Hemofilia A
Wprowadzenie
Wprowadzenie do hemofilii A. Hemofilia A (HA) jest rodzajem recesywnej dziedzicznej choroby krwotocznej spowodowanej czynnikiem VIII krzepnięcia łańcucha X i nieprawidłową strukturą molekularną. Cechami klinicznymi są „spontaniczny” krwotok stawowy i głęboki krwotok tkankowy. Podstawowa wiedza Odsetek chorób: 0,02% - 0,03% Osoby podatne: brak określonej populacji Tryb infekcji: niezakaźny Powikłania: krwotok mózgowy śpiączka zanik mięśni
Patogen
Hemofilia Przyczyna
(1) Przyczyny choroby
Kobiety z hemofilią A występują niezwykle rzadko. Chociaż istnieją doniesienia o hemofilii A u chorego ojca oraz matki i córki nosicielki, znaczna część zgłoszonych pacjentek to nosicielki kobiet ze względu na ich normalne ekstremalne chromosomy X. Przypadkowa inaktywacja prowadzi do klinicznych objawów hemofilii; może to być również choroba 2N von Willebranda.
Kobiety z hemofilią mają trzy możliwości przenoszenia genów hemofilii: 1 pewne nosiciele, w tym córki pacjentów z hemofilią, matki z co najmniej 2 synami hemofilii; 1 Matka syna hemofilii ma kolejną hemofilię wśród kobiet, które mają z nią matczyny związek krwi; 2 bardzo prawdopodobne nosicielki, pacjenci z hemofilią bez historii choroby genetycznej w rodzinie stają się sporadycznymi przypadkami, matka sporadycznych przypadków jest bardzo Możliwi nosiciele; możliwymi nosicielami są 3 potencjalni nosiciele, kobiety z matczynym związkiem krwi z hemofilią i kobiety bez synów hemofilii.
Sporadyczne przypadki stanowiły ponad 30% pacjentów z hemofilią, z których niektórych nie znaleziono w rodzinie, a częściowo z powodu mutacji genetycznych.
(dwa) patogeneza
Wady genu FVIII prowadzące do defektów syntezy FVIII i nieprawidłowości w strukturze FVIII powodują spadek lub niedobór aktywności funkcjonalnej FVIII, który jest podstawową patofizjologiczną podstawą hemofilii.
Gen FVIII i wada genu hemofilii A, gen FVIII zlokalizowany na długim końcu ramienia chromosomu X (Xq28), zawierający 186 kb, około 0,1% pełnej długości chromosomu X, 26 eksonów, całkowita długość około 9 kb, intron 25, długość mRNA wynosi około 9029 pz, defekt genu FVIII powodujący hemofilię A może być mutacją punktową, częściową lub całkowitą delecją genu, wstawieniem komponentu genu, generacją mutacji punktowych i inwersją genu kodu stop, informacje podsumowane przez Tuddenham i in. Wśród nich jest ponad 80 rodzajów mutacji punktowych, 6 rodzajów insercji, 7 rodzajów małych delecji, 60 rodzajów dużych fragmentów, i istnieje prawie 400 rodzajów defektów genu FVIII prowadzących do hemofilii A.
W mutacjach punktowych mutacja pojedynczej zasady występuje w miejscu enzymu restrykcyjnego, a Taq1 rozpoznaje sekwencję TCGA. Mutację tego miejsca można bezpośrednio określić przez utratę miejsca cięcia Taq1.
Mutacje występują również często w sekwencji dinukleotydowej CpG. Mutacja tej sekwencji często wpływa na krypto-CGA argininy. Konwersja C → T sekwencji dinukleotydowej CG powoduje mutację CGA w TGA, która jest kodem terminacji. Od tego czasu białko nie jest już syntezowane i często prowadzi do ciężkiej hemofilii. Mutacja, która wytwarza kodon stop, nazywana jest mutacją nonsensowną. Konwersja G → A sekwencji dinukleotydowej CG powoduje mutację CGA w CAA, który jest kodem glutaminianowym. Niefunkcjonalna cząsteczka FVIII, w której arginina jest zastąpiona glutaminianem i nie może być normalnie aktywowana FVIII: Ag jest normalny, a FVIII: C jest mniejszy niż 1%, a mutacja, w której aminokwas jest podstawiony innym aminokwasem, staje się mutacją typu missense i występuje wiele błędów. Mutacje informują, że nasilenie hemofilii spowodowane różnymi mutacjami missense jest różne. Około 5% hemofilii A jest spowodowane delecją genu i często prowadzi do ciężkiej hemofilii. Odkryte delecje genów są rozmieszczone w całym genie FVIII. Żaden specjalny segment nie jest bardziej podatny na mutację delecyjną, długość delecji może wynosić od 2 pz do 210 kb. Małe delecje mogą prowadzić do łagodnej hemofilii bez zmiany ramki odczytu genu. Duże delecje często prowadzą do niepowodzenia w wykrywaniu FVIII: Ag. , Jednak pacjenci z innymi defektami genetycznymi anty FⅧ występuje również, lecz nie FⅧ Ag pacjentów dużych fragmentów bardziej wrażliwe na przeciwciała anty-delecja genu FⅧ.
Insercja jest kolejnym rodzajem mutacji w defektach genu FVIII. Insercja ludzkiej sekwencji L1 do genu FVIII może powodować hemofilię, a sekwencja L1 jest długą powtarzalną sekwencją szeroko obecną w ludzkim genomie, z retrowirusową odwrotną transkrypcją. DNA enzymu jest podobne: ponieważ można go przenosić w genomie i jest również nazywane transpozonem, wstawienie transpozonu do genu FVIII prowadzi do hemofilii A, co opisano w niektórych przypadkach.
Inwersja genów jest kolejną genetyczną zmianą hemofilii A. W ostatnich latach istnieje jedna wyspa CpG (dwukierunkowy promotor aktywny transkrypcyjnie) w strukturze intronu genu FVIII 22 i dwa FVIII związane z tą wyspą. Gen związany z genem, 1 to gen F8A, jego kierunek transkrypcji jest przeciwny do genu FVIII, a drugi to gen F8B, jego kierunek transkrypcji jest taki sam jak w przypadku genu FVIII, a gen F8A ma trzy kopie na końcu chromosomu X (Xq). Jeden znajduje się w intronie 22 genu FVIII (gen w genie), pozostałe dwa znajdują się 500 kb powyżej genu FVIII, a F8A w genie FVIII może ulegać homologicznej rekombinacji z dowolnym z dwóch genów F8A powyżej. Rekombinacja odwraca koniec Xq, dzieląc gen FVIII na dwie przeciwne części, promotor na ekson 22 jako część i ekson 23 na ekson 26 jako kolejną część, które są w odległości około 500 kb od siebie. Prowadząc do ciężkiej hemofilii A, obecnie uważa się, że inwersja genu FVIII stanowi około 50% ciężkiej hemofilii A.
Zapobieganie
Zapobieganie hemofilii A.
1. Ustanowienie poradnictwa genetycznego, ścisłe badanie przedmałżeńskie i wzmocnienie diagnozy prenatalnej w celu zmniejszenia liczby urodzeń dzieci z hemofilią.
2. Pacjenci z hemofilią powinni unikać działań, które są ciężkie lub podatne na obrażenia, ćwiczeń i pracy, aby zmniejszyć ryzyko krwawienia.
3. W ciężkich przypadkach przed badaniem urazowym i leczeniem urazowym należy zastosować alternatywne leczenie.
Powikłanie
Hemofilia A powikłania Powikłania krwotok mózgowy śpiączka zanik mięśni
Krwotok śródczaszkowy i objawy obwodowego układu nerwowego są najczęstszymi powikłaniami tej choroby. Krwotok śródczaszkowy jest również najczęstszą przyczyną śmierci. W przeszłości występował uraz, ale czasami uraz jest lekki i nie przyciąga uwagi. Krwawienie może być zewnątrzoponowe, podtwardówkowe. A w mózgu może objawiać się stopniowo narastającym bólem głowy, stopniową śpiączką i objawami oraz lokalizacją podwyższonego ciśnienia śródczaszkowego. Wielu pacjentów ma objawy ośrodkowego układu nerwowego kilka dni po urazie, więc pacjenci z krwotokiem mózgowym mogą mieć uraz głowy. Należy zastosować wczesną terapię zastępczą, a nieprawidłowości EEG sugerują, że wcześniej mógł wystąpić subkliniczny krwotok mózgowy.
Obwodowy układ nerwowy często powoduje silny ból z powodu inwazji krwotocznej lub ucisku krwiaka, drętwienia i dysfunkcji oraz zaniku mięśni.
Objaw
Objawy hemofilii A Częste objawy Krwotok z mięśni Powtarzające się krwawienia Wady stawów Aborcja Porażenie Niedrożność dróg oddechowych Szok niskotemperaturowy
Klinicznymi cechami hemofilii A są nieprawidłowe nadmierne krwawienie w różnych częściach ciała, szczególnie krwiak tkanek miękkich i krwawienie stawów są cechami tej choroby. Nasilenie krwawienia jest równoległe z poziomem FVIII: C u pacjentów oraz krwawieniem pacjentów z hemofilią A Związane z urazami, ale ponieważ uszkodzenie jest wyjątkowo łagodne i niezauważone, i uważa się je za „spontaniczne” krwawienie, Tabela 1 stanowi kryteria klasyfikacji hemofilii rozwiniętej w Chinach, chociaż niektóre typy pokrywają się, ale ten rodzaj klasyfikacji nadal Szeroko stosowany, ma istotne znaczenie w diagnostyce klinicznej i leczeniu. Międzynarodowe standardy klasyfikacji nie są spójne. Hougie jest podzielony na 3 typy, bez typu subklinicznego, cechy kliniczne są podobne do chińskich standardów, ale ciężki FVIII: C jest mniejszy niż 1%, lekki FVIII: C 6% do 30%, Wintrobe i chiński standard, z wyjątkiem subklinicznej FVIII: C 25% do 50% są takie same, istnieje kilka rodzajów, różnica jest w zakresie FVIII: C, obcy do klasyfikacji Hougie Jest szeroko stosowany.
Ciężka hemofilia A często doświadcza krwawienia bez oczywistego urazu spowodowanego codziennymi czynnościami. Dzieci nie mają krwawienia ze stawu przed odwrotem. Krwotok z tkanek miękkich jest częsty. Krwawienie stawów zaczyna się często po chodzeniu. Jeśli nie ma skutecznego alternatywnego leczenia, należy powtórzyć Wspólne krwawienie często może prowadzić do przewlekłej artropatii hemofilnej u pacjentów lata temu, co jest charakterystyczne dla ciężkich pacjentów, ale nawet u pacjentów z ciężką hemofilią początek krwawienia jest przerywany, nie występuje przez tygodnie, miesiące, a nawet lata. Ciężkie krwawienie nie jest rzadkie. Zdarzają się również ciężkie przypadki w wieku dorosłym. Oprócz krwotoku mózgowego nagła śmierć z powodu krwawienia jest rzadka.
Umiarkowane przypadki mogą mieć krwiaka i krwawienie ze stawów, a często są powodowane określonym urazem, kilka może mieć deformacje stawów, ale rzadko pojawiają się przed dorosłością.
Łagodne przypadki rzadko mają krwawienie ze stawu, brak deformacji stawu, epizody krwawienia nie są łatwe, często spowodowane oczywistym urazem, wielu pacjentów ma jedynie niewielką historię łatwo przeoczonego krwawienia, często diagnozowanego przez krwawienie wywołane operacją.
Większość nosicieli nie ma objawów krwawienia FVIII: C poniżej 45% może powodować nieprawidłowości krwotoczne po operacji i poważnym urazie Bardzo niewiele FVIII: C poniżej 5% ma klinicznie umiarkowaną hemofilię A, czasami diagnozowaną jako hemofilia żeńska. .
1. Krwawienie stawów jest jednym z typowych objawów krwawienia tej choroby. Występuje w ponad 2/3 przypadków. Często pojawia się w urazie. Po chodzeniu i ćwiczeniach najczęstszymi miejscami krwawienia są staw kolanowy i staw skokowy. , stawu łokciowego, stawu biodrowego, stawu barkowego i nadgarstka, krwawienie stawu jest związane z noszeniem ciężaru i intensywnością aktywności stawu. Jest bardzo mało krwawień stawu u dzieci przed maluchem. Krwawienie stawów często pochodzi z maziowych naczyń krwionośnych stawu i krew wchodzi do stawu. W jamie i osteofitach pojawia się niewielki dyskomfort stawów na początku krwawienia, który trwa od kilku minut do kilku godzin, a następnie stopniowo pogarsza się ból, stawy są miejscowo spuchnięte, a gorączka jest gorąca. Kiedy krew wnika w skórę lub pod skórę, może wystąpić zaczerwienienie i wybroczyny. Ograniczenie, czasami pacjenci mogą mieć niską gorączkę, ale oczywista, długotrwała gorączka często sugeruje koinfekcję. Ze względu na związek między strukturą stawu krwawienie stawów często samoogranicza się. Po ustaniu krwawienia krew niektórych pacjentów w stawie stopniowo wchłania się w ciągu dni lub tygodni. Funkcja stawu jest stopniowo przywracana, a powtarzające się krwawienie powoduje chroniczne uszkodzenie stawu, zapalenie błony maziowej, zniszczenie chrząstki stawowej, przerost kości i zanik. Hiperplazja warg twarzy i tworzenie osteofitów, zwężenie przestrzeni stawowej i martwica kości i zmiany torbielowate, prowadzące do deformacji i dysfunkcji stawów, ciężkie chromanie, jeśli wczesna terapia zastępcza krwawienia stawów często pozwala pacjentom wcześnie zatrzymać krwawienie I ból i przyspieszenie wchłaniania krwi, aby uniknąć ciężkiej choroby hemofilnej stawów i niepełnosprawności pacjenta, pacjentów z hemofilią A z małym krwawieniem stawów i stawów kręgosłupa rzadko krwawią.
2. Krwotok mięśniowy i krwiak są cechami hemofilii i innych niedoborów czynników krzepnięcia Inne choroby krwotoczne występują rzadko, często występują po urazie lub aktywności lub mogą wystąpić w przypadkach, gdy uraz nie jest oczywisty, może wystąpić w dowolnej części, ale Wymuszone grupy mięśni są bardziej prawdopodobne, około 75% pacjentów ma krwawienie i krwiak, krwawienie podskórne i mięśniowe mają tendencję do rozprzestrzeniania się, krwiak może stopniowo się zwiększać, ciężkie przypadki, szczególnie krwotok pozaotrzewnowy może powodować niedokrwistość i wstrząs, ważna jest kompresja krwiaka Poważne konsekwencje dla narządów, krwotok pozaotrzewnowy może powodować porażenną niedrożność jelit, krwiak w klatce piersiowej lub szyi może powodować niedrożność dróg oddechowych, krwiak w dolnej części brzucha prowadzący do niedrożności dróg moczowych może wpływać na czynność nerek, ucisk na nerwy krwotoczne może powodować uszkodzenie nerwów, krwawienie w okolicy pachowej Często upośledzające częstotliwość krwawienia mięśni to łydki, uda, pośladki, przedramiona i brzuch.
3. Krwawienie skóry i błon śluzowych Krwawienie skóry i błon śluzowych nie jest cechą tej choroby Inne choroby krwotoczne często mają krwawienia na skórze i błonach śluzowych Choroba krwotoczna charakteryzuje się brakiem krwawień, ale łuszczącym się zamuleniem. Plamka, a często towarzyszy jej podskórne stwardnienie, mały krwiak powstały w wyniku krwawienia poniżej skóry właściwej, często spowodowany niewielkim urazem, często krwawienie, gdy skóra ma dużą ranę, krwawienie z błony śluzowej jest częste, małe rany w błonie śluzowej często powodują ciągłe krwawienie, nie Nie jest łatwo przerwać leczenie zastępcze. Małe rany w dziąsłach, języku i innych błonach śluzowych jamy ustnej często nadal krwawią. Jeśli leczenie zastępcze nie jest stosowane, może prowadzić do poważnej utraty krwi. Krwawienie z przewodu pokarmowego nie jest częste. Krwawienie jest często poważne, a górne drogi pokarmowe mogą zostać uszkodzone z powodu jedzenia. Wrzód błony śluzowej lub wrzód trawienny spowodowany pięciokrotnie większą częstością występowania wrzodu trawiennego u dorosłych pacjentów z hemofilią.
4. Częstość występowania fałszywych guzów wynosi około 2%. Częściej występuje u pacjentów z ciężką terapią zastępczą z niedoborem hemofilii A. Wspólnymi częściami są uda, miednica i biodra, które mogą również występować w pośladkach, łydkach, stopach, przedramionach i rękach. Po urazowym krwotoku powstaje krwiak torbielowaty pod okostną i ścięgnem ścięgna. Jeśli krew w krwiaku nie zostanie wchłonięta, krew zostanie zniszczona, a miejscowe ciśnienie osmotyczne wzrośnie. Powtarzający się krwotok w kapsułce często zwiększa objętość w ciągu kilku lat, kompresując i niszcząc. Korozja otaczających tkanek, tworząc guz rzekomy, guz rzekomy jest powikłaniem ryzyka hemofilii, można go podzielić na trzy typy, pierwszy to prosta torbiel, szypułka jest połączona z powięź mięśniową, drugi na początku torbielowaty, Jednak ze względu na podaż naczyniową wpływającą na pobliską kość i okostną powstaje wchłanianie kości i tworzenie torbieli, a trzecim jest oddzielenie okostnej i kości z powodu krwotoku podokostnowego.
5. Krwotok z dróg moczowych ciężka hemofilia Często kolor moczu może być brązowoczerwony lub jaskrawoczerwony, w zależności od ilości krwawienia, miejsce krwawienia jest zwykle w miąższu nerki, głównie jednostronne, ale także obustronne krwawienie nerkowe Krwawienie może również wystąpić w dolnych drogach moczowych, a ilość krwawień jest na ogół niewielka.
6. Pacjenci krwotoczni, którzy nie zostali poddani alternatywnemu leczeniu po operacji, często powodują ciężkie krwawienie. Nieprawidłowość krwawienia występuje nie tylko podczas operacji, chociaż jest to w pełni hemostaza, bardzo często występuje ciężkie krwawienie po godzinach, a nawet dniach po operacji. Brak gojenia lub słabe gojenie, niezależnie od tego, czy jest to poważna operacja, czy drobna operacja, należy wymienić przed operacją, aż rana się zagoi.
Zbadać
Hemofilia Czek
Badanie przesiewowe dla wszystkich endogennych układów krzepnięcia może zostać przedłużone, w tym czas częściowej tromboplastyny (PTT) lub aktywowany PTT (APTT), test produkcji tromboplastyny Biggsa (TGT), prosty test produkcji tromboplastyny (sTGT), osocze Czas rekalcyfikacji i czas krzepnięcia (CT), ze względu na różnice w czułości różnych testów, mogą być normalne w łagodnych i subklinicznych przypadkach, a testy APTT wykazują również różnice w czułości poziomów FVIII: C z powodu różnych kombinacji odczynników, czasu protrombinowego ( PT) Czas trombiny (TT) jest normalny, czas krwawienia (BT) jest ogólnie normalny, a niektóre mogą być nieco wydłużone, z powodu adsorpcji siarczanu baru lub adsorpcji żelu wodorotlenku glinu w normalnym osoczu zawierającym FVIII: C i FXI: C bez FIX : C, a więc stosując normalne osocze adsorpcyjne i surowicę do testu korekcyjnego APTT lub: Biggs TGT może potwierdzić brak hemofilii A, B i FXI, FVIII: C można określić metodą jednoetapową lub dwustopniową, metoda jednofazowa nie wymaga Osocze matrycy FVIII, podczas gdy metoda drugiego etapu jest obecnie rzadziej stosowana ze względu na skomplikowane działanie Test FVIII: C może mieć duży błąd z powodu biegłości odczynnika lub operatora itp., A test antygenu FVIII (FVIII: Ag) może określić białko FVIII. Trochę cierpienia Normalna lub łagodna redukcja i FVIII: C jest prawie niewykrywalna, co wskazuje na obecność dysfunkcyjnych cząsteczek FVIII, znanych również jako CRM, a niektórzy pacjenci z FVIII: Ag i FVIII: C są prawie niewykrywalni, zwani CRM-, FVIII: C Wyrażany jest jako procent normalnej średniej lub jednostki (U) na mililitr osocza, U jest równy 100%, normalne ludzkie osocze zawiera FVIII: jednostka C1 na mililitr, a pacjent z hemofilią vWF: Ag jest normalny.
Ze względu na szybki rozwój technik biologii molekularnej, choć większość laboratoriów jest bezwarunkowa, możliwe stało się zdiagnozowanie hemofilii na poziomie molekularnym i było ono wykorzystywane do diagnostyki prenatalnej i testów na nosicielach. Obecnie można stosować pośrednią diagnostykę genetyczną i bezpośrednią diagnostykę genetyczną. Metoda pośredniej diagnozy wykorzystuje analizę powiązań genowych i wymaga probanta, a matka probandu jest heterozygotyczna dla miejsca analizy, a istnieją trzy polimorficzne markery genetyczne związane z genem związane z ograniczeniem hemofilii A: 1 Polimorfizm długości fragmentu endonukleazy (RFLP): Miejsca polimorficzne stosowane w domu i za granicą obejmują BcL I, HindIII, XbaI, BgLI itp. Przy zastosowaniu pojedynczego miejsca polipeptydu wskaźnik wykrycia heterozygoty jest mniejszy niż 50%. Dlatego w celu zwiększenia wskaźnika wykrywalności należy stosować wiele miejsc, które osiągnęły ponad 90% w obcych krajach; 2 sekwencje powtórzeń tandemowych o zmiennej liczbie (VNTR), ponieważ ludzki genom zawiera kilka różnych sekwencji powtórzeń nukleotydowych, te powtórzenia tandemowe mają różne numery kopii. Może również powodować polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych DNA i jest wykorzystywany do pośredniej diagnostyki genetycznej. Do analizy wykorzystuje się często miejsce V52 V STR zlokalizowane poza genem FVIII i ściśle związane z genem. trawienie apI i Southern blotting; 3 krótka kolejność powtarzania (STR) ma wysoką wartość zastosowania, stwierdzono, że istnieją 2 STR w genie FVIII, 1 w intronie 13 i 1 w intronie 22 Średni.
RFLP ma wielką praktyczność i ograniczenia, czasem wymaga bezpośredniej diagnozy genetycznej Bezpośredni pomiar sekwencji genów może bezpośrednio wykryć geny chorobotwórcze, dokonać najdokładniejszej diagnozy hemofilii i stanowić podstawę do badań nad patogenezą molekularną. Bezpośrednią diagnozę genetyczną przeprowadzono przede wszystkim przez denaturującą elektroforezę gradientową w żelu (DGGE) i analizę polimorfizmu konformacji jednoniciowej (SSCP) w połączeniu z analizą sekwencyjną.
W zależności od stanu, objawów klinicznych, objawów, objawów, wybierz EKG, USG B, rentgen, CT, MRI, biochemię i inne testy.
Diagnoza
Hemofilia Diagnoza i identyfikacja
1. Kryteria diagnostyczne
(1) Objawy kliniczne: 1 pacjent płci męskiej, z wywiadem rodzinnym lub bez niego, wywiad rodzinny z przypadkowym dziedzicznym dziedziczeniem, może wystąpić typ homozygotyczny u kobiet, rzadko spotykany; 2 stawy, mięśnie, krwotok z głębokich tkanek, spontaniczny Zasadniczo występuje długotrwały marsz, nadmierne ćwiczenia, historia operacji (w tym niewielka operacja, taka jak ekstrakcja zęba), deformacja stawu spowodowana powtarzającym się krwawieniem stawu i powtarzające się guzy spowodowane powtarzającym się krwawieniem w głębokich tkankach (torbiele krwi).
(2) Badanie laboratoryjne: 1 czas krzepnięcia (metoda z probówki) ciężkie wydłużenie, średnia normalna, lekka, subkliniczna normalna; 2 aktywowane częściowe czas tromboplastyny (APTT), znacznie przedłużone, może być normalnym świeżym i zaadsorbowanym osoczem Korekta, łagodne wydłużenie lub normalne, subkliniczne normalne; 3 liczba płytek krwi, czas krwawienia, normalne cofanie skrzepu krwi; 4 normalny czas protrombiny (PT); aktywność prokoagulacyjna 5VIII (FVIII: C) zmniejszona lub minimalna; Antygen czynnika von Willebranda (vWF: Ag) był prawidłowy, a FVIII: C / vWF: Ag był znacznie zmniejszony.
(3) Klasyfikacja ważności.
(4) Nabyta hemofilia A (nabrany niedobór FVIII) spowodowana przez przeciwciało FVIII.
2. Badania prenatalne i nosicielskie Testy genetyczne członków rodziny, którzy mogą być nosicielami, są ważne w poradnictwie genetycznym, ale należy zauważyć, że około 30% pacjentów ma nowe mutacje, a nie zysk genetyczny, rekombinowane DNA. Technika ta zapewnia bardzo korzystne środki do diagnostyki prenatalnej i kontroli statusu przenoszenia .. Rodzina, która może przeprowadzić analizę polimorfizmu długości fragmentu restrykcyjnego (RFLP) musi obejmować 1 pacjenta płci męskiej, a matka jest heterozygotyczna na 1 markerze RFLP. .
(1) Diagnoza prenatalna: oznaczenie 1FVIII: C i vWF: W przeszłości, w zależności od ciąży od 18 do 21 tygodni, krew płodu była mierzona za pomocą mikroskopu płodowego w celu wykrycia poziomów FVIII: C i vWF, ale w latach 1978–1983 stosowano ją w Stanach Zjednoczonych. Metody Było tylko 92 przypadki diagnozy prenatalnej, a około 300 płodów miało ryzyko hemofilii A. Powodem, dla którego ta metoda diagnozy prenatalnej nie była szeroko stosowana, było to, że aborcja spowodowana mikroskopem płodowym wynosiła do 6%. Wskaźnik niepowodzenia pobierania krwi może sięgać 13% (12/92) RFLP z 2FVIII zapewnia niezawodną metodę diagnozy prenatalnej Obecnie istnieją dwie metody ekstrakcji embrionalnego DNA: pobieranie próbek z 3-miesięcznych zarodków; 8 do 11 tygodni pobierania próbek kosmówki, aby spełnić warunki RFLP, to znaczy, że musi mieć proband, matka proband musi być heterozygotyczna dla miejsca restrykcyjnego, używając technologii PCR, aby znacznie uprościć analizę RFLP, ale istnieją Niektóre ograniczenia, niektóre rodziny nie mają dostępnych markerów DNA, mogą polegać tylko na wykrywaniu FVIII: C i vWF.
(2) Badanie nosicielstwa: mężczyźni i normalne synki są normalne, a urodzone córki są nosicielkami; prawdopodobieństwo, że nosicielka i normalny syn płci męskiej będą chore na hemofilię, wynosi 50%. Córka ma 50% szansy na stanie się nosicielem genu wywołującego chorobę; nosicielka i syn urodzony przez pacjenta płci męskiej mają 50% prawdopodobieństwo, że będą pacjentem z hemofilią, a urodzona córka jest albo nosicielką genu wywołującego chorobę, albo pacjentem z hemofilią Zarówno mężczyźni, jak i kobiety są synami i córkami. Na szczęście prawdopodobieństwo to jest niezwykle rzadkie. Chociaż istnieją doniesienia o hemofilii u pacjentów z hemofilią i nosicielami hemofilii, krew kobiet Jest to bardzo rzadkie u pacjentów z AIDS, niektóre kobiety z nieprawidłowym chromosomem X, takie jak zespół Turnera, heterozygotyczny X i inny niedobór chromosomu X, mogą być również związane z hemofilią, jeśli normalny chromosom X nosiciela jest nieproporcjonalnie hamowany (Inaktywacja niezrównoważona X), może również wykazywać objawy krwawienia przyjaciół.
Istnieją trzy metody oceny żeńskich nosicieli patogennych genów: 1 z pewnością nosiciele: córki pacjentów z hemofilią A; matki, które mają więcej niż 2 osoby z hemofilią; matki, które mają 1 pacjenta z hemofilią, ich rodziny Jest 1 lub więcej pacjentów z hemofilią A, 2 mogą być nosicielami: pacjentka ma hemofilię A pacjentka, a jej własny syn nie ma hemofilii, lub Synowie hemofilii A i córki ich dzieci (dziewice pacjentów); ciotki pacjentów z hemofilią A i ich córki (tj. Kuzyni pacjentów) 3 prawdopodobnie będą nosicielami: Prawie jedna trzecia pacjentów z hemofilią A ma sporadyczne przypadki, a nikt w rodzinie ich matki nie ma hemofilii A. Jednak przy użyciu nowoczesnych technik biologii molekularnej w celu zbadania ich rodzin, istnieją nosiciele. Ponieważ gen powodujący chorobę jest w stanie ukrycia, może to być również spowodowane tym, że następna generacja samców nosicieli genów powodujących chorobę jest mniejsza i nie są pokazane. Liczba hemofilii spowodowanych przez nowe mutacje genetyczne jest bardzo mała.
Inwersję intronu FVIII 22 wykryto bezpośrednio za pomocą PCR lub miejsca BclI w genie FVIII, a polimorfizmy miejsc DXS52 (ST14) poza genami STR i FVIII w intronach 13 i 22 były genetycznie połączone. Analiza, Wang Xuefeng, Szanghajski Instytut Hematologii, Szanghajski Szpital Ruijin itp. Przebadało 21 rodzin, z których wskaźnik diagnostyczny wyniósł 94,7%. Jeśli połączony test sekwencjonowania genu, wskaźnik diagnostyczny może osiągnąć 100%, a inwersja intronu 22 jest bezpośrednio Wskaźnik diagnostyczny wyniósł 47,6%; wskaźnik diagnostyczny miejsca BclI wyniósł 27,8%; wskaźnik diagnostyczny STR w intronach 13 i 22 wynosił odpowiednio 28,6% i 29,4%; wskaźnik diagnostyczny DXS52 wynosił 81,3%, a zatem hemofilia Test nośnika i prenatalna diagnoza choroby A mogą najpierw wykryć inwersję intronu 22, jeśli wynik jest pozytywny, można postawić diagnozę; jeśli inwersja intronu 22 jest ujemna, można zastosować gen FVIII. , wyniki wielu polimorfizmów poza miejscem do analizy powiązań genetycznych w celu ustalenia ostatecznej diagnozy.
Diagnostyka różnicowa
1. Klasyczną hemofilię A należy odróżnić od choroby von Willebranda (vWD). Występowanie vWD związane jest z brakiem czynnika von Willebranda Fvon in vivo (vWF). Dlatego poziom FVIII w vWD Zmniejsza się również, chociaż wielkość spadku może być różna u różnych pacjentów.W przypadku pacjentów z vWD, chociaż synteza FVIII jest normalna, okres półtrwania w organizmie jest skrócony z powodu zmniejszenia poziomu jego vWF. Inne objawy vWD i hemofilii A wydłużają czas krwawienia, zmniejszają poziom antygenu vWF i zmniejszają agregację płytek indukowaną ristocetyną.
2. Różnicowanie od innych dziedzicznych chorób z niedoborem czynnika krzepnięcia, które powodują wydłużenie APTT, takich jak czynnik krzepnięcia IX, XI, XII, kalikreina, brak kininogenu o wysokiej masie cząsteczkowej itp., Tylko niedobór czynnika VIII i niedobór czynnika IX Objawy przypadków mają cechy dziedziczenia sprzężonego z chromosomem X i tylko brak tych dwóch czynników wpłynie na stawy, powodując niepełnosprawność. Hemofilia A może być odróżniona od hemofilii B tylko poprzez specjalne badania. Mężczyźni lub kobiety mogą rozwinąć czynniki. XI ma niedobór i ma mniej krwawień niż klasyczna hemofilia.
3. Ze względu na FXII, kalikreinę, brak kininogenu o wysokiej masie cząsteczkowej nie powoduje krwawienia klinicznego, dlatego łatwo jest odróżnić od klasycznej hemofilii, łagodnej hemofilii (poziom FVIII jest prawie normalny 15%) musi wziąć pod uwagę brak kombinacji czynnika V i czynnika VIII, chociaż zarówno APTT, jak i PT mogą mieć nieznaczne wydłużenie, chyba że wzięto pod uwagę brak takiego połączenia, często nie uzyskuje się prawidłowej diagnozy.
4. Nabyty niedobór czynnika VIII (nabyta hemofilia A) jest spowodowany obecnością we krwi przeciwciał anty-FVIII Objawy kliniczne krwotoku są takie same jak w przypadku hemofilii metylowej, ale stopień krwawienia jest często cięższy. Może wystąpić u zdrowych osób, kobiet (szczególnie w czasie ciąży), osób starszych i niektórych pacjentów z chorobami immunologicznymi, testami laboratoryjnymi, przedłużonym APTT i S-CT, a ta sama ilość normalnego osocza nie może skorygować braku STGT lub BTGT, Miano inhibitora (przeciwciała anty-FVIII) jest zwiększone, a identyfikacja jest dokładniejsza, a metoda Bethesda jest powszechnie stosowana w badaniu klinicznym.
Obserwuje się hemofilię A, hemofilię B i niedobór czynnika XI oraz cechy laboratoryjne nabytej hemofilii A.
5. Choroba krwotoczna spowodowana hemofilią A i krwiakiem może być mylona z innymi chorobami, gdy diagnoza nie jest jasna, na przykład krwiak głęboki jest mylony z ropnymi zmianami i wykonuje się nacięcie i drenaż; Błędnie zdiagnozowany krwiak zaotrzewnowy jako ropień wyrostka robaczkowego; hemofilia Krwawienie stawowe mylono z gruźlicą, zapaleniem stawów i mięsakiem itp., Krwotok lub krwiak spowodowany hemofilią mylono z guzem nerki, chorobą płuc, wrzodem przewodu pokarmowego, krwotokem śródbrzusznym Zgłaszano perforację wrzodów, niedrożność jelit itp.
