Ceratite por Acanthamoeba
Introdução
Introdução à ceratite por Acanthamoeba Ceratite por Acanthamoeba (AK) é uma nova ceratopatia infecciosa causada por protozoários Acanthamoeba, descoberta em 1973, e o número de casos aumentou ano a ano nos últimos anos. Devido às complicadas manifestações clínicas da doença, é difícil diagnosticá-la e tratá-la, e muitas vezes é diagnosticada erroneamente como ceratite por herpes simplex ou ceratite fúngica, portanto, é necessário fortalecer o entendimento e a pesquisa dessa doença. Conhecimento básico A proporção de doença: 0,8% Pessoas suscetíveis: principalmente pessoas jovens e saudáveis, a maioria tem uma história de uso de lentes de contato ou trauma ocular Modo de infecção: propagação de contato Complicações: glaucoma edema de disco óptico atrofia óptica neuropatia óptica opressiva descolamento de retina coroidite
Patógeno
A causa da ceratite por Acanthamoeba
(1) Causas da doença
Vida auto-nascida patogênica A ameba é uma estrutura unicelular de protozoários, amplamente encontrada em ambientes naturais, como água doce, água salgada, solo, poeira no ar, sujeira, plantas estragadas e resíduos humanos e animais, na banheira, filtração do ar. A ameba foi isolada da torre de resfriamento de água, lente de contato e solução de cuidado de caixa de espelho.A vida patogênica auto-nascido de ameba pode não só viver na natureza, mas também proliferar no hospedeiro de sangue quente. É chamado um organismo anfíbio e pertence a um parasita facultativo.
Acanthamoeba
É mais comum em solo ou fonte de água contaminada por fezes, e possui um trofozoíto e período cístico.O trofozoíto é uma forma de atividade e infecção de Acanthamoeba, é oblongo e tem um diâmetro de 15 a 45 μm. Muitos processos espinhosos, chamados de pseudópodes espinhosos, são geralmente baseados em bactérias e outros micróbios para alimentação, e são propagados de uma maneira dividida em duas partes.O ciclo reprodutivo médio é de cerca de 10h (6-24h), quando as condições ambientais não são adequadas. O trofozoíto se torna menor e segrega uma parede espessa de parede dupla para formar um cisto.
A cápsula é redonda e tem um diâmetro de 10 a 25 μm.A parede interna é lisa e poligonal.A parede externa é muitas vezes enrugada.As paredes interna e externa são conectados uns aos outros para formar um orifício da coluna.É um canal para o metabolismo do cisto, ea cápsula é resistente ao ambiente externo. Forte, não sensível a drogas antibacterianas em geral, cloretos, desinfetantes químicos, etc., pode sobreviver por vários anos no ambiente natural, a cápsula pode flutuar no ar, e os cistos foram isolados da nasofaringe de indivíduos assintomáticos. Quando as condições ambientais são apropriadas, especialmente quando os nutrientes são suficientes, os cistos são convertidos em trofozoítos dentro de 3 dias.
Os protozoários Acanthamoeba foram previamente considerados protozoários não patogênicos, e foi descoberto em 1958 que o Acanthamoeba pode causar infecções fatais em animais.Foi confirmado que o Acanthamoeba pode causar encefalite granulomatosa em humanos. E ceratite.
Existem actualmente 25 espécies de Acanthamoeba encontradas, das quais pelo menos 8 espécies (A. castellanii, A. culbertsoni, A. hatchetti, A. lugdunensis, A. polyphaga, A. quina, A. rhysodes, A. Griffini) pode causar ceratite em humanos.
2. Nergen
Os protozoários de F. striata são criados em água doce e também podem causar infecção corneana humana.O trofozoíto ativo é de longa duração amebiana, com 7μm × 20μm, com um grande pseudópode em uma extremidade, nutrindo-se em um ambiente inadequado. O corpo pode ser transformado em flagelo, com dois ou mesmo dois flagelos, podendo também se tornar um cisto, que não se divide e não forma um encapsulamento, a cápsula do N. falciparum é menor e tem diâmetro de 9 μm. A parede da cápsula é lisa e porosa.Em condições adequadas, o tipo flagelar e o cisto podem ser convertidos em trofozoítos.
3. Classificação de Acanthamoeba
(1) Classificação morfológica: Em 1977, Pussard e Pons foram divididos principalmente em 18 espécies e 3 grupos de acordo com a morfologia do cisto, sendo que o Acanthamoeba patogênico pertencia principalmente ao grupo II e A.culbertsoni no grupo III. Patogenicidade
As principais características do grupo I são: grandes cistos e trofozoítos, o diâmetro médio da cápsula é ≥18μm, a distância entre as paredes interna e externa da cápsula é ampla, a cápsula externa lisa ou levemente enrugada, a cápsula interna em estrela e as paredes interna e externa da cápsula na parede interna. Conectado, o furo da espinha cobre a cápsula interna.
As principais características do grupo II são: o diâmetro médio da cápsula é <18μm, a distância entre as paredes interna e externa da cápsula é grande ou pequena, a cápsula externa é frequentemente ondulada ou papilar e a cápsula interna pode ser em estrela, poligonal e triangular e às vezes circular. Ou elíptica, não se formam protuberâncias óbvias, e a tampa da espinha está localizada na junção das cápsulas interna e externa, e é uma depressão formada pela cápsula interna.
As principais características do grupo III são: o diâmetro médio da cápsula é <18μm, a parede externa da cápsula é fina, com ou sem rugas, a cápsula interna é redonda e existem 3 a 5 braços levemente protuberantes, sendo difícil classificar o grupo III apenas pelas características morfológicas. 5 espécies no meio.
Como a Acanthamoeba é amplamente distribuída na natureza e é dividida em espécies doentes e não patogênicas, é necessário identificar Acanthamoeba no gênero e abaixo do nível, mas a espécie amorfa de Acanthamoeba tem certas limitações. Por exemplo, algumas condições externas podem afetar a morfologia dos cistos, as cápsulas são diferentes em diferentes períodos, as várias formas no mesmo grupo são semelhantes, especialmente os grupos II e III, portanto, muitos pesquisadores estão buscando uma classificação mais objetiva e precisa. Método
(2) Genotipagem: Acredita-se atualmente que a análise das diferenças na sequência de DNA seja o método mais promissor para a tipificação exata de Acanthamoeba nos seguintes níveis: Atualmente, mais estudos são realizados no sequenciamento do gene 18SrDNA.
De acordo com a classificação de 26 cepas de Acanthamoeba em 2004, o Beijing Eye Institute mostrou que 25 cepas eram do genótipo T4 de 18SrDNA, e apenas 1 cepa era T3.
A identificação de genótipos é de grande importância para o diagnóstico laboratorial da infecção por Acanthamoeba, muitos laboratórios têm aplicado com sucesso a tecnologia de PCR para diagnosticar a ceratite por Acanthamoeba.Além da morfologia e genotipagem, existem laboratórios. Explorando a aplicação do zimograma de isoenzimas, anticorpos monoclonais e outros métodos para a classificação de Acanthamoeba e, em seguida, estudar a relação entre vários tipos de Acanthamoeba e patogenicidade e eficácia da droga.
(dois) patogênese
Vida auto-ativa patogênica Os protozoários amebas podem sobreviver na natureza sem a necessidade de parasitar o hospedeiro, alimentando-se de bactérias, fungos e outros protozoários, e cerca de 25% dos trofozoítos carregam bactérias na garganta de pessoas normais. O intestino também isolou a acanthamoeba, uma infecção humana causada pela ameba auto-produzida patogênica, que é uma infecção de contato acidental ou uma infecção oportunista.
O protozoário ameba se liga primeiro ao lipopolissacarídeo da membrana celular epitelial da córnea, adere à superfície do epitélio da córnea e então libera enzimas ativas como a neuraminidase, que faz com que as células epiteliais da córnea se tornem mais finas e necrose, causando destruição da barreira epitelial. Invasão do estroma da córnea, estudos recentes descobriram que a ameba pode danificar as células epiteliais da córnea de três maneiras:
Endocitose
Semelhante às células fagocíticas, a fagocitose direta de alguns componentes da membrana celular.
2. Exocitose espontânea
Na ausência de um processo de ativação, os protozoários da ameba libertam espontaneamente enzimas líticas, resultando em danos na membrana epitelial.
3. Ativação da membrana
Quando a ameba está em contato com o epitélio da córnea, a combinação da superfície da membrana celular e o receptor ou ligante da superfície da membrana epitelial ativa o processo de liberação da enzima, causando danos às células epiteliais.
Prevenção
Prevenção de ceratite por Acanthamoeba
Para os fatores de risco de ceratite amebiana patogênica espontânea, devem ser tomadas medidas preventivas adequadas.Em particular, deve-se reforçar o conhecimento sobre o uso de lentes de contato e evitar estritamente as lentes de contato durante o sono. Limpe a lente com água da torneira ou seu próprio líquido.
Complicação
Complicações da ceratite por Acanthamoeba Complicações glaucoma edema do disco óptico atrofia óptica neuropatia optica opressiva retiniana descolamento coroidite
Em alguns casos graves, glaucoma refratário pode ocorrer, e o segmento posterior do olho raramente está envolvido, mas edema de disco óptico, neuropatia óptica, atrofia óptica, descolamento de retina, inflamação coróide e formação de cicatriz macular são visíveis, e até mesmo coroidite contralateral é uniforme. Existem relatórios.
Sintoma
Sintomas de ceratite Acanthamoeba sintomas comuns dor ocular ulceração da córnea abscesso ceratite
Vida auto-nascido patogênica Pacientes com ceratite amebiana são em sua maioria pessoas jovens e saudáveis, as proporções masculina e feminina são iguais, a maioria tem um histórico de uso de lentes de contato ou trauma ocular, a grande maioria do envolvimento ocular único, pacientes individuais também podem ter início de ambos os olhos, O início é geralmente lento.O estágio inicial da inflamação é principalmente a irregularidade do epitélio da córnea, erosão epitelial áspera ou repetida, algumas vezes com alterações pseudo-dendríticas.Os pacientes frequentemente apresentam dor ocular óbvia, e o grau geralmente excede os sinais, formando sintomas. O fenômeno da separação dos signos.
À medida que a doença progride, a inflamação invade gradualmente a camada estromal, formando uma infiltração de placa, semi- anular ou anular do estroma pré-corneano, algumas lesões são semelhantes às alterações na ceratite discóide e alguns pacientes podem ter ceratite radial.
Se não for diagnosticada e tratada a tempo, a infiltração da córnea rapidamente se transforma em úlcera de córnea, abscesso de matriz e formação de satélite e empiema de câmara anterior.Em casos graves, ocorre necrose de córnea.Se as úlceras de córnea envolvem o limbo, muitas vezes leva à margem do limbo. Inflamação, até mesmo esclerite.
Em casos graves, mais de 20% das cataratas ocorrem, especialmente após doença prolongada, transplante de córnea e uso a longo prazo de glicocorticoides.
Os protozoários Acanthamoeba podem ser misturados com bactérias, fungos e vírus, sendo as infecções mistas principalmente Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus e Corynebacterium.
O diagnóstico de ceratite por Acanthamoeba depende principalmente de manifestações clínicas e exames laboratoriais, sendo a raspagem corneana um método comumente utilizado para a cultura de Acanthamoeba.
Examinar
Exame de ceratite por Acanthamoeba
Inspeção de selo molhado de 1.10% KOH
Pegue o tecido de raspagem corneana da área da lesão, a cultura do protozoário Acanthamoeba ou o material corneano removido cirurgicamente, aplique ou espalhe sobre uma lâmina de vidro, adicione 1 gota de solução de KOH a 10% e mostre claramente a camada dupla do protozoário sob o microscópio comum. A forma da cápsula da parede é simples e prática, e é adequada para hospitais primários.Hospitais condicionais podem ser examinados por coloração com Hemacolor, coloração tripla, Calcoflour White e outros métodos de coloração.
2. cultura de protozoários Acanthamoeba
Colocar o tecido raspador da córnea na superfície de 2% de agar isento de nutriente.Gota 1 gota de caldo Escherichia coli vivo ou morto na superfície do inóculo e incubar em uma incubadora a 35 ° C. Geralmente, ele pode crescer em 3 a 7 dias. O protozoário Acanthamoeba pode observar diretamente os trofozoítos e cistos do protozoário Acanthamoeba e o processo da coluna na água destilada morna por um microscópio invertido.
3. Verificação da técnica de imunofluorescência
Atualmente, pelo menos 8 espécies de Acanthamoeba podem causar ceratite humana, e diferentes espécies de anticorpos de protozoários Acanthamoeba podem ser usadas para identificar as espécies de Acanthamoeba por imunofluorescência indireta, atualmente não há tais espécies na China. Anticorpos podem ser enviados para os Centros dos EUA para Controle de Doenças (CDC) para identificação, se necessário.
4. exame de coloração seção patológica
Os materiais foram retirados de lesões ceratóticas perfuradas por trefina e ceratopatia cirurgicamente ressecada, fixadas, desidratadas, mergulhadas em cera, embebidas, seccionadas e, então, hematoxilina-eosina (HE) ou ácido periódico-Schiff. (PAS) coloração, coloração pelos dois métodos acima pode mostrar claramente o encapsulamento da ameba cística na córnea, e os resultados da cultura de raspagem ou protozoários podem ser verificados por exame patológico, ea seção patológica pode ser confirmada de acordo com as necessidades e condições. Os métodos de tingimento como Giemsa, Wright, Triple e Calcoflour White são utilizados para o diagnóstico.
5. Inspeção direta com microscópio confocal
Os métodos de exame acima mencionados são todas técnicas diagnósticas invasivas e, para obter tecido, precisam ser retirados no local da lesão, causando certos danos à córnea.O microscópio confocal recentemente introduzido pode observar diretamente pacientes com AK, que não é invasivo, Um método de diagnóstico rápido precoce com alto contraste e alta ampliação pode detectar imagens de Acanthamoeba em várias camadas da córnea (do epitélio ao endotélio) e, às vezes, até mesmo pseudópodos que se projetam do protozoário Acanthamoeba, ou não. Imagem regular de inchaço dos nervos e bordas grossas.
Diagnóstico
Diagnóstico e diferenciação de ceratite por Acanthamoeba
Ceratite amebiana vida patogênica espontânea, a identificação precoce de lesões epiteliais de ceratite monocítica, a taxa de erros de diagnóstico é maior, as lesões epiteliais do início inicial, há uma tendência para prolongar o não curado, ao mesmo tempo Pacientes com histórico de trauma ou uso de lentes de contato devem ser altamente suspeitos, e a citologia de raspagem da córnea em tempo hábil é útil para o diagnóstico diferencial.Quando a infiltração do estroma corneano e a ulceração ocorrem, ela deve estar associada à ceratite discóide monossiforme. A identificação de ceratites bacterianas e fúngicas, a história de intensa dor ocular ou o surgimento de ceratite radial contribuíram para o diagnóstico diferencial.Nos últimos anos, a aplicação da microscopia confocal da córnea tem sido um rápido diagnóstico precoce de ceratite por Acanthamoeba. Novas médias são fornecidas: através do microscópio confocal corneano, o cisto de acanthamoe pode ser observado na córnea viva, o que é útil para o diagnóstico clínico, mas a microscopia confocal é negativa, e o diagnóstico clínico não pode ser completamente negado.
