: Tipps: Essen Sie am Vortag nicht zu fettige, proteinreiche Lebensmittel und vermeiden Sie starkes Trinken. Normalwert Der Normalwert des menschlichen Körpers beträgt im Allgemeinen 60-80 g / l. Klinische Bedeutung Ungewöhnliches Ergebnis 1. Biuret-Methode: Die Biuret-Methode ist die erste Methode zur kolorimetrischen Bestimmung der Proteinkonzentration: Schwefelammonium beeinträchtigt nicht die Farbentwicklung, Cu2 + - und Proteinpeptidbindungen sowie den Tyrosinrestkomplex und bildet Purpur Blauer Komplex mit maximaler Absorption bei einer Wellenlänge von 540 nm. Das Biuret-Verfahren wird üblicherweise zur Bestimmung von Proteinlösungen im Bereich von 0,5 g / l bis 10 g / l verwendet. 2. Lowry-Methode: Cu + bildet mit Protein in alkalischer Lösung einen Komplex, der das Phosphor-Molybdän-Phosphor-Phosphorsäure-Reagens (Folin-Phenol-Reagens) reduziert. Das Ergebnis ist eine dunkelblaue Farbe. Diese Methode ist wesentlich empfindlicher als die Biuret-Methode und eignet sich zur Bestimmung von Proteinlösungen im Bereich von 20 mg / L bis 400 mg / L. 3. UV-Absorptionsmethode: Die meisten Proteine ​​haben die charakteristische maximale Absorption bei einer Wellenlänge von 280 nm. Dies ist auf das Vorhandensein von Tyrosin, Tryptophan und Phenylalanin im Protein zurückzuführen, mit denen der Gehalt von 0,1 bis 0,5 mg / ml bestimmt werden kann. Proteinlösung. Leute, die überprüft werden müssen Es gibt Menschen, die schwach und schwach sind, schläfrig, Haut, Schleimhäute und Unaufmerksamkeit. Niedrige Ergebnisse können Krankheiten sein: Unterernährung, Muskeldystrophie. Hohe Ergebnisse können Krankheiten sein: Fettleibigkeit, einfache Vorsichtsmaßnahmen gegen Fettleibigkeit Tabu vor dem Test: Essen Sie am Tag vor dem Test nicht zu fettige, proteinreiche Lebensmittel, um starkes Trinken zu vermeiden. Der Alkoholgehalt im Blut wirkt sich direkt auf die Testergebnisse aus. Nach 20 Uhr am Tag vor der ärztlichen Untersuchung sollten Sie fasten. Untersuchungsvoraussetzungen: Bei der Blutentnahme sollten Sie sich entspannen, um die durch Angst verursachte Kontraktion der Blutgefäße zu vermeiden und die Schwierigkeit der Blutentnahme zu erhöhen. Bei der Messung wird eine kleine Menge des Protein-Farbstoff-Komplexes an der Wand der Küvette adsorbiert, und die Adsorptionsmenge des Komplexes ist vernachlässigbar. Nach der Messung kann die blaue Küvette mit Ethanol gewaschen werden. Inspektionsprozess Die Probanden wurden venös gesammelt und rechtzeitig auf Serumtrennung untersucht. Zeichnen Sie eine Standardkurve: Nehmen Sie eine 96-Well-Mikrotiterplatte und fügen Sie Reagenzien hinzu. Nach Zugabe des Reagenzes werden 20 μl der Probenlösung genau in die Enzymstandardvertiefung aufgenommen, 200 μl BCA-Reagenz zugegeben, vorsichtig geschüttelt, 30-60 Minuten bei 37 ° C inkubiert, auf Raumtemperatur abgekühlt, als Kontrolle ein Blindwert verwendet und mit dem Mikroplattenleser bei 590 nm verglichen. Die Farbe mit dem Rinderserumalbumin-Gehalt als Abszisse und der Extinktion als Ordinate zeichnet eine Standardkurve. Unter Verwendung des Standardkurvenrohlings als Kontrolle wurde der Proteingehalt der Probe aus der Standardkurve basierend auf der Extinktion der Probe ermittelt. Nicht für die Menge geeignet Menschen mit einer erheblichen Blutungsneigung. Nebenwirkungen und Risiken 1, subkutane Blutung: Aufgrund der Presszeit von weniger als 5 Minuten oder wegen unzureichender Blutentnahmetechnologie kann es zu subkutanen Blutungen kommen. 2, Unbehagen: Die Einstichstelle kann Schmerzen, Schwellungen, Empfindlichkeit, subkutane Ekchymose mit bloßem Auge sichtbar erscheinen. 3, Schwindel oder Ohnmacht: in der Blutabnahme, aufgrund emotionaler Überlastung, Angst, Reflex durch Vagusnerverregung, Blutdruckabfall, etc. verursacht durch unzureichende Blutversorgung des Gehirns durch Ohnmacht oder Schwindel. 4. Infektionsrisiko: Wenn Sie eine unreine Nadel verwenden, besteht Infektionsrisiko.