Escherichia coli zapalenie żołądka i jelit
Wprowadzenie
Wprowadzenie do zapalenia żołądka i jelit Escherichia coli Enterobacteriaceae obejmuje dużą grupę pałeczek Gram-ujemnych o podobnych cechach biologicznych, z których większość znajduje się w jelitach ludzi i zwierząt. Niektóre z nich mają oczywisty patogenny wpływ na ludzi. Gdy zmienia się stan gospodarza lub bakterie dostają się do jelit. Poza przewodem normalna flora jelitowa może również powodować różne choroby jako warunkowy patogen. Podstawowa wiedza Odsetek chorób: 30% Wrażliwi ludzie: brak konkretnych ludzi Tryb infekcji: rozprzestrzenianie się przewodu pokarmowego Powikłania: biegunka, odwodnienie
Patogen
Przyczyny zapalenia żołądka i jelit Escherichia coli
(1) Przyczyny choroby
Ten szczep jest bakterią Gram-ujemną, jego wielkość wynosi (1,1 ~ 1,5) μm × (2,0 ~ 6,0) μm (żywe bakterie) lub (0,4 ~ 0,7) μm × (1,0 ~ 3,0) μm (bakterie barwiące), większość szczepów ma całe ciało Wici, mogą się poruszać, są pilony na całym ciele, brak zarodników, niektóre szczepy mają otoczki, pili znajdują się na powierzchni bakterii, włókniste przywiązania, są hydrofobowymi składnikami białkowymi, mają dobrą antygenowość, mogą stymulować organizm do produkcji odpowiednich Przeciwciało jest fakultatywną bakterią beztlenową, która może rozwijać się w temperaturze od 15 do 45 ° C. Optymalna temperatura wzrostu wynosi 37 ° C, a optymalne pH wynosi od 7,4 do 7,6 W pożywce do selekcji bakterii jelitowych może fermentować laktozę z wytworzeniem cukru. Wskaźnik odbarwia się, tworząc kolorowe kolonie, podczas gdy większość patogennych bakterii w Enterobacteriaceae nie rozkłada laktozy, a kolonie są bezbarwne, co ma selektywny wpływ na izolację bakterii chorobotwórczych Enterobacteriaceae, fermentującą glukozę, laktozę, maltozę, mannitol. Różne alkohole cukrowe wytwarzają kwas do produkcji gazu; w przypadku sacharozy, dulcitolu, rafinozy, ramnozy itp. Różnią się w zależności od szczepu, test IMVC to -, ureaza, fenyloalanina, malonian i inny negatywny antygen Struktura jest bardziej skomplikowana, składa się głównie z trzech rodzajów antygenów: O, H i K. Antygen O jest żaroodpornym kompleksem polisacharydowo-fosfolipidowym. Wcześniej jest 171 gatunków, co stanowi podstawę serotypowania; antygen H jest białkiem nietrwałym termicznie, a do tej pory ustalono 56 antygenów; antygen K jest antygenem otoczkowym i do tej pory znanych jest 100 gatunków. Przeżycie przez tygodnie lub miesiące, przeżycie w kale w niższej temperaturze, podatne na lekooporność, pojawienie się lekooporności, głównie uzyskane przez dostarczenie plazmidów z czynnikiem oporności na lek (czynnik R).
(dwa) patogeneza
1. Inwazyjność: Escherichia coli ma antygen K i pili, antygen K ma antyfagocytozę i ma działanie oporne na dopełniacz i przeciwciało; pili może pomóc w adhezji bakteryjnej, wytwarzając rzęski toksycznej Escherichia coli Bakteria nazywa się czynnikiem kolonizacyjnym lub czynnikiem kolonizacyjnym, w tym CFAI, CFAII. Są one kontrolowane przez plazmidy bakteryjne i mogą być przenoszone do innych szczepów przez plazmidy. Są wysoce antygenowe i mogą stymulować gospodarza do wytwarzania specyficznych przeciwciał i inwazyjności. Szczep może zaatakować powierzchnię błony śluzowej jelit, powodując stan zapalny.
2. Enterotoksyna: Etooksyna uwalniana podczas procesu wzrostu i rozmnażania nazywa się enterotoksyną Escherichia coli, zgodnie z jej stabilnością cieplną: termostabilna enterotoksyna (ST), kiełbasa żaroodporna Toksyna (termolabilny enterotoksir, LT), zarówno ST, jak i LT, są kodowane przez pozachromosomalne plazmidy z materiału genetycznego, które kontrolują syntezę, a niektóre szczepy EFEC wytwarzają substancje cytotoksyczne.
(1) Nietrwała termicznie enterotoksyna (LT): Enterotoksyna podobna do Vibrio cholerae, może stymulować cyklazę adenozynową w komórkach nabłonkowych jelit, przekształcać ATP w cAMP, promować nadmierne wydzielanie płynu jelitowego i przekraczać zdolność resorpcji jelitowej. W wyniku biegunki odporna na ciepło enterotoksyna (ST) powoduje wzrost ilości wewnątrzkomórkowego cGMP poprzez aktywację cyklazy guanylowej na komórkach, co powoduje zaburzenia równowagi płynów i biegunkę.
(2) Endotoksyna: Ściana komórkowa Escherichia coli ma aktywność endotoksyny, a jej toksycznym miejscem jest lipid A; O-specyficzny polisacharyd przyczynia się do funkcji obronnej bakterii przed gospodarzem.
3. Adhezyna: Adhezyna (BFP), wcześniej znana jako patogenny czynnik adhezji Escherichia coli (EAF), jest pili kodowanym przez duży plazmid bakterii, który jest ściśle związany z adhezją. Adhezja za pośrednictwem BFP jest adhezją lokalną. Bakterie nie są równomiernie rozmieszczone na powierzchni komórki, ale skupiska lub mikrokolonie są obecne na komórkach. Jednocześnie adhezja jest adhezją długoterminową, a komórki bakteryjne nie są bezpośrednio związane z komórkami. Kontakt, oba są połączone przez pili.
4. Żeń-szeń: Żeń-szeń, wcześniej znany jako białko EAE, jest niewielkim białkiem błony zewnętrznej enteropatogennego Escherichia coli o masie cząsteczkowej 94 kD i wysokości regionu N-końcowego inwazji Yersinia. Homologia polega na tym, że gen kodujący eae A znajduje się na chromosomie komórki, a podobną strukturę eae A znaleziono niedawno w krwotocznym Escherichia coli.
Compactin jest główną podstawą materiałową dla ścisłej adhezji i inwazji Escherichia coli na komórki gospodarza, a gdy wiąże się z odpowiednimi receptorami na błonie komórki gospodarza, powoduje wzrost stężenia wewnątrzkomórkowego Ca2 i fosforylację białek. Rusztowanie jest przestawiane w celu utworzenia gęstej fibrylarnej podkładki aktynowej przy adhezji bakteryjnej, dzięki czemu bakterie mogą zaatakować komórki. W tym czasie zainfekowane komórki wyglądają jak szczotki i tracą mikrokosmki.
5. rodzina genów genu Ee: Tnpho A wstawiono do mutacji indukowanych EPEC zawierających plazmid. W rezultacie stwierdzono, że 22 szczepy są nieinwazyjne w 329 szczepach, a 5 szczepów Tnpho A wstawiono do genu eae A chromosomu, wykazując inwazyjność i szczelność. Dołączone, ściśle związane z wytwarzaniem zagęszczenia, kolejne 2 szczepy Tnpho A wstawione pod eaeA, utraciły zdolność przylegania do komórek nabłonkowych, ale nadal wytwarzają zagęszczenie, co wskazuje, że w EPEC istnieje klaster genów eae, Gen pod eae A nazywa się eae B.
Poprzez badania genetyczne w połączeniu z wyżej wymienionymi czynnikami chorobotwórczymi Donnenberg zaproponował, że patogeneza EPEC jest podzielona na trzy fazy: w pierwszej fazie pośredniczy BFP kodowany przez bfp A na plazmidzie EAF, umożliwiając bakteriom przyleganie do siebie i przyleganie do mikrokosmków. Plazmidy i loci chromosomalne prowadzą do początkowej miejscowej adhezji, konwersji sygnału inicjacji genu chromosomalnego fazy 2, co skutkuje fosforylacją białka tyrozyny, zwiększonym wewnątrzkomórkowym stężeniem wapnia, wczesnym zniszczeniem rusztowania komórkowego, zmianami mikrokosmków i wydzielaniem płynów, trzeci Wraz z postępem infekcji następuje aktywacja klastra genów eae, a wytworzony napięty hormon powoduje, że bakterie przylegają do błony komórkowej nabłonka, co powoduje zniszczenie rusztowania komórkowego i przyleganie bakterii do aktyny dolnej, miozyny itp., A część bakterii atakuje nabłonek. Komórki
Zapobieganie
Zapobieganie zapaleniu żołądka i jelit Escherichia coli
1. Zarządzaj źródłem infekcji
(1) Wczesne wykrywanie: poprzez samodzielne zgłaszanie się, wzajemne zgłaszanie się, ambulatoryjne, całodobowe itp., Wczesne wykrywanie pacjentów, miejsca wystąpienia epidemii, szczególny nacisk na obserwację medyczną personelu zarządzającego, personelu zaopatrzenia w wodę, sprzedawców przetwórstwa spożywczego i personelu konserwującego Często rozumiem sytuację kału, jeśli to konieczne, wykonuj badanie kału, w odpowiednim czasie odkrywaj pacjentów i nosicieli patogenów, regularnie kontroluj pacjentów wypisywanych ze szpitala, rozumiesz kał, z objawami i oznakami lub bez, w porę wykrywając nawracających i przewlekłych pacjentów.
(2) Izolacja i leczenie: biegunka spowodowana przez pacjenta lub nosiciela jako źródło zakażenia, pacjent powinien zostać natychmiast wysłany do szpitala w celu izolacji jelit, leczenie, leczenie powinno być na czas, dokładne i musi zostać wyleczone przed wypisem, w okresie izolacji Pacjenci powinni wzmocnić edukację zdrowotną i zarządzanie, powinni przestrzegać różnych przepisów, świadomie zwracać uwagę, aby nie kontaktować się ze zdrowymi ludźmi i nie wyrzucać odchodów od niechcenia, aby zapobiec zanieczyszczeniu środowiska.
2. Odetnij trasę transmisji
(1) Wykonaj dobrą pracę w zakresie urządzeń sanitarnych: służba zdrowia powinna regularnie sprawdzać jakość wody i działanie dezynfekujące, a zdecentralizowane źródło wody powinno wybrać źródło wody. Wody pitnej (w tym wody do domu, wody do prania) należy dezynfekować. W przypadku stosowania środka dezynfekującego chlor, Zwróć uwagę na efektywną zawartość chloru, a pozostały chlor powinien być utrzymywany na poziomie 0,2 ~ 0,3 mg / l.
(2) Zarządzaj dobrą higieną żywności:
1 Częste zapytania i badania fizykalne sprawców wykazały, że podejrzani pacjenci natychmiast wysyłani do szpitala na badanie i leczenie, kierownictwo personelu przed posiłkami i przed posiłkami (w tym przed gotowaniem) powinno nalegać na mycie rąk, noszenie odzieży roboczej w pracy, utrzymywanie czystości, przetokę Personel, personel gastronomiczny i pracownicy opieki nad dziećmi powinni opuścić swoją pracę natychmiast po zachorowaniu i poczekać, aż zostaną całkowicie przywróceni przed powrotem do pracy.
2 Wdróż system dzielenia się posiłkami, umyj naczynia w wodzie, trzymaj naczynia w pałeczkach i sterylizuj zwykłą zastawę stołową. Resztki jedzenia powinny zostać całkowicie podgrzane przed jedzeniem. Nie jedz zimnych warzyw i surowych lub półtrwania posiłków. Nie kupuj, nie, nie rób Jedz spleśniały pokarm, surowe noże, talerze i pojemniki należy oddzielić.
(3) Chwyć gospodarkę obornikiem: obornik, śmieci, ścieki powinny być traktowane w nieszkodliwy sposób, toalety, kojce dla zwierząt, wysypiska śmieci itp., Powinny być zarządzane przez specjalną osobę, codziennie czyszczone i myte, utrzymuj czyste, bez much.
(4) Wykonuj dobrą robotę w zakresie warunków sanitarnych: Zawsze myj i usuwaj śmieci. Drzwi i okna (w tym drzwi toaletowe i okna) powinny mieć dobry sprzęt przeciw owadom. Podczas much należy regularnie spryskiwać lekami, aby wyeliminować muchy.
(5) Zwróć uwagę na higienę osobistą: Poprzez edukację zdrowotną rozwijaj dobre nawyki higieniczne, nie pij surowej wody, nie jedz nieczystych owoców i zimnych potraw oraz nalegaj na mycie rąk wodą przed i po posiłkach.
(6) Wykonuj dobrą robotę w zakresie ochrony medycznej: Noś rękawice podczas obchodzenia się z wydalinami i wymiotami pacjenta, nakładaj mydło po kontakcie z pacjentem i przed posiłkiem, dokładnie umyj ręce bieżącą wodą i podejmij natychmiastowe środki zapobiegawcze dla bliskich kontaktów.
3. Chroń wrażliwe populacje
Wzmocnij ćwiczenia fizyczne, zwracaj uwagę na pracę i odpoczynek, zwracaj uwagę na dietę, higienę wody pitnej i higienę osobistą W zależności od sytuacji epidemiologicznej w tym czasie wybierz odpowiednie szczepionki, zapobieganie szczepieniom dla najważniejszych populacji, czas wojny, ratownictwo i pomoc w przypadku katastrof oraz rozważ podjęcie odpowiedniej profilaktyki narkotykowej w nagłych przypadkach. .
4. Wykonaj dobre badanie epidemiologiczne dotyczące zdrowia
(1) Badanie epidemiologiczne obszarów epidemicznych: Zrób dobre badanie przypadku, dowiedz się, jakie jest źródło zakażenia i możliwe warunki przenoszenia, podejmij środki zapobiegawcze, aby zapobiec rozprzestrzenianiu się choroby, i zorganizuj personel w celu przeprowadzenia badań epidemiologicznych w przypadku wystąpienia biegunki. Popularne przyczyny i czynniki epidemiczne, podejmuj skuteczne środki w celu kontroli epidemii.
(2) Zarządzanie kontaktami: ci, którzy pozostają w bliskim kontakcie z życiem, powinni zostać poddani kwarantannie, aby zrozumieć sytuację zdrowotną, szczególnie w celu zapobiegania zanieczyszczeniu źródeł wody.
(3) Ekspedycja i leki zapobiegawcze: Cały personel w miejscu epidemii będzie badany raz dziennie od daty rozpoczęcia leczenia. W drugim dniu z rzędu należy zebrać pierwsze plony przed zażyciem leku. W celu zapobiegania można przyjmować następujące leki:
A. Związek sulfametoksazol: 2 razy / d na osobę, 2 tabletki za każdym razem, a nawet podawany przez 3 dni.
B. Doksycyklina: Pierwsza dawka dla osoby dorosłej wynosi 0,2 g, a za każdym razem 0,1 g, raz / d, a nawet podawana przez 3 dni.
C. Tetracyklina: Dorosły 0,5 g, raz na 6 godzin, a nawet podawany przez 3 dni.
D. Furazolidon: 2 razy / d, raz 0,2 g, a nawet podawany przez 3 dni.
Dzienna ilość dzieci jest obliczana wagowo: związek sulfametoksazol 25 mg, furazolidon 10 mg i doksycyklina 6 mg.
Powikłanie
Powikłania zapalenia żołądka i jelit Escherichia coli Powikłania, biegunka, odwodnienie
Nudności i wymioty, częstość biegunki są częstsze, bardziej wodniste stolce, z powodu dużej liczby wymiotów i biegunki wykazujących oczywiste objawy odwodnienia i kwasicy, może wystąpić ostra niewydolność nerek, jeśli leczenie nie nastąpi w odpowiednim czasie, niemowlęta i małe dzieci mogą umrzeć w ciągu kilku dni.
Objaw
Escherichia coli objawy ze strony przewodu pokarmowego częste objawy biegunka jest wodnista z lepkim ... wzdęciem hipokaliemia drgawki hipotermia śpiączka nudności nieregularna gorączka 绀 hipokaliemia
Ze względu na zjadliwość między różnymi typami Escherichia coli, różne warunki inwazyjne i różnicę w oporności ciała, objawy kliniczne również są niespójne.
Jednym z nich jest to, że bakterie przyczepiają się do błony śluzowej jelit tylko po to, aby rosnąć i wytwarzać enterotoksynę. Poprzez aktywację cyklazy adenylowej komórek ściany jelitowej, gdy poziom wewnątrzkomórkowego cyklicznego monofosforanu adenozyny (cAMP) jest podwyższony, może promować wydzielanie jelitowe. (LT), a wydzielanie płynu jelitowego spowodowane przez toksynę ST jest pośredniczone przez cyklizowaną guanozynę (cGMP), a enterotoksyna może również uszkadzać nabłonek obwodowych naczyń krwionośnych, powodować biegunkę i rozładowywać dużą ilość wodnistego stolca (klinicznie podobna do choroby przypominającej cholerę). Innym typem jest to, że bakterie mogą atakować komórki nabłonkowe błony śluzowej jelita, namnażać się i wytwarzać toksyczne substancje, powodując przelewanie się sieci płynu do światła jelita, a na koniec pękanie komórek nabłonka, co prowadzi do martwicy i owrzodzenia błony śluzowej jelit oraz stolca z ropą (Kliniczne podobne do choroby czerwonkowej), głównymi zmianami są głównie jelito kręte.
Zbadać
Badanie zapalenia żołądka i jelit Escherichia coli
1. Zbierz próbki
Użyj sterylnego bawełnianego wacika, aby wziąć kał pacjentów z biegunką. Jeśli nie ma kału, włóż odbyt nasączony buforem fosforanowym do odbytu 4-6 cm (niemowlęta 2 do 3 cm) i obróć powierzchnię odbytnicy w odbytnicy. Po usunięciu śluzu jest on zawarty w roztworze transportowym lub konserwującym Jeśli nie można go wysłać na czas, próbkę należy przechowywać w temperaturze 4 ° C, ale nie dłużej niż 8 godzin.
2. Kultura wzbogacania i izolacji
Do izolacji Escherichia coli w początkowej separacji należy zastosować słabą pożywkę selektywną, taką jak błękit eozyny z błękitem metylenowym, płytka maikankai z chińskiej niebieskiej róży z sorbitolem, separacja pasm, hodowana w temperaturze 35–37 ° C przez 18–24 godzin. Obserwuj cechy morfologiczne kolonii, wybierz purpurowy lub ciemnoczerwony, rozmiar wynosi 1 ~ 3 mm, krawędzie są czyste i błyszczące, a pojedyncza kolonia centralnego wybrzuszenia jest zidentyfikowana.
3. Identyfikacja
(1) Wstępna identyfikacja: zgodnie z charakterystyką kolonii, rozmazanym bakteryjnie kształtem i reakcją barwienia, czyste bakterie hodowlane pobrano do reakcji biochemicznej, a odpowiadające wyniki początkowo zidentyfikowano jako Escherichia coli.
(2) Ostateczna identyfikacja: W celu przeprowadzenia powyższej wstępnej identyfikacji można zastosować ogólny rutynowy test. W razie potrzeby ostateczną identyfikację można przeprowadzić zgodnie z reakcją biochemiczną wymienioną w Podręczniku bakteriologii Berger System.
(3) Test identyfikacyjny: niektóre Escherichia coli, zwłaszcza niezasilone niesfermentowane ekstrakty mleczne, należy odróżnić od Shigella .. Główne testy identyfikacyjne tych dwóch substancji można badać za pomocą octanu sodu i glukonianu amonu oraz stosowania kwasu śluzowego. W trzech testach produkcji kwasu solnego Escherichia coli była dodatnia, a Shigella ujemna.
1 chorobotwórcze Escherichia coli:
A. Test hipotetyczny: wybierz kulturę na płytce identyfikacyjnej, na której kolonia gęsto rośnie, i użyj trzech rodzajów wielowartościowej surowicy O z EPEC do testu aglutynacji szkiełka, takich jak aglutynacja z pewną multiwalentną surowicą O, a następnie z surowicą wielowartościową. Zawarta O monowalentna surowica jest badana, na przykład aglutynowana z pewną O monowalentną surowicą, a następnie zbierane jest od 3 do 5 pojedynczych kolonii, a surowica jest poddawana testowi aglutynacji.
B. Test biochemiczny: wybierz kolonię z silną aglutynacją O monowalentnej surowicy, aby zaszczepić agar trisacharydowy, zawiesić papier testowy matrycy plwociny i hodować w 36 ° C na 18-20 godzin, wszystkie laktozy, kwasu sacharozowego, produkcji kwasu glukozowego i większości produkcji gazu, H2S negatywne Szczep dodatni do plwociny można potwierdzić jako Escherichia coli. Jeśli matryca plwociny jest ujemna, test VP musi być ujemny i nie może rosnąć na agarze cytrynianowym w celu potwierdzenia Escherichia coli.
C. Test potwierdzający serologię: zeskrob hodowlę na agarze trisacharydowym z żelaza, przygotuj zawiesinę bakteryjną za pomocą soli fizjologicznej i rozcieńcz do stężenia równoważnego probówce zmętnienia MacFarlanda nr 3. Jeśli pierwotne miano wynosi 1: (160 ~ 320), można rozcieńczać 1:40 (0,5% roztworem soli), w probówce 10 mm × 75 mm rozcieńczoną surowicę odpornościową i zawiesinę bakteryjną miesza się w równych ilościach, po obserwacji w temperaturze wody 50,6 ° C przez 16 godzin, jeżeli Występuje agregacja, którą można potwierdzić jako czynnik O.
2 Krwotoczne Escherichia coli: znane jako stolec u pacjentów z krwotocznym zapaleniem jelit, można posmarować sorbitolem zamiast laktozy na płytce agarowej MacConkey, po hodowli wybierz 3 do 5 kolonii niefermentowanych sorbitolu, Surowicę O157 (najlepiej jednocześnie z surowicą H7) zastosowano do testu aglutynacji poślizgowej i testu aglutynacji z pojedynczą rurką w celu ustalenia diagnozy.
Wyizolowany szczep należy zaszczepić agarem trisacharydowym z żelazem, zawieszonym papierem testowym z plwociną, hodować w 36 ° C przez 18 ~ 20 godzin, typowymi cechami biochemicznymi są laktoza, produkcja kwasu sacharozowego, gaz do produkcji kwasu glukozowego, H2S ujemny, pozytywna matryca plwociny i inokulacja Probówka do fermentacji sorbitolu jest powolną fermentacją.
3 toksyczne Escherichia coli:
A. Test biochemiczny: wybierz 5 koagulujących kolonii na płytce identyfikacyjnej, ogólnie wybierz typowe kolonie fermentacji laktozy, zaszczep agar z trisacharydem żelaza, zawieś bibułę testową matrycy plwociny i hoduj w 36 ° C przez 18-20 godzin, całą laktozę, Sacharoza wytwarza kwas, glukoza wytwarza kwas i wytwarza więcej gazu. Szczepy H2S-ujemne, plwociny-dodatnie można potwierdzić jako Escherichia coli. Jeśli matryca plwociny jest ujemna, test VP musi być ujemny i nie może być w cytrynianie. Wzrost na agarze można potwierdzić jako Escherichia coli.
B. Test enterotoksyny: toksyczny Escherichia coli jest głównie potwierdzony testem enterotoksyny. Istnieje wiele metod testu enterotoksyny. Obecnie LT mierzy się dwufazowym testem dyfuzyjnym na agarze, a ST mierzy się testem ssania u ssących myszy. Króliki podwiązano do odcinka jelita krętego w celu określenia LT i ST.
Dwie enterotoksyny zostały określone na podstawie diagnozy genetycznej.
a. Dwukierunkowy test dyfuzji na agarze: Badane szczepy zaszczepiono na pożywce Elek w okrągłej pętli w 5 punktach, i dwie części przygotowano w ten sam sposób i hodowano w 36 ° C przez 48 godzin, a polimyksę umieszczono na trawniku każdego szczepu. B-papier, w 6 ° C przez 5 ~ 6h, toksynę jelitową do agaru, w środku 5 mm od trawnika, wykop otwór o średnicy 4 mm i użyj kropli dna agaru, dodaj antytoksynę LT do otworu 30 μl i jako szczepy kontrolne zastosowano znane szczepy LT i nietoksygenne. Hodowlę obserwowano w 36 ° C przez 15-20 h. Biały osad był dodatni między płytką a studzienką antytoksyny, w przeciwnym razie był ujemny.
b. Test zaszczepienia ssących myszy: Badane szczepy zaszczepiono toksynowym bulionem Hondy, hodowano w 36 ° C przez 24 godziny, wirowano przy 3000 r / min przez 30 minut, a supernatant przesączono przez filtr membranowy, ogrzewano w 60 ° C przez 30 minut i przesącz na ml. Dodaj 0,02 ml 2% roztworu błękitu Evansa, wstrzyknij 0,1 ml żołądka szczura karmionego piersią od 1 do 4 dnia za pomocą plastikowych rurek, zaszczepiaj 3 ~ 4 w tym samym czasie, przymocuj przez 3 ~ 4 h, następnie znieczul za pomocą chloroformu, wyjmij wszystko Rurka jelitowa, ważąca masę jelita (w tym wysięk) i pozostałą masę ciała, stosunek masy jelit do masy resztkowej jest większy niż 0,09, dodatni, 0,07 ~ 0,09 jest podejrzany.
c. Podwiązanie królika i test jelita krętego: Badany szczep zaszczepiono w bulionie toksogennym Hondy, hodowano w 36 ° C przez 24 godziny, wirowano przy 3000 r / min przez 30 minut, a supernatant przesączono przez filtr membranowy. Filtrat podzielono na dwie porcje, jedna nie Ogrzewanie, do badania LT; kolejne ogrzewanie w 60 ° C przez 30 min, do testu ST, weź 2 kg królików, pość przez 1 dzień, laparotomia po znieczuleniu, usuń odcinek jelita krętego, zgodnie z 10 ~ 15 cm dla odcinka, podwiązanie segmentowe, Weź 2 ml jednego bulionu iniekcyjnego jako kontrolę negatywną, a kolejne 2 ml filtratu znanej hodowli bulionu produkującego toksyny jako kontrolę pozytywną i wstrzyknij pozostałe 2 ml filtratu kultury bulionowej szczepu testowego do innych części i zszyj ścianę brzucha. W ST wykonano laparotomię 6 do 8 godzin po iniekcji; gdy zmierzono LT, laparotomię wykonano 18 godzin po iniekcji i pobrano filtrat w każdym segmencie jelita, zmierzono objętość i zmierzono długość odcinka jelita, ilość płynu (ml) i jelita. Stosunek długości odcinka (cm) jest większy niż 1, aby być dodatnim.
d. Test serologiczny: Pozytywny test na enterotoksynę można wykorzystać do określenia antygenu O za pomocą wielowartościowej surowicy O związanej z ETEC i surowicy monowalentnej do testu aglutynacji poślizgowej.
4 inwazyjne Escherichia coli:
A. Test biochemiczny: na płytce identyfikacyjnej należy zebrać od 3 do 5 kolonii Zasadniczo należy pobrać więcej kolonii niefermentowanej laktozy podobnej do Shigelli, ale dominujące kolonie fermentowanej laktozy można również wybrać prawidłowo i zostaną one zebrane. Kolonie zaszczepia się półstałymi probówkami i hoduje w temperaturze 36 ° C przez 18–24 h. Szczepy ruchliwości można zasadniczo odrzucić, chyba że identyfikacja serologiczna wynosi 0124, pozostawiając niezasilony szczep, zaszczepiony agarem trisacharydowo-żelazowym, wiszący papier testowy z plwociną 36 Hodowane w 18 ° C przez 18-20 godzin i testowane na dekarboksylazę lizynową Typowe cechy biochemiczne EIEC to: laktoza, sacharoza nie wytwarza kwasu lub kwasu, glukoza wytwarza kwas, wytwarza gaz lub nie wytwarza gazu, H2S jest ujemny, a matryca plwociny jest dodatnia. Dekarboksylaza lizynowa jest ujemna i nie ma ruchliwości z wyjątkiem O124. Test dekarboksylacji lizyny można również wykonać po teście serologicznym.
B. Test serologiczny: Pobrano kulturę agaru z trisacharydem żelaza i zastosowano dwie wielowartościowe O surowicy EIEC do testu aglutynacji poślizgowej w celu ustalenia składu antygenu O.
C. Test rogówki świnki morskiej: Bakterie wkroplono do oczu świnek morskich na 2 do 5 dni, aby sprawdzić, czy występuje zaczerwienienie, łzawienie i przekrwienie.
D. Test ELISA: króliki immunizowano toksycznymi szczepami znanego EIEC lub Shigella, a uzyskane surowice odpornościowe zostały zaabsorbowane przez homologiczny, niezjadliwy szczep i określone za pomocą ELISA, toksycznych szczepów i Shigella Wszystkie rodzaje toksycznych szczepów są dodatnie. Metodę tę stosuje się do wykrywania inwazyjnego polipeptydu badanych bakterii i można ją również wykryć metodą sondy genowej.
5 Stężony Escherichia coli: Ważną cechą skoncentrowanego Escherichia coli (EAEC) jest tworzenie charakterystycznej adhezji agregatów wokół komórek Hap-2, a Yamamoto stwierdził tę adhezję agregacji EAEC w 37 ° C. Może występować na powierzchni wzrostu niektórych płynnych pożywek, tworząc gęstą przylegającą aglomerowaną masę Zjawisko to nie występuje w temperaturze 25 ° C lub 42 ° C. Płynne środowisko jest najlepsze w pożywce L lub MH, którą można zastosować jako EAEC. Wstępna metoda identyfikacji, tworzenie bakterii w teście w płynnym ośrodku: Escherichia coli inokulowane w płynnym podłożu MH (Difco), inkubowane w 35 ~ 37 ° C przez 18 ~ 24 godzin, gdzie powierzchnia (częściowe dno rurki tonącej) tworzyła masę Wynik był dodatni i ujemny dla równomiernie mętnego sterylnego bloku W 1996 r. Wang Mei i wsp. Przeprowadzili prosty test przesiewowy na spoistej spoistej spoinie klejowej Escherichia coli i przetestowali tworzenie bakterii na pożywce MH za pomocą Hep-2. Porównanie testu adhezji komórek wykazało, że współczynnik zgodności obu wynosił 77%, a 88,5%, w tym rozproszony i zlokalizowany, wskazując, że test tworzenia skrzepu jest wiarygodną metodą wstępnego badania przesiewowego EAggEC.
Obecnie nie ma istotnych informacji.
Diagnoza
Diagnoza i identyfikacja zapalenia żołądka i jelit Escherichia coli
Kryteria diagnostyczne
Okres inkubacji
Krótkotrwale tylko kilka godzin, zatrucie pokarmowe Escherichia coli, wymioty, biegunka w ciągu 2 godzin, ogólny okres inkubacji wynosi od 1 do 3 dni.
2. Objawy kliniczne
(1) Rodzaj światła: ogólnie bez gorączki, utrata apetytu, biegunka jako główny występ, codzienny stolec 3 do 6 razy, często żółte lub zielone luźne stolce przypominające niestrawność, przeważnie zmieszane z niewielką ilością pianki, I towarzyszy temu wzdęcie brzucha, ból brzucha i nudności.
(2) średniej wielkości: oprócz łagodnych objawów i nudności i wymiotów może mieć niską gorączkę, częstą biegunkę, bardziej wodniste stolce, łagodne objawy odwodnienia i kwasicy.
(3) Ciężki: temperatura ciała jest nieregularnie wysoka, 38 ~ 40 ° C utrzymuje się przez kilka dni, biegunka jest 10 ~ 20 razy dziennie, często żółto-zielony wodnisty stolec, zmieszany z niewielką ilością śluzu, może mieć zapach, zobacz także kolor mleka Lub podobny do zupy ryżowej, podobny do cholery, głównie nudności i wymiotów, niemowlęta często mają drgawki z powodu dużej liczby wymiotów i biegunki wykazujących oczywiste objawy odwodnienia i kwasicy, może wystąpić ostra niewydolność nerek, około 30% biegunki ETEG w Bangladeszu Umiarkowane lub ciężkie odwodnienie, ciężkie odwodnienie u dorosłych, często nie można odróżnić od cholery, jeśli leczenie nie nastąpi w odpowiednim czasie, niemowlęta i małe dzieci mogą umrzeć w ciągu kilku dni, biegunka EIEC jest podobna do ostrej czerwonki, główne objawy zakażenia EHEC to Krwawe stolce i silny ból brzucha, EAEC spowodowane uporczywą biegunką (> 14 dni), krwawe stolce, gorączka (38 ° C) i wymioty.
3. Odwodnienie i zaburzenia równowagi elektrolitowej
(1) Odwodnienie: W zależności od stopnia utraty wody w organizmie, można go podzielić na lekkie, średnie i ciężkie 3 stopnie. Łagodne odwodnienie oczodołu jest lekko obniżone, a puls nadal normalny; umiarkowane odwodnienie z wyjątkiem oczodołu, depresji przedniej towarzyszy brak elastyczności skóry. Łatwy do złapania, czas regeneracji skóry wynosi 2 ~ 5s, zmarszczki linii papilarnych, rozpad pulsu; ciężkie odwodnienie, sinica, chwytanie skóry nie jest łatwe do odzyskania, spadki ciśnienia krwi, często zaburzenia mikrokrążenia, skurcz mięśni, słaby puls, mniej moczu lub Mocz zamknięty.
(2) Kwasica: oddychanie jest wyraźnie pogłębione, siła wiązania CO2 jest mniejsza niż 18 mmoli / l, usta są wiśniowo czerwone, a keton jest często widoczny w oddechu. Poważne przypadki mają drażliwość, letarg, śpiączkę, konwulsje, a nawet szok. Zdolność wiązania CO2 wynosi 11,25 mmola. / L poniżej.
(3) hipokaliemia: po zabiegu nawodnienia koryguje się zjawisko koncentracji krwi, zwiększa się objętość moczu i przyspiesza wydalanie potasu we krwi. Jednocześnie, gdy syntetyzowana jest glukoza, potas jest przenoszony do komórek, a stężenie potasu w surowicy jest obniżane. Objawy niedoboru potasu, oczywiste objawy hipokaliemii pojawiają się ponad tydzień po biegunce, ciężkie przypadki podniebienia miękkiego, a nawet porażenie mięśni oddechowych, arytmia, śpiączka, mogą zagrażać życiu.
(4) Hipokalcemia: często występuje po transfuzji krwi lub korekcji kwasicy, dziecko płacze i niespokojne, mięśnie kończyn są napięte, drgawki dłoni i stóp, drgawki i hiperrefleksja.
W okresie epidemii niemowlęta i małe dzieci z biegunką powinny najpierw rozważyć zapalenie żołądka i jelit Escherichia coli, pierwsze leczenie izolacyjne, czekając na badanie patogenów w celu potwierdzenia diagnozy. W okresie nie epidemicznym, szczególnie sporadycznym, często trudno jest zdiagnozować wyłącznie klinicznie. Należy połączyć z patogenami, potwierdzone badanie serologiczne.
Diagnostyka różnicowa
Przyczyny biegunki są bardziej skomplikowane, takie jak bakterie, wirusy, pasożyty itp. Niektóre substancje chemiczne mogą również powodować biegunkę. Zapalenie jelit Escherichia coli należy odróżnić od następujących chorób.
Czerwonka bakteryjna
Z powodu Shigelli biegunka z ropą lub śluzem jest bardziej powszechna, rzadziej, a często pilniejsza i cięższa, bardziej zimna i gorąca, badanie mikroskopowe kału może wykryć dużą liczbę komórek ropy, krwinek czerwonych i komórek fagocytujących, bakterie zatrujące niemowlęta Lub atypowa bakteryjna czerwonka powinna zostać zidentyfikowana na podstawie diagnozy patogennej.
2. Vibrio cholerae
Po wywołaniu infekcji najpierw pojawia się ciężka biegunka, a następnie wymioty, rzadko nudności, wymioty i biegunka stolce są wodniste jak ryż, ilość jest duża, nie jest pilna i ciężka, niewielka liczba pacjentów ma niewielką ilość krwawych stolców, odwodnienie często powoduje ból mięśni, zmarszczki skóry瘪, temperatura powierzchni ciała jest niższa niż normalnie, badanie mikroskopowe może wykryć niezwykle aktywny Vibrio, który powinien być dalej identyfikowany przez hodowlę bakteryjną.
3. Vibrio parahaemolityczne zatrucie pokarmowe
Spowodowane przez Vibrio parahaemolyticus, głównie z powodu jedzenia żywności skażonej przez bakterie (bardziej związane z owocami morza), pojawienie się szybkiego, najpierw z dreszczy, napadowego bólu brzucha (skurcze górnej części brzucha), biegunka wymiotująca, Większość z nich to wodniste stolce lub krwawe wodne stolce, głównie do tego samego posiłku, i powinny być identyfikowane przez kulturę bakteryjną.
4. Zatrucie pokarmowe Salmonella
Jedzenie przez żywność zakażoną Salmonella typhimurium, ostry początek, któremu często towarzyszy przeziębienie, ból brzucha, wzdęcia, nudności, wymioty, biegunka, wodnisty stolec i smród, wczesna bakteriemia, częściej Początek, polegający na patogenach, diagnozie i identyfikacji serologicznej.
5. Wirusowa biegunka
Biegunka wywołana zakażeniem enterowirusem, charakteryzująca się wysoce zaraźliwym, rotawirusem, małym okrągłym wirusem i innymi infekcjami wymiotuje na wczesnym etapie, kolejna biegunka, więcej wodnistych stolców i śluzu, głównie jesienią i zimą, inne wirusowe Biegunka występuje częściej latem i jesienią, nudności i wymioty, oprócz objawów żołądkowo-jelitowych, często mają objawy oddechowe, zapalenie gardła i drgawki, często obejmujące mięśnie szyi, mięśnie pleców, dzieci w wieku bardziej powszechnej zielonej wodnistej lub jajecznej wody Leczenie antybiotykami jest na ogół nieskuteczne, a przebieg choroby leczy się sam w ciągu 5 do 7 dni, a ponadto jest identyfikowany przez serologię i izolację wirusa.
6. Zapalenie jelit Campylobacter
Campylobacter jejuni powoduje łagodne i wirusowe zapalenie jelit i jest podobne do wrzodziejącego zapalenia jelita grubego lub choroby Crohna, ma gorączkę, biegunkę lub stolec podobny do śluzu, smród, kolor żółci, ciężką ropę i krwawe stolce. Ponad tydzień powrotu do zdrowia, dzieci często mają skurcze brzucha, drgawki mogą wystąpić, gdy wysoka gorączka, częstość występowania jest bardziej związana z kontaktem z drobiem, zwierzętami gospodarskimi lub piciem niesterylnego mleka, surowej wody, badanie mikroskopowe w ciemnym polu może wykazać zgięcie łuczniczej mocy czynnej Bakterie, hodowla bakteryjna do dalszej diagnozy.
7. Zapalenie jelit Yersinia
Częściej u dzieci, związany z jedzeniem, zanieczyszczeniem wody, bólem brzucha, biegunką, hipotermią, wodnistym stolcem, może mieć posocznicę, może być powikłany rumieniem guzkowym, rzekomym zapaleniem wyrostka robaczkowego, zapaleniem stawów, kultura bakteryjna może być dalej identyfikowana.
8. Inne
Należy zwrócić uwagę na rozpoznanie biegunki spowodowanej przez Giardię, czerwonkę amebiczną, a ameba lub Giardia można znaleźć w mikroskopie kału.
