Escherichia coli-Gastroenteritis
Einführung
Einführung in die Escherichia coli Gastroenteritis Enterobacteriaceae umfassen eine große Gruppe gramnegativer Bazillen mit ähnlichen biologischen Merkmalen, von denen die meisten im Darm von Menschen und Tieren zu finden sind und von denen einige offensichtliche pathogene Wirkungen auf den Menschen haben. Außerhalb des Traktes kann die normale Darmflora auch verschiedene Krankheiten als bedingte Krankheitserreger hervorrufen. Grundkenntnisse Der Anteil der Krankheit: 30% Anfällige Personen: Keine bestimmten Personen Art der Infektion: Ausbreitung des Verdauungstraktes Komplikationen: Durchfall, Dehydration
Erreger
Ursachen der Escherichia coli Gastroenteritis
(1) Krankheitsursachen
Dieser Stamm ist ein gramnegativer Bazillus, die Größe beträgt (1,1 ~ 1,5) m × (2,0 ~ 6,0) m (lebende Bakterien) oder (0,4 ~ 0,7) m × (1,0 ~ 3,0) m (färbende Bakterien), die meisten Stämme haben einen ganzen Körper Flagellen, können sich bewegen, es gibt Pili auf dem ganzen Körper, keine Sporen, einige Stämme haben Umschläge, Pili befinden sich auf der Oberfläche der Bakterien, faserige Anhänge, sind hydrophobe Proteinkomponenten, haben eine gute Antigenität, können den Körper dazu anregen, entsprechende zu produzieren Der Antikörper ist ein fakultatives anaerobes Bakterium, das sich bei 15 bis 45 ° C entwickeln kann. Die optimale Wachstumstemperatur beträgt 37 ° C und der optimale pH-Wert 7,4 bis 7,6. Auf dem Darmbakterien-Selektionsmedium kann es Laktose fermentieren, um Zucker zu produzieren. Der Indikator verfärbt sich unter Bildung gefärbter Kolonien, während die meisten pathogenen Bakterien in den Enterobacteriaceae Laktose nicht zersetzen und die Kolonien farblos sind.Dieser Punkt wirkt sich selektiv auf die Isolierung von Enterobacteriaceae-pathogenen Bakterien aus, die Glukose, Laktose, Maltose und Mannit fermentieren. Eine Vielzahl von Zuckeralkoholen produzieren Säure, um Gas zu produzieren, für Saccharose, Dulcitol, Raffinose, Rhamnose usw. variieren die IMVC-Tests je nach Stamm -, Urease, Phenylalanin, Malonat und andere negative Antigene Die Struktur ist komplizierter und besteht hauptsächlich aus drei Arten von Antigenen: O, H und K. Das O-Antigen ist ein hitzebeständiger Polysaccharid-Phospholipid-Komplex. Es liegen 171 Arten vor, die die Grundlage für die Serotypisierung bilden, H-Antigen ist ein hitzelabiles Protein und 56 Antigene wurden bisher etabliert, K-Antigen ist ein Hüllantigen, und bis heute sind 100 Arten bekannt. Überleben für Wochen bis Monate, Überleben in Fäkalien mit niedrigerer Temperatur, anfällig für Arzneimittelresistenz, Auftreten von Arzneimittelresistenz, hauptsächlich durch Zufuhr von Plasmiden mit Arzneimittelresistenzfaktor (R-Faktor).
(zwei) Pathogenese
1. Invasivität: Escherichia coli hat K-Antigen und Pili, K-Antigen hat Anti-Phagozytose und wirkt resistent gegen Komplement und Antikörper, Pili kann die Bakterienadhäsion unterstützen und Zilien von toxischem Escherichia coli produzieren Das Bakterium wird Kolonisationsfaktor oder Kolonisationsfaktor genannt, einschließlich CFAI, CFAII. Sie werden von Bakterienplasmiden kontrolliert und können durch Plasmide auf andere Stämme übertragen werden. Sie sind hoch antigen und können den Wirt dazu anregen, spezifische Antikörper zu produzieren und invasiv zu sein. Die Belastung kann in die Oberfläche der Darmschleimhaut eindringen und Entzündungen verursachen.
2. Enterotoxin: Etoxin, das während des Wachstums- und Vermehrungsprozesses freigesetzt wird, wird aufgrund seiner Hitzebeständigkeit als Escherichia coli-Enterotoxin bezeichnet: hitzebeständiges Enterotoxin (ST), hitzebeständige Wurst Das Toxin (hitzelabiles Enterotoxin, LT), sowohl ST als auch LT, wird von extrachromosomalen Plasmiden aus genetischem Material kodiert, die die Synthese steuern, und bestimmte EFEC-Stämme produzieren zytotoxische Substanzen.
(1) Hitze-labiles Enterotoxin (LT): Enterotoxin, ähnlich wie Vibrio cholerae, kann die Adenosincyclase in Darmepithelzellen stimulieren, ATP in cAMP umwandeln, eine übermäßige Sekretion von Darmflüssigkeit fördern und die Darmresorptionskapazität überschreiten. Durch Durchfall verursacht hitzebeständiges Enterotoxin (ST) eine Erhöhung der Menge an intrazellulärem cGMP durch Aktivierung der Guanylatzyklase auf den Zellen, was zu einer Störung des Flüssigkeitshaushalts und zu Durchfall führt.
(2) Endotoxin: Die Zellwand von Escherichia coli hat Endotoxinaktivität und die toxische Stelle ist Lipid A. O-spezifisches Polysaccharid trägt zur Abwehrfunktion von Bakterien gegen den Wirt bei.
3. Adhäsin: Adhäsin (BFP), früher als pathogener Escherichia coli-Adhäsionsfaktor (EAF) bekannt, ist ein Pili, das von einem großen Plasmid des Bakteriums codiert wird, das eng mit der Adhäsion zusammenhängt. BFP-vermittelte Adhäsion ist lokale Adhäsion. Die Bakterien sind nicht gleichmäßig auf der Zelloberfläche verteilt, sondern es sind Cluster oder Mikrokolonien auf den Zellen vorhanden. Gleichzeitig ist die Adhäsion eine langfristige Adhäsion und die Bakterienzellen sind nicht direkt mit den Zellen verwandt. Kontakt, die beiden sind durch Pili verbunden.
4. Ginseng: Ginseng, früher als EAE-Protein bekannt, ist ein untergeordnetes Außenmembranprotein von enteropathogenen Escherichia coli mit einem Molekulargewicht von 94 kD und einer Höhe der N-terminalen Region des Invasins von Yersinia. Die Homologie ist, dass sich das codierende Gen eae A auf dem Chromosom der Zelle befindet, und eine ähnliche Struktur von eae A wurde kürzlich in hämorrhagischem Escherichia coli gefunden.
Compactin stellt die Hauptmaterialbasis für die enge Adhäsion und Invasion von Escherichia coli an Wirtszellen dar. Wenn es an die entsprechenden Rezeptoren auf der Wirtszellmembran bindet, führt es zu einem Anstieg der intrazellulären Ca2-Konzentration und der Phosphorylierung von Proteinen. Das Gerüst wird neu angeordnet, um ein dichtes fibrilläres Actin-Pad an der Bakterienadhäsion zu bilden, wodurch die Bakterien in die Zellen eindringen können. Zu diesem Zeitpunkt erscheinen die infizierten Zellen als pinselartige Kanten und verlieren Mikrovilli.
5.eae A-Genfamilie: Tnpho A wurde in Plasmid-enthaltende EPEC-induzierte Mutationen inseriert Als Ergebnis wurde festgestellt, dass 22 Stämme bei 329 Stämmen nicht invasiv waren, und 5 Stämme von Tnpho A wurden in das eae A-Gen des Chromosoms inseriert, was Invasivität und Enge zeigte. Weitere 2 Stämme von Tnpho A, die unter dem eaeA inseriert wurden, haften nicht mehr an den Epithelzellen, produzieren aber dennoch eine Verdichtung, was darauf hindeutet, dass es in EPEC einen eae-Gencluster gibt. Das Gen unter eae A heißt eae B.
Durch genetische Studien, kombiniert mit den oben genannten pathogenen Faktoren, schlug Donnenberg vor, die Pathogenese von EPEC in drei Phasen zu unterteilen: Die erste Phase wird durch BFP vermittelt, das von BFP A auf dem EAF-Plasmid codiert wird, wodurch Bakterien aneinander haften und an den Mikrovilli haften können. Plasmide und chromosomale Loci führen zu einer anfänglichen lokalen Adhäsion, einer Umwandlung des chromosomalen Gens in Phase 2, was zu einer Protein-Tyrosin-Phosphorylierung, einer erhöhten intrazellulären Calciumkonzentration, einer frühen Zerstörung des Zellgerüsts, Mikrovilli-Veränderungen und einer Flüssigkeitssekretion führt Mit dem Fortschreiten der Infektion wird der eae-Gencluster aktiviert und das produzierte enge Hormon bewirkt, dass die Bakterien an der Epithelzellmembran haften, was zur Zerstörung des Zellgerüsts und der bakteriellen Adhäsion an dem unteren Aktin, Myosin usw. führt und ein Teil der Bakterien in das Epithel eindringt. Zellen.
Verhütung
Prävention von Escherichia coli Gastroenteritis
1. Verwalten Sie die Infektionsquelle
(1) Früherkennung: durch Selbstmeldung, gegenseitige Meldung, ambulante, rund um die Uhr stattfindende Erfassung von Patienten, Orten, an denen die Epidemie aufgetreten ist, unter besonderer Berücksichtigung der medizinischen Überwachung des Managementpersonals, des Personals der Wasserversorgung, des Personals der Lebensmittelverarbeitung und des Naturschutzpersonals Verstehen Sie häufig die Stuhlsituation, wenn nötig, Stuhluntersuchung, rechtzeitige Entdeckung von Patienten und Erregern, regelmäßige Nachuntersuchung von Patienten aus dem Krankenhaus entlassen, verstehen Sie den Stuhl, mit oder ohne Symptome und Anzeichen, rechtzeitige Erkennung von wiederkehrenden und chronischen Patienten.
(2) Isolierung und Behandlung: Durchfall, der vom Patienten oder Träger als Infektionsquelle verursacht wird. Der Patient sollte sofort zur Darmisolierung ins Krankenhaus gebracht werden. Die Behandlung sollte zeitnah und gründlich erfolgen und vor der Entlassung während der Isolierungsphase geheilt werden Patienten sollten die Gesundheitserziehung und das Gesundheitsmanagement stärken.Die Patienten sollten verschiedene Vorschriften einhalten, bewusst darauf achten, nicht mit gesunden Menschen in Kontakt zu kommen, und Exkremente nicht beiläufig entsorgen, um Umweltverschmutzung zu vermeiden.
2. Unterbrechen Sie die Übertragungsroute
(1) Gute Arbeit in der Wasserversorgung leisten: Das Gesundheitsamt sollte regelmäßig die Wasserqualität und den Desinfektionseffekt überprüfen und die dezentrale Wasserversorgung sollte die Wasserquelle auswählen. Trinkwasser (einschließlich Wasser für das Haus, Wasser zum Waschen) muss desinfiziert werden. Achten Sie auf den wirksamen Chlorgehalt, und das restliche Chlor sollte bei 0,2 bis 0,3 mg / l gehalten werden.
(2) Gute Lebensmittelhygiene verwalten:
1 Häufige Untersuchungen und körperliche Untersuchungen der Täter ergaben, dass verdächtige Patienten, die sofort zur Untersuchung und Behandlung ins Krankenhaus geschickt wurden, von der Leitung des Personals vor und vor den Mahlzeiten (auch vor dem Kochen) darauf bestehen sollten, sich die Hände zu waschen, Arbeitskleidung bei der Arbeit zu tragen, sauber zu halten, Fistel Personal, Catering-Servicepersonal und Kinderbetreuer sollten ihren Arbeitsplatz sofort nach der Krankheit verlassen und warten, bis sie vollständig wiederhergestellt sind, bevor sie zur Arbeit zurückkehren.
2 Führen Sie das Meal-Sharing-System ein, waschen Sie das Geschirr in Wasser, bewahren Sie es in Stäbchen auf und sterilisieren Sie das übliche Geschirr. Die Essensreste sollten vor dem Essen vollständig erhitzt werden. Essen Sie kein kaltes Gemüse und keine rohen Lebensmittel oder Halbwertszeiten. Kaufen Sie nicht, tun Sie nicht Essen Sie schimmelige Lebensmittel, rohe Messer, Teller und Behälter sollten getrennt werden.
(3) Ergreifen Sie die Gülleverwaltung: Gülle, Müll, Abwasser sollten harmlos behandelt werden, Toiletten, Viehställe, Müllhalden usw. sollten von einer speziellen Person verwaltet, täglich gereinigt und gewaschen, sauber gehalten werden, keine Fliegen.
(4) Gute Arbeit im Bereich der Umweltsanierung leisten: Reinigen und entfernen Sie immer den Müll Türen und Fenster (einschließlich Toilettentüren und -fenster) sollten eine gute Flugabwehrausrüstung haben. Während der Fliegen sollten Sie regelmäßig Medikamente sprühen, um Fliegen zu beseitigen.
(5) Achten Sie auf die persönliche Hygiene: Entwickeln Sie durch Gesundheitserziehung gute Hygienegewohnheiten, trinken Sie kein rohes Wasser, essen Sie keine unreinen Früchte und kalten Speisen und bestehen Sie darauf, sich vor und nach den Mahlzeiten die Hände mit Wasser zu waschen.
(6) Gute Arbeit im medizinischen Schutz leisten: Beim Umgang mit Ausscheidungen und Erbrechen des Patienten Handschuhe tragen, nach dem Kontakt mit dem Patienten und vor den Mahlzeiten Seife auftragen, Hände gründlich mit fließendem Wasser waschen und sofort vorbeugende Maßnahmen für engen Kontakt treffen.
3. Schützen Sie empfindliche Bevölkerungsgruppen
Stärken Sie Ihre körperliche Bewegung, achten Sie auf Arbeit und Erholung, achten Sie auf Ernährung, Trinkwasserhygiene und persönliche Hygiene.Wählen Sie je nach Epidemie geeignete Impfstoffe, Impfprävention für wichtige Bevölkerungsgruppen, Kriegszeiten, Rettungs- und Katastrophenhilfe und erwägen Sie, geeignete Drogenprävention für Notfälle zu ergreifen. .
4. Führen Sie eine epidemiologische Gesundheitserhebung durch
(1) Epidemiologische Untersuchung von Epidemiegebieten: Führen Sie eine gute Falluntersuchung durch, ermitteln Sie die Infektionsquelle und die möglichen Übertragungsbedingungen, ergreifen Sie vorbeugende Maßnahmen zur Verhinderung der Ausbreitung der Krankheit und organisieren Sie Personal, das epidemiologische Untersuchungen durchführt, wenn Durchfall auftritt. Bekannte Ursachen und Epidemiefaktoren ergreifen wirksame Maßnahmen zur Bekämpfung der Epidemie.
(2) Kontaktmanagement: Personen, die in engem Kontakt mit dem Leben stehen, sollten unter Quarantäne gestellt werden, um die gesundheitliche Situation zu verstehen, insbesondere um die Verschmutzung von Wasserquellen zu verhindern.
(3) Expedition und vorbeugende Medikamente: Das gesamte Personal am Epidemiepunkt wird einmal täglich ab Beginn der Behandlung untersucht. Am zweiten Tag in Folge sollte die erste Ernte vor der Einnahme des Arzneimittels erfolgen. Die folgenden Medikamente können zur Vorbeugung eingenommen werden:
A. Verbindung Sulfamethoxazol: 2 mal / Tag pro Person, jeweils 2 Tabletten und sogar 3 Tage lang.
B. Doxycyclin: Die erste Dosis eines Erwachsenen beträgt 0,2 g, und jedes Mal 0,1 g, einmal pro Tag und sogar 3 Tage lang.
C. Tetracyclin: Erwachsene 0,5 g, einmal alle 6 Stunden und sogar 3 Tage lang.
D. Furazolidon: 2 Mal / Tag, einmal 0,2 g, und sogar 3 Tage lang serviert.
Die tägliche Kinderzahl wird nach Gewicht berechnet: Verbindung Sulfamethoxazol 25 mg, Furazolidon 10 mg und Doxycyclin 6 mg.
Komplikation
Komplikationen bei Escherichia coli Gastroenteritis Komplikationen, Durchfall, Dehydration
Übelkeit und Erbrechen, häufiger Durchfall, wässrigerer Stuhl, aufgrund einer großen Anzahl von Erbrechen und Durchfall, die offensichtliche Symptome von Dehydration und Azidose zeigen, kann akutes Nierenversagen auftreten, wenn die Behandlung nicht rechtzeitig erfolgt, Säuglinge und Kleinkinder können innerhalb weniger Tage sterben.
Symptom
Escherichia coli Magen-Darm-Symptome Häufige Symptome Durchfall ist wässrig mit klebrigen ... Aufblähung Hypokaliämie Krämpfe Unterkühlung Koma Übelkeit Unregelmäßiges Fieber Hypokaliämie
Aufgrund der Virulenz zwischen den verschiedenen Arten von Escherichia coli, den verschiedenen invasiven Bedingungen und dem Unterschied im Körperwiderstand sind die klinischen Manifestationen ebenfalls inkonsistent.
Eine Art ist, dass Bakterien nur an der Darmschleimhaut anhaften, um zu wachsen und Enterotoxin zu produzieren. Indem sie die Adenylylcyclase von Darmwandzellen aktivieren, kann sie die Darmsekretion fördern, wenn der Gehalt an intrazellulärem cyclischem Adenosinmonophosphat (cAMP) erhöht wird. (LT), und die durch ST-Toxin verursachte Sekretion von Darmflüssigkeit wird durch cyclisiertes Guanosin (cGMP) vermittelt, und Enterotoxin kann auch das Epithel peripherer Blutgefäße schädigen, Durchfall verursachen und eine große Menge wässrigen Stuhls abgeben (klinisch ähnlich wie eine choleraähnliche Krankheit). Eine andere Art ist, dass Bakterien in Epithelzellen der Darmschleimhaut eindringen, sich vermehren und toxische Substanzen produzieren können, wodurch ein Netzwerk von Flüssigkeiten in das Darmlumen überfließt und schließlich die Epithelzellen platzen, was zu Nekrose und Geschwüren der Darmschleimhaut und Stuhl mit Eiter führt (Klinisch ähnlich wie bei einer ruhrähnlichen Erkrankung) sind die Hauptläsionen hauptsächlich das Ileum.
Untersuchen
Untersuchung der Escherichia coli Gastroenteritis
1. Proben sammeln
Verwenden Sie ein steriles Wattestäbchen, um den Kot von Patienten mit Durchfall zu entfernen.Wenn kein Kot vorhanden ist, führen Sie einen mit Phosphatpuffer getränkten Rektaltupfer in den Anus 4-6 cm (Kleinkinder 2 bis 3 cm) ein und drehen Sie die Rektumoberfläche im Rektum. Nachdem der Schleim entnommen wurde, ist er in der Transport- oder Konservierungslösung enthalten.Wenn er nicht rechtzeitig versandt werden kann, sollte die Probe bei 4 ° C, jedoch nicht länger als 8 Stunden gelagert werden.
2. Anreicherungs- und Isolationskultur
Für die Isolierung von Escherichia coli sollte bei der anfänglichen Trennung schwaches selektives Medium verwendet werden, wie Eosin Methylenblau, Chinese Blue Rose Sorbitol Maikankai-Platte, Streifentrennung, 18 bis 24 Stunden bei 35 bis 37 ° C kultiviert. Beobachten Sie die morphologischen Eigenschaften der Kolonie, wählen Sie Purpur oder Dunkelrot, die Größe beträgt 1 ~ 3 mm, die Ränder sind sauber und glänzend, und die einzelne Kolonie der zentralen Ausbuchtung wird identifiziert.
3. Identifizierung
(1) Vorläufige Identifizierung: Gemäß den Merkmalen der Kolonie, der durch Abstrich gefärbten Bakterienform und der Färbereaktion wurden die Reinkulturbakterien für die biochemische Reaktion genommen und die entsprechenden Ergebnisse wurden anfänglich als Escherichia coli identifiziert.
(2) Endgültige Identifizierung: Der allgemeine Routinetest kann zur Durchführung der obigen vorläufigen Identifizierung verwendet werden. Falls erforderlich, kann die endgültige Identifizierung gemäß der im Berger System Bacteriology Handbook aufgeführten biochemischen Reaktion erfolgen.
(3) Identifizierungstest: Bestimmte Escherichia coli, insbesondere nicht fermentierte Milchextrakte, sollten von Shigella unterschieden werden.Die Hauptidentifizierungstests der beiden können mit Natriumacetat und Ammoniumgluconat und der Verwendung von Mucinsäure getestet werden. In den drei Tests der Salzsäureproduktion war Escherichia coli positiv, während Shigella negativ war.
1 pathogene Escherichia coli:
A. Hypothetischer Test: Wählen Sie die Kultur auf dem Typenschild aus, auf dem die Kolonie dicht wächst, und verwenden Sie die drei Arten des polyvalenten O-Serums von EPEC für den Objektträger-Agglutinationstest, z. B. die Agglutination mit einem bestimmten multivalenten O-Serum und dann mit dem multivalenten Serum. Das enthaltene einwertige O-Serum wird getestet, zum Beispiel mit einem bestimmten einwertigen O-Serum agglutiniert, und dann werden 3 bis 5 einzelne Kolonien entnommen, und das Serum wird einem Agglutinationstest unterzogen.
B. Biochemischer Test: Wählen Sie die Kolonie mit starker Agglutination von O-monovalentem Serum aus, um Trisaccharid-Eisenagar zu inokulieren, suspendieren Sie das Sputum-Matrix-Testpapier und kultivieren Sie sie 18 bis 20 Stunden bei 36 ° C Der Sputum-positive Stamm kann als Escherichia coli bestätigt werden.Wenn die Sputummatrix negativ ist, muss der VP-Test negativ sein und er kann nicht auf dem Citrat-Agar wachsen, um Escherichia coli zu bestätigen.
C. Serologischer Bestätigungstest: Die Kultur auf dem Trisaccharid-Eisenagar abkratzen, eine Bakteriensuspension mit physiologischer Kochsalzlösung herstellen und auf eine Konzentration verdünnen, die der des MacFarland-Trübungsröhrchens Nr. 3 entspricht. (160 ~ 320), kann 1:40 (mit 0,5% iger Kochsalzlösung) in einem 10 mm × 75 mm großen Reagenzglas verdünnt werden. Das verdünnte Antiserum und die Bakteriensuspension werden nach 16-stündiger Beobachtung bei 50,6 ° C Wassertemperatur in gleichen Mengen gemischt Die Aggregation erfolgt und kann als O-Faktor bestätigt werden.
2 Hämorrhagisches Escherichia coli: bekannt als Stuhl von Patienten mit hämorrhagischer Enteritis, kann mit Sorbit anstelle von Laktose auf der MacConkey-Agarplatte gestrichen werden. Wählen Sie nach der Kultur 3 bis 5 nicht fermentierte Sorbitkolonien aus. O157-Serum (vorzugsweise gleichzeitig mit H7-Serum) wurde für den Objektträger-Agglutinationstest und den Einzelröhrchen-Agglutinationstest verwendet, um die Diagnose zu bestimmen.
Der isolierte Stamm sollte mit Trisaccharid-Eisenagar, suspendiertem Sputummatrix-Testpapier, das 18 bis 20 Stunden bei 36 ° C kultiviert wurde, beimpft werden. Die typischen biochemischen Eigenschaften sind Lactose, Saccharose-Säure-Produktion, Glucose-Säure-Produktionsgas, H2S-negativ, Sputummatrix-positiv und Beimpfung Das Sorbit-Fermentationsröhrchen ist eine langsame Fermentation.
3 giftige Escherichia coli:
A. Biochemischer Test: Wählen Sie 5 koagulierbare Kolonien auf dem Typenschild aus, wählen Sie im Allgemeinen die typischen Kolonien der Laktosefermentation aus, impfen Sie Trisaccharid-Eisenagar an, suspendieren Sie das Sputummatrix-Testpapier und kultivieren Sie alle Laktose bei 36 ° C für 18 bis 20 Stunden. Saccharose produziert Säure, Glucose produziert Säure und produziert mehr Gas.H2S-negative, Sputum-positive Stämme können als Escherichia coli bestätigt werden.Wenn die Sputummatrix negativ ist, muss der VP-Test negativ sein und darf sich nicht im Citrat befinden. Das Wachstum auf Agar kann als Escherichia coli bestätigt werden.
B. Enterotoxintest: Der toxigene Escherichia coli wird hauptsächlich durch den Enterotoxintest bestätigt. Es gibt viele Methoden für den Enterotoxintest. Gegenwärtig wird der LT durch den Zweiphasen-Agardiffusionstest und der ST durch den Saugtest bei Saugmäusen gemessen. Kaninchen wurden an den Ileumschnitt ligiert, um LT und ST zu bestimmen.
Die beiden Enterotoxine wurden durch genetische Diagnose bestimmt.
a) Zweiwege-Agardiffusionstest: Die Teststämme wurden auf Elek-Medium in einer kreisförmigen Schleife an 5 Punkten inokuliert, und zwei Teile wurden auf die gleiche Weise hergestellt und 48 Stunden bei 36ºC kultiviert, und ein Polymyxa wurde auf den Rasen jedes Stammes gelegt. B-Papier, bei 6 ° C für 5 ~ 6 Stunden, Darmtoxin in den Agar, in der Mitte von 5 mm vom Rasen, graben Sie ein Loch mit 4 mm Durchmesser und verwenden Sie einen Tropfen Agarboden, geben Sie LT-Antitoxin in das Loch Als Kontrolle dienten 30 l und die bekannten LT- und nicht-toxigenen Stämme.Die Kultur wurde 15 bis 20 Stunden bei 36 ° C beobachtet.Der weiße Niederschlag war zwischen der Plaque und der Antitoxinvertiefung positiv, andernfalls war er negativ.
Inokulationstest von Saugmäusen: Die getesteten Stämme wurden in toxigene Honda-Brühe inokuliert, 24 h bei 36 ° C kultiviert, 30 min bei 3000 U / min zentrifugiert und der Überstand durch ein Membranfilter filtriert, 30 min bei 60 ° C erhitzt und pro ml filtriert. Fügen Sie 0,02 ml 2% ige Evans-Blau-Lösung hinzu, injizieren Sie 0,1 ml des ersten bis vierten Tages alten Säuglingsmagens mit einem Plastikschlauch, impfen Sie 3 bis 4 gleichzeitig ein, befestigen Sie ihn für 3 bis 4 Stunden und betäuben Sie ihn mit Chloroform. Nehmen Sie alles heraus Der Darmschlauch wiegt das Gewicht des Darms (einschließlich Erguss) und das verbleibende Körpergewicht. Das Verhältnis von Darmgewicht zu Restgewicht ist größer als 0,09 und ist positiv. 0,07 bis 0,09 sind verdächtig.
c) Kaninchenligatur und Ileumtest: Der getestete Stamm wurde in eine toxigene Honda-Brühe eingeimpft, 24 h bei 36 ° C kultiviert, 30 min bei 3000 U / min zentrifugiert und der Überstand durch ein Membranfilter filtriert Erwärmung zum Testen von LT, weitere 60 ° C Erwärmung für 30 Minuten, für ST-Test 2 kg Kaninchen, Fasten für 1 Tag, Laparotomie nach Anästhesie, Entfernen des Ileumsegments gemäß 10 ~ 15 cm für ein Segment, segmentale Ligation, Nehmen Sie 2 ml einer Injektionsbrühe als Negativkontrolle und 2 ml des Filtrats der bekannten toxinproduzierenden Kultur als Positivkontrolle, injizieren Sie die anderen 2 ml des Filtrats der Kulturbrühe des Teststamms in die anderen Abschnitte und nähen Sie die Bauchdecke. Bei ST wurde eine Laparotomie 6 bis 8 Stunden nach der Injektion durchgeführt, bei Messung der LT wurde eine Laparotomie 18 Stunden nach der Injektion durchgeführt und das Filtrat in jedem Darmsegment wurde entnommen, das Volumen wurde gemessen und die Länge des Darmsegments, die Flüssigkeitsmenge (ml) und der Darm wurden gemessen. Das Verhältnis der Länge des Segments (cm) ist größer als 1, um positiv zu sein.
d) Serologischer Test: Der positive Stamm des Enterotoxintests kann zur Bestimmung des O-Antigens mit ETEC-verwandtem multivalentem O-Serum und monovalentem Serum für den Objektträger-Agglutinationstest verwendet werden.
4 invasive Escherichia coli:
A. Biochemischer Test: Auf dem Typenschild sollten 3 bis 5 Kolonien entnommen werden.Im Allgemeinen sollten mehr Kolonien von nicht fermentierter Lactose, die Shigella ähnlich sind, entnommen werden, aber die dominanten Kolonien von fermentierter Lactose können auch ordnungsgemäß entnommen werden und werden entnommen. Die Kolonien werden mit halbfesten Röhrchen beimpft und 18 bis 24 Stunden bei 36 ° C kultiviert.Im Allgemeinen können die Motilitätsstämme verworfen werden, es sei denn, die serologische Identifizierung lautet 0124, so dass der nicht angetriebene Stamm, der mit Trisaccharid-Eisenagar, hängendem Sputummatrix-Testpapier, beimpft wird, 36 18-20 Stunden bei ° C kultiviert und auf Lysindecarboxylase getestet Die typischen biochemischen Eigenschaften von EIEC sind: Lactose, Saccharose produzieren keine Säure oder Säure, Glucose produziert Säure, produziert Gas oder produziert kein Gas, H2S ist negativ und die Sputummatrix ist positiv. Die Lysindecarboxylase ist negativ und es gibt keine Motilität außer O124. Der Lysindecarboxylierungstest kann auch nach dem serologischen Test durchgeführt werden.
B. Serologischer Test: Eine Trisaccharid-Eisenagar-Kultur wurde ausgewählt und zwei multivalente O-Seren von EIEC wurden für einen Objektträger-Agglutinationstest verwendet, um die Zusammensetzung des O-Antigens zu bestimmen.
C. Test auf Hornhaut von Meerschweinchen: Die Bakterien wurden 2 bis 5 Tage lang in die Augen von Meerschweinchen geträufelt, um festzustellen, ob Rötung, Reißen und Verstopfung auftraten.
D. ELISA-Test: Kaninchen wurden mit toxischen Stämmen bekannter EIEC oder Shigella immunisiert, und die erhaltenen Immunseren wurden von einem homologen avirulenten Stamm absorbiert und durch ELISA, EIEC-toxische Stämme und Shigella bestimmt Die Art der toxischen Stämme ist alle positiv.Diese Methode dient zum Nachweis des invasiven Polypeptids der getesteten Bakterien und kann auch mit der Gensondenmethode nachgewiesen werden.
5 Konzentrierte Escherichia coli: Ein wichtiges Merkmal der konzentrierten Escherichia coli (EAEC) ist die Bildung einer charakteristischen Aggregatadhäsion um Hap-2-Zellen, und Yamamoto fand diese Aggregatadhäsion von EAEC bei 37 ° C. Es kann auf der Wachstumsoberfläche einiger flüssiger Medien zur Bildung einer dicken anhaftenden agglomerierten Masse kommen. Dieses Phänomen tritt bei 25 ° C oder 42 ° C nicht auf. Das flüssige Medium ist am besten in L- oder MH-Medium, das als EAEC verwendet werden kann. Vorläufige Identifizierungsmethode, die Bildung von Bakterien im Flüssigmedium-Test: Escherichia coli in MH-Flüssigmedium (Difco) beimpft, bei 35 ~ 37 ° C für 18 ~ 24 Stunden inkubiert, wobei die Oberfläche (partieller Sinkrohrboden) eine Masse bildete Es war positiv und negativ für einen gleichmäßig trüben sterilen Block. Im Jahr 1996 führten Wang Mei et al. Einen einfachen Screening-Test für den kohäsiven Darmklebstoff Escherichia coli durch und testeten die Bildung von Bakterien auf MH-Medium mit Hep-2. Ein Vergleich des Zelladhäsionstests ergab, dass die Übereinstimmungsrate der beiden 77% und 88,5% einschließlich diffus und lokalisiert betrug, was darauf hinweist, dass der Gerinnselbildungstest eine zuverlässige Methode für das vorläufige Screening von EAggEC ist.
Derzeit liegen keine relevanten Informationen vor.
Diagnose
Diagnose und Identifizierung von Escherichia coli Gastroenteritis
Diagnosekriterien
Inkubationszeit
Kurzfristig nur wenige Stunden, Escherichia coli Lebensmittelvergiftung, Erbrechen, Durchfall innerhalb von 2 Stunden, die allgemeine Inkubationszeit beträgt 1 bis 3 Tage.
2. Klinische Manifestationen
(1) Leichte Art: im Allgemeinen kein Fieber, Appetitverlust, Durchfall als Hauptleistung, 3 bis 6-mal täglicher Stuhlgang, oft gelber oder grüner verdauungsähnlicher loser Stuhlgang, meist gemischt mit einer kleinen Menge Schaumsuppe, Und begleitet von Blähungen, Bauchschmerzen und Übelkeit.
(2) Mittelgroß: Kann neben milden Symptomen und Übelkeit und Erbrechen auch niedriges Fieber haben, häufiger Durchfall, wässrigere Stühle, kann milde Dehydrations- und Azidose-Symptome haben.
(3) Schwere: Die Körpertemperatur ist unregelmäßig heiß, 38 ~ 40 ° C dauert mehrere Tage, Durchfall ist 10 ~ 20 Mal pro Tag, oft gelb-grün wässrigen Stuhl, mit einer kleinen Menge Schleim gemischt, kann Geruch haben, auch Milchfarbe zu sehen Oder Reissuppe-ähnlich wie Cholera, meist Übelkeit und Erbrechen, haben Säuglinge oft Krämpfe, aufgrund einer großen Anzahl von Erbrechen und Durchfall, die offensichtliche Symptome von Dehydration und Azidose zeigen, kann akutes Nierenversagen auftreten, etwa 30% der ETEG-Durchfall in Bangladesch Moderate oder schwere Dehydration, schwere Dehydration bei Erwachsenen, oft nicht von Cholera zu unterscheiden, wenn die Behandlung nicht rechtzeitig ist, Säuglinge und Kleinkinder können innerhalb weniger Tage sterben, EIEC-Durchfall ist ähnlich wie akute Ruhr, ist die Hauptsymptome der EHEC-Infektion Blutiger Stuhl und starke Bauchschmerzen, EAEC durch anhaltenden Durchfall (> 14 Tage), blutigen Stuhl, Fieber (38 ° C) und Erbrechen.
3. Dehydration und Elektrolytungleichgewicht
(1) Dehydration: Je nach Grad des Wasserverlusts im Körper kann in leichte, mittlere und schwere 3 Grad unterteilt werden. Die leichte Dehydration der Augenhöhle ist leicht gedrückt, und der Puls ist immer noch normal. Eine moderate Dehydration mit Ausnahme der Augenhöhle geht mit einem Mangel an Elastizität der Haut einher. Leicht zu greifen, Hautwiederherstellungszeit beträgt 2 ~ 5s, Fingerabdruckfalten, Pulsausfall, starke Dehydrierung, Zyanose, Hautkrämpfe sind nicht leicht zu beheben, Blutdruckabfälle, häufig Mikrozirkulationsstörungen, Muskelkrämpfe, schwacher Puls, weniger Urin oder Urin geschlossen.
(2) Azidose: Die Atmung ist offensichtlich vertieft, die CO2-Bindungskraft liegt unter 18 mmol / l, die Lippen sind kirschrot, und das Keton ist oft im Atem zu sehen. Die schweren Fälle haben Reizbarkeit, Lethargie, Koma, Krämpfe und sogar Schock. Die CO2-Bindungskapazität beträgt 11,25 mmol. / L unten.
(3) Hypokaliämie: Nach der Rehydratisierungsbehandlung wird das Phänomen der Blutkonzentration korrigiert, das Urinvolumen erhöht und die Ausscheidung von Kalium im Blut beschleunigt. Gleichzeitig wird bei der Synthese der Glucose das Kalium in die Zellen übertragen und das Serumkalium erniedrigt. Die Symptome von Kaliummangel, offensichtlichen Hypokaliämie-Symptomen, die mehr als eine Woche nach Durchfall auftreten, schwere Fälle von Weichteilen des Gaumens und sogar Atemmuskelparalyse, Arrhythmie und Koma können lebensbedrohlich sein.
(4) Hypokalzämie: tritt häufig nach einer Bluttransfusion oder nach einer Azidose-Korrektur auf, das Kind weint und ist unruhig, die Muskeln der Gliedmaßen sind angespannt, die Hände und Füße sind krampfartig und es treten Hyperreflexien auf.
Während der Epidemie sollten Säuglinge und Kleinkinder mit Durchfall zunächst Escherichia coli-Gastroenteritis in Betracht ziehen, eine erste Isolierungsbehandlung, und auf die Bestätigung der Diagnose durch die Erregeruntersuchung warten. In der nicht-epidemischen Phase, insbesondere in sporadischen Fällen, ist die Diagnose häufig nur klinisch schwierig. Muss mit Krankheitserregern kombiniert werden, serologische Untersuchung bestätigt.
Differentialdiagnose
Die Ursachen für Durchfall sind komplizierter, wie Bakterien, Viren, Parasiten usw. Einige Chemikalien können auch Durchfall verursachen.Escherichia coli enteritis sollte von den folgenden Krankheiten unterschieden werden.
Bakterielle Ruhr
Durch Shigella verursacht, Durchfall mit Eiter oder Schleim ist häufiger, weniger, und oft Dringlichkeit und Schwere, mehr Kälte und Hitze, Stuhl mikroskopische Untersuchung kann eine große Anzahl von Eiterzellen, roten Blutkörperchen und Phagozyten, Säuglingsvergiftungsbakterien finden Oder atypische bazilläre Ruhr sollte durch pathogene Diagnose identifiziert werden.
2. Vibrio cholerae
Nach einer Infektion tritt zuerst schwerer Durchfall auf und dann Erbrechen, selten Übelkeit, Erbrechen und Durchfall. Stühle sind reisartig wässrig, die Menge ist groß, keine Dringlichkeit und schwer, eine kleine Anzahl von Patienten hat eine kleine Menge blutiger Stühle, Dehydration verursacht oft Muskelschmerzen, Hautfalten, die Körperoberflächentemperatur ist niedriger als normal, mikroskopische Untersuchung kann extrem aktive Vibrio finden, sollte durch Bakterienkultur weiter identifiziert werden.
3. Vibrio parahaemolytische Lebensmittelvergiftung
Verursacht durch Vibrio parahaemolyticus, hauptsächlich durch den Verzehr von mit Bakterien kontaminierten Lebensmitteln (mehr mit Meeresfrüchten verwandt), das Auftreten von schnellen, zuerst mit Schüttelfrost, paroxysmalen Bauchschmerzen (Oberbauchkrämpfen), Erbrechen, Die meisten von ihnen sind wässrige Stühle oder blutige wässrige Stühle, meistens für die gleiche Mahlzeit, und sollten durch Bakterienkultur identifiziert werden.
4. Salmonellen-Lebensmittelvergiftung
Essen von Salmonella typhimurium-kontaminierten Lebensmitteln, akuter Ausbruch, häufig begleitet von Erkältung, Bauchschmerzen, Blähungen, Übelkeit, Erbrechen, Durchfall, wässrigem Stuhl und Gestank, frühzeitiger Bakteriämie, häufigeren Menschen Beginn, basierend auf Krankheitserregern, serologischer Diagnose und Identifizierung.
5. Viraler Durchfall
Durchfall durch Enterovirus-Infektion, gekennzeichnet durch hoch ansteckende Rotaviren, kleine runde Viren und andere Infektionen haben Erbrechen im Frühstadium, sukzessive Durchfälle, wässrigere Stühle und Schleim, meist im Herbst und Winter, andere Viren Durchfall ist im Sommer und Herbst häufiger, Übelkeit und Erbrechen, zusätzlich zu gastrointestinalen Symptomen, haben oft Atembeschwerden, Pharyngitis und Krämpfe, oft mit Beteiligung der Nackenmuskulatur, Rückenmuskulatur, Kinder im Alter von häufiger grünem wässrigem oder eiartigem Wasser Eine Antibiotikatherapie ist in der Regel ineffektiv, und der Krankheitsverlauf heilt sich nach 5 bis 7 Tagen von selbst. Sie wird ferner durch Serologie und Virusisolierung identifiziert.
6. Campylobacter enteritis
Campylobacter jejuni verursacht eine leichte und virale Enteritis und ist mit Colitis ulcerosa oder Morbus Crohn vergleichbar: Es hat Fieber, Durchfall oder schleimartigen Stuhl, Gestank, Gallenfarbe, schweren Eiter und blutigen Stuhl. Mehr als eine Woche der Genesung, Kinder haben oft Bauchkrämpfe, Krämpfe können auftreten, wenn hohes Fieber, die Inzidenz ist eher mit Kontakt mit Geflügel, Vieh oder Trinken von nicht sterilisierter Milch, Rohwasser, Dunkelfeld-mikroskopische Untersuchung kann die Biegung der bogenschießenähnlichen Wirkkraft finden Bakterien, Bakterienkultur zur weiteren Diagnose.
7. Yersinia enteritis
Häufiger bei Kindern, im Zusammenhang mit Nahrungsmitteln, Wasserverschmutzung, Bauchschmerzen, Durchfall, Unterkühlung, wässrigem Stuhl, kann Sepsis haben, kann durch knotige Erytheme, Pseudo-Appendizitis, Arthritis kompliziert sein, Bakterienkultur kann weiter identifiziert werden.
8. Andere
Bei der Stuhlmikroskopie sollte auf Durchfallerkrankungen geachtet werden, die durch Giardia, Amöbenruhr und Amöben oder Giardia verursacht werden.
