Serum-Lipoprotein und Serum-Lipoprotein-Elektrophorese

Die Lipoproteinelektrophorese wird hauptsächlich zur Klassifizierung von Hyperlipoproteinämie verwendet. Außerdem ist es hilfreich, den Blutlipidstatus bei koronaren Herzerkrankungen zu verstehen und die klinische Diagnose und Behandlung besser zu steuern. Grundlegende Informationen Fachklassifikation: kardiovaskuläre Untersuchung Klassifikation: biochemische Untersuchung Anwendbares Geschlecht: ob Männer und Frauen Fasten anwenden: Fasten Analyseergebnisse: Unter dem normalen Wert: Gefunden bei niedriger Lipoproteinämie und so weiter. Normalwert: Lipoprotein mit sehr niedriger Dichte: 0,06-0,3 g / l Low Density Lipoprotein: 0-7 g / l High-Density-Lipoprotein (männlich): 0,41–0,63 g / l Zheng mit hoher Dichte von 0,42 bis 0,68 g / l Überdurchschnittlich: Gefunden bei primärer Hyperlipidämie und so weiter. Negativ: Positiv: Tipps: Vor der Untersuchung ist die Diät leicht und Alkohol verboten. Suchen Sie morgens nach einem leeren Magen. Normalwert Celluloseacetatmembranelektrophorese Mariendistelpartikel 0 g / l (0 mg / dl); Lipoprotein mit sehr niedriger Dichte 0,06 bis 0,3 g / l (6 bis 30 mg / dl); Lipoprotein niedriger Dichte <7 g / l (<700 mg / dl); High Density Lipoprotein: Männlich 0,52 ± 0,11 g / l (43 ± 18 mg / dl); Weiblich 0,55 ± 0,13 g / l (47 ± 2 mg / dl). Klinische Bedeutung 1, erhöht: bei primärer Hyperlipidämie. 2, niedriger: gesehen bei niedriger Lipoproteinämie. Hohe Ergebnisse können Krankheiten sein: Hyperlipidämie, Hyperlipoproteinämie Typ II, Überlegungen zu koronaren Herzerkrankungen 1. Probe: Lipoprotein kann aus frischem, nicht gefrorenem Serum isoliert werden. Plasma ist nicht für die Lipoproteinelektrophorese geeignet, da eine Fibrinogenbande auftritt. 2. Lipoproteinprofile mit klaren Trennkomponenten sind Voraussetzung für eine genaue Interpretation. Wenn diese Bedingungen gut erfüllt sind, können die Lipoproteinelektrophorese und die Referenzmethode (Ultrazentrifugation) ziemlich konsistent sein. Die Präzision jeder Komponente ist unterschiedlich und wird durch den Variationskoeffizienten geschätzt, der im Allgemeinen weniger als 5% beträgt. 3. Gelegentlich verschwinden Alpha-Lipoproteine ​​und / oder es erscheint eine schmale Alpha-Lipoproteinbande. Dies liegt daran, dass freie Fettsäuren enthalten sind. Die Anreicherung von Alpha-Lipoproteinen bewirkt, dass diese Partikel die gleiche Ladung haben. Wenn die Dichte der α-Zone zunimmt, ist das Ergebnis hoch. Im Vergleich zu Fällungstechniken ist die quantitative Lipoproteinelektrophorese teuer. Inspektionsprozess Unmittelbar nach der venösen Blutentnahme wird die Testoperation: 1. Den Puffer in den Elektrophoresetank geben und den Puffer in den Tanks auf beiden Seiten so einstellen, dass sie in der gleichen Ebene liegen. 2. Vorbereitung des Celluloseacetatfilms: Nehmen Sie einen Celluloseacetatfilm (2 cm × 8 cm) und zeichnen Sie mit einem Bleistift eine horizontale Linie bei 1,5 cm (eine Seite der Negativseite) der rauen Oberfläche, um eine gepunktete Markierung zu erhalten. Nach der Nummerierung und Kennzeichnung der positiven und negativen Elektroden wurde der Film in die Barbiturat-Barbital-Natriumpufferlösung getaucht, und nach einer ausreichenden Sättigung (üblicherweise 20 Minuten) wurde der überschüssige Puffer durch Einlegen des sauberen Filterpapiers entfernt. 3. Das Celluloseacetatfilmhaar wird an dem Elektrophoresetankhalter befestigt und begradigt. Pipettieren Sie 3 ~ 5 μl nicht hämolytisches Serum mit einer Mikropipette und geben Sie es entlang der horizontalen Linie in die horizontale Linie. Die Probe sollte in einem bestimmten Abstand vom Rand des Films gehalten werden, um eine Verformung der Proteinbande im Elektrophoresemuster zu vermeiden. Nachdem das Serum in den Film eingedrungen ist, wird der Film umgekehrt. Kleben Sie den Film mit der hellen Seite nach oben flach auf die Halterung des Elektrophoresetanks und verbinden Sie die beiden Enden des Films mit zweilagigem Filterpapier oder vier Lagen Gaze mit dem Puffer. Warten Sie eine Weile. 4, schalten Sie die Energie ein, beachten Sie die positiven und negativen Elektroden auf dem Zelluloseacetatfilm, schließen Sie nicht falsch an. Spannung 90 ~ 150 V, strom 0,4 ~ 0,6 mA / cm (verschiedene elektrophorese erforderlich spannung, strom kann unterschiedlich sein, sollte flexibel sein), sommer power 45 min, winter power-on zeit ist etwas länger, über 60 min, elektrophorese zone expansion über 25 ~ 35mm können sein. 5, Färben: Nach Beendigung der Stromversorgung den Film entfernen und direkt in die Lichunhong S-Farbstofflösung oder die Amino Black 10B-Färbelösung eintauchen, 5 bis 10 Minuten färben (durch die Albumin-Zone), dann den Rest in der Spüllösung abspülen. Färben, bis der Hintergrund farblos ist. 6, quantitativ: 1 kolorimetrische Methode: Den gespülten Film abtupfen, die gefärbte Proteinfläche in das entsprechende Röhrchen schneiden, 0,6 ml / l Natriumhydroxid 6 ml in das Albuminröhrchen geben (Extinktion multipliziert mit 2 berechnen), den Rest 3 ml in jedes Röhrchen geben, mehrmals schütteln und 20 Minuten in einen Wassertank mit 37 ° C legen, damit die Farbe ausblutet. Amino Black 10B-Färbung Die Extinktion jedes Röhrchens wurde bei 620 nm unter Verwendung eines Spektrophotometers abgelesen, und dann wurde der Inhalt jedes Röhrchens berechnet (gleichzeitige Blindröhrchenkontrolle). Wenn das Lichunhong S gefärbt wurde, wurde das Sickerwasser mit 0,1 mol / l Natriumhydroxid behandelt und die Menge war dieselbe wie oben. Nach 10 Minuten 0,6 ml 400 ml / l Essigsäure in das Albuminröhrchen geben (Extinktion mit 2 multiplizieren) und 0,3 ml in die anderen Röhrchen geben, um etwas Natriumhydroxid zu neutralisieren, um die Farbe zu vertiefen. Die Extinktion jedes Röhrchens wurde bei 520 nm mit einem Spektrophotometer (gleichzeitige Blindwertkontrolle) abgelesen, und dann wurden die jeweiligen Gehalte berechnet. 2 Densitometer-Scanmethode: A. Transparent: Die Spülflüssigkeit auf dem Film aufsaugen (um zu verhindern, dass die transparente Flüssigkeit verdünnt wird, um das transparente Ergebnis zu beeinträchtigen), den Film 2 bis 3 Minuten in die transparente Flüssigkeit eintauchen, dann herausnehmen und rollend glätten. Saubere und kratzfreie Objektträger (keine Blasen bilden), Objektträger für eine Weile aufstellen, überschüssige transparente Flüssigkeit entfernen, in einen Ofen mit einer konstanten Temperatur von 90-100 ° C stellen, 10-15 Minuten backen, herausnehmen und auf Raumtemperatur abkühlen. Die durch dieses Verfahren transparenten Proteinbereiche sind unterschiedlich, der Film ist flach und kann direkt gescannt und dauerhaft konserviert werden (transparent mit Naphthalinwasserstoff oder flüssigem Paraffin. Der gespülte Film sollte getrocknet und transparent sein, und der transparente Film kann nicht gelagert werden. Lang und leicht zu falten). 2 Scan-Quantifizierung: Der transparente Film wird zur Scan-Analyse in ein vollautomatisches Densitometer oder eine andere Densitometer-Darkbox gelegt. Nicht für die Menge geeignet Unangemessene Personen: Im Allgemeinen gibt es keine Personen, die nicht geeignet sind. Nebenwirkungen und Risiken 1, lokale subkutane Blutung: Nach der Blutentnahme sollte für eine ausreichende Zeit gedrückt werden, insbesondere bei Patienten mit Blutungsneigung, um ein subkutanes Nässen und Quetschen aufgrund fehlender Blutgerinnung zu vermeiden. 2, Infektion: Aufmerksamkeit zur aseptischen Operation während der venösen Blutentnahme, um lokale Infektion nicht zu verursachen.