Neutralisationstest

Der Neutralisationstest basiert auf der Bestimmung der Infektiosität des Virus und der Fähigkeit des Immunserums, das Virus zu neutralisieren, basierend auf dem Vergleich der Restinfektiosität des Virus nach Neutralisation durch das Immunserum. Wenn ein Tier mit einem Virus infiziert ist, wird im Körper ein spezifischer neutralisierender Antikörper produziert, der spezifisch an das entsprechende Virion bindet, wodurch verhindert wird, dass das Virus an die empfindliche Zelle adsorbiert oder deren Invasion hemmt, so dass das Virus seine Infektionsfähigkeit verliert. Grundlegende Informationen Fachliche Einstufung: Untersuchung auf Infektionskrankheiten und Einstufung: immunologische Untersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: nicht Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Normalwert: Nein Überdurchschnittlich: Negativ: Weniger als 10 ist negativ und kein Virus. 10 bis 49 sind verdächtig. Positiv: Im Allgemeinen wird ein Neutralisationsindex von mehr als 50 als positiv angesehen, und es liegt ein Virus vor. Tipps: Achten Sie auf normale Essgewohnheiten und auf persönliche Hygiene. Normalwert Virusmethode mit fester Serumverdünnung: Bei Viren ist der Neutralisationsindex normalerweise größer als 50, und 10 bis 49 sind verdächtig, und weniger als 10 sind negativ. Normalwert des Neutralisationstests: Der menschliche Körper befindet sich in einem dynamischen Gleichgewicht und in einem gesunden Zustand. Klinische Bedeutung Dieser Test wird hauptsächlich zum Nachweis von Antikörpern aus dem zu testenden Serum oder zum Nachweis von Viren aus dem Krankheitsmaterial verwendet, wodurch Virusinfektionen diagnostiziert werden; 2 um die Toxine in den Materialien mit Antitoxinserum zu überprüfen oder die Art der Toxine in den Bakterien zu identifizieren; Virales Serum oder Antitoxin-Titer; 4 Der Neutralisationstest zur Identifizierung und Typisierung neu isolierter Viren kann nicht nur an empfindlichen Versuchstieren, sondern auch an Zellkulturen oder Hühnerembryonen durchgeführt werden. Die Testmethoden umfassen hauptsächlich einen einfachen qualitativen Test, eine Methode mit fester Serumverdünnung, eine Methode mit fester Virusverdünnung und eine Plaquereduktionsmethode. Positive Ergebnisse können Krankheiten sein: Mumps, AIDS, Dengue-Fieber, Japanische Enzephalitis, Coxsackie-Virus-Ausschlag, Maul- und Klauenseuche, Vorsichtsmaßnahmen gegen Tollwut Vor der Untersuchung verboten: Achten Sie auf normale Essgewohnheiten und persönliche Hygiene. Voraussetzungen für die Inspektion: Aktiv mit dem Arzt zusammenarbeiten. Inspektionsprozess (1) Einfacher qualitativer Neutralisationstest Diese Methode wird hauptsächlich zum Nachweis des Virus im Krankheitsmaterial verwendet und kann auch initial identifiziert oder finalisiert werden. Testtiere (oder Hühnerembryonen, Zellkulturen) und Inokulationswege werden zuerst auf der Basis der Virusanfälligkeit ausgewählt. Das Material wird gemahlen und auf eine bestimmte Konzentration verdünnt (ca. 100 LD50 ~ 1000 LD50 oder TCID50). Kontaminierte Materialien müssen mit Antibiotika (200 bis 1000 Einheiten Penicillin und Streptomycin) versetzt oder mit einem Bakterienfilter filtriert, mit bekanntem Antiserum (entsprechend verdünnt oder nicht verdünnt) gemischt und mit normalem Serum verdünnt werden Zum Vergleich. Nach dem Mischen wurden die Zellen 1 Stunde bei 37 ° C und mindestens 3 Tiere in jeder Gruppe inokuliert. Isolationsernährung, Beobachtung von Morbidität und Mortalität. Die Kontrolltiere starben, während die Tiere in der Neutralisationsgruppe nicht starben, was bestätigte, dass die Krankheit das dem Antiserum entsprechende Virus enthielt. Diese Methode kann auch zur Identifizierung und Typisierung von Toxinen (z. B. Toxinen) verwendet werden. (2) Feste Serumverdünnungsvirusmethode Bei diesem Verfahren wurde das Virus in 10-fachen Schritten verdünnt und zwei Röhrchen wurden platziert, die erste Säule wurde mit normalem Serum (Kontrollgruppe) versetzt und die zweite Säule wurde mit zu testendem Serum (Testgruppe) versetzt. Nach dem Mischen wurden die Zellen 1 Stunde lang bei 37 ° C inokuliert, und jedes Röhrchengemisch wurde separat in die ausgewählten Testtiere inokuliert, und 3 bis 5 Tiere wurden für jede Verdünnung verwendet. Nach der Inokulation täglich beobachten und die Anzahl der Todesfälle aufzeichnen. Nach der Beobachtung LD50 und Neutralisationsindex berechnen (Tabelle 7-1, Tabelle 7-2). Diese Methode ist für den Nachweis einer großen Anzahl von Proben anwendbar. Mit dieser Methode werden meist neutralisierende Antikörper im zu testenden Serum nachgewiesen: Bei Viren ist der Neutralisationsindex in der Regel größer als 50 und positiv, 10 bis 49 sind verdächtig und weniger als 10 sind negativ. (3) Fixe Virusverdünnungsserummethode Mit dieser Methode wird der Neutralisationspreis von antiviralem Serum bestimmt: Das zu testende Serum wird 2-fach verdünnt und die Viruslösung mit dem gleichen toxischen Wert wird zugegeben (gemischt mit Serum, jede Dosis enthält 100LD50 Virus), gut schütteln. Die Testtiere wurden 1 h bei 37 ° C inokuliert. Hinweis: [1] Impfdosis 0,1 ml, enthält das Virus 100LD50. [2] bezieht sich auf die Verdünnung nach dem Mischen mit dem Virus. [3] Der Nenner ist die Anzahl der Impfungen und der Zähler ist die Anzahl der Schutzmaßnahmen. [4] PD50 ist halb geschützt und die Berechnungsmethode ist dieselbe wie die LD50-Berechnung. (4) Plaquereduktionsmethode Der Virusneutralisationstest wurde an Zellkulturen durchgeführt, und in den letzten Jahren wurde häufig die Plaquereduktionsmethode angewendet. Zuerst wird das Virus auf eine geeignete Konzentration verdünnt, so dass 80 bis 100 PFU (Plaque Forming Unit) pro 0,2 ml mit den verschiedenen Verdünnungen des zu testenden Serums gemischt und 1 bis 2 Stunden bei 37 ° C gehalten werden, um den PFU zu messen. Eine 50% ige Serumverdünnung des Plaques ist der Neutralisationspreis des Serums. Siehe Tabelle 7-4. Tabelle 7-4 Beispiel eines Neutralisationstests für die Plaque-Reduktionsmethode Hinweis: [1] Das Serum wurde in 4-fachen Schritten verdünnt. [2] Die Plaque wird um 50% der Serumverdünnung reduziert und die Berechnungsmethode entspricht der Berechnung von LD50. Nicht für die Menge geeignet Menschen mit reduzierter hämatopoetischer Funktion wie Leukämie, verschiedener Anämie, myelodysplastischem Syndrom oder Menschen mit Thrombozytopenie sollten auf die Blutabnahme achten und nicht mehr oder mehr Blut abnehmen. Nebenwirkungen und Risiken 1. Drücken Sie nach der Blutentnahme nicht auf das Nadelloch, um ein subkutanes Hämatom zu vermeiden. Wenn sich ein kleines Stück Bluterguss im Blut befindet, ist es leicht zart. Bitte keine Panik. Sie können nach 24 Stunden eine heiße Kompression durchführen, um die Absorption von Blut zu fördern. Die allgemeine geringe Menge an Stau wird nach 3 bis 5 Tagen allmählich absorbiert und die Farbe wird heller und normaler. 2. Nach der Blutabnahme sollten Symptome wie Schwindel, Schwindel, Müdigkeit usw. sofort auf dem Rücken liegen, eine kleine Menge Sirup trinken und sich dann einer körperlichen Untersuchung unterziehen, nachdem die Symptome gelindert sind.