Infekce Helicobacter pylori u dětí
Úvod
Úvod do infekce Helicobacter pylori u dětí Protože australští vědci Marshall a Warren úspěšně izolovali a kultivovali Helicobacter pylori (Hp) z žaludeční sliznice pacientů s chronickou gastritidou v roce 1982, velké množství studií od dospělých potvrdilo, že Hp je spojena s mnoha horními gastrointestinálními chorobami a Hp je chronická aktivita. Hlavním patogenním faktorem gastritidy je důležitý faktor v patogenezi peptického vředu. Dlouhodobá infekce Hp je také spojena s výskytem adenokarcinomu žaludku a lymfomu lymfatické tkáně spojené se žaludeční mukózou (MALT). Klinické studie zjistily, že eradikace Hp může významně snížit míru recidivy peptického vředového onemocnění a může také zvrátit nebo dokonce zmizet průběh žaludečního MALT lymfomu. U některých pacientů s chronickou gastritidou může také zlepšit příznaky refrakterní dyspepsie. Lze říci, že objev a výzkum Hp posunul diagnózu a úroveň léčby gastrointestinálních chorob na novou úroveň. Základní znalosti Podíl nemoci: 0,005% Vnímaví lidé: děti Způsob infekce: neinfekční Komplikace: anémie, peptický vřed, atrofická gastritida, rakovina žaludku, žaludeční vředy, dvanáctníkový vřed, bolest břicha, nadýmání
Patogen
Příčiny infekce Helicobacter pylori u dětí
Příčina:
V současnosti velké množství údajů podporuje Hp jako patogen chronické gastritidy: Protože Hp vstupuje do těla a hlavně se usazuje v žaludeční sliznici, je detekční rychlost Hp u pacientů s chronickou gastritidou vysoká a téměř normální Hp není detekován v normálním žaludečním hlenu. Počet kolonizací Hp je přímo úměrný počtu infiltrací leukocytů do žaludeční sliznice a pozitivně koreluje se stupněm zánětu. Hlavní složkou zánětlivé aktivity u dospělých gastritidů jsou neutrofily. Zdroj infekce a cesta přenosu Hp jsou stále nejasné. Neexistuje žádný přirozený hostitel. Kromě lidí jsou přirozené infekce pouze u primátů. Více důkazů dokazuje, že Hp je přenos z člověka na člověka. Dosud však nebyly učiněny žádné pozitivní závěry ohledně zdroje a cesty přenosu Hp.
Patogeneze:
Přesná patogeneze Hp je stále nejasná. Kromě virulenčních faktorů bakterií hrají roli imunitní odpověď hostitele a účinky na životní prostředí. V posledních letech studie zjistily, že patogenní mechanismus Hp závisí na virulenci bakterií ( Kolonizační faktory a patogenní faktory, spirála a pohyblivost Hp, schopnost přizpůsobit se enzymům a proteinům a adheze k buňkám a sliznicím, což jim umožňuje přežít v dutině žaludku, jejich sekretovaným toxinům a indukovaným zánětlivým mediátorům, Přímo ničí žaludeční mukózní bariéru, což vede k poškození žaludeční mukózy.
Faktor virulence
Mezi virulenčními faktory je motilita jedním z nejzákladnějších faktorů kolonizace Hp na povrchu žaludečního hlenu. Na jednom konci Hp buněk jsou 2 až 6 bičínek, které aktivují Hp, pronikají do hlenové vrstvy a speciální druh Hp. Adhezin může přilnout Hp k epiteliálním buňkám žaludku nebo dvanáctníku, což způsobuje povrchovou deformaci těchto buněk, změny cytoskeletu a adheze Hp k žaludeční sliznici je hlen, který zabraňuje bakteriím protékat během transportu potravy a nadále teče. Vzhledem k tomu, že Hp je specificky kolonizován v žaludeční tkáni, je nutné ztratit vrstvu. Proto se předpokládá, že na povrchu žaludečních epitelových buněk jsou specifické receptory, jako je například antigen krevních skupin lewisb.
Močovina je hlavním kolonizačním faktorem Hp. Množství ureázy syntetizované pomocí Hp je velmi velké. Amoniak produkovaný močovinou rozkládající močovinu může neutralizovat kyselinu chlorovodíkovou. Toto přechodné nízké kyselé a vysoké pH umožňuje bakteriím hladce procházet žaludečním hlenem. Vrstva se dostane na povrch sliznice a kolonizuje a přežívá v tomto alkalickém mikroprostředí, zatímco zvýšení amoniaku produkovaného ureázou je také toxické pro žaludeční sliznici.
2. Patogenní faktory
Mezi patogenními faktory je role cytotoxinu znepokojivá: u dospělých bylo hlášeno 60% kmenů Hp a u dětí bylo u 40% až 70% kmenů Hp zjištěno, že mají gen asociovaný s cytotoxinem (cagA). 120-140 kD protein (cytotoxin-asociovaný protein A, cagA), cagA protein má velmi vysokou detekční rychlost u pacientů s peptickým vředem a střední až těžkou gastritidou, cagA nemá buněčnou vakuolární aktivitu, ale je spojen s buněčným vakuolizujícím toxinem V souvislosti s expresí byl vakuový cytotoxin (vacA), kódovaný genem vacA, poprvé objeven Leunkem a kol., Kultivační médium Hp obsahuje látku a kultivační filtrát bakterie je kultivován společně s různými buňkami. Některé buňky, jako jsou Hela buňky, jsou vakuolární degenerace, takže se nazývají buněčné vakuolační toxiny. VacA je silně aktivován při pH <6 až pH 1,5 a má silnou odolnost vůči pepsinu při pH 2,0. Ve střevě aktivovaná vacA způsobuje vakuolizaci duodenálních epiteliálních buněk předtím, než je štěpena některými proteázami ve střevu, což způsobuje duodenální ulceraci v nepřítomnosti Hp v duodenu. Vřed, který tvoří hypotézu o netěsnosti střechy tvorby dvanáctníku vředů, pro cagA, detekci vacA a analýzu genů virulence Hp u dětí s parciálními gastroduodenálními chorobami, výsledky rovněž souvisí s literaturou. Podle zprávy může 68,18% dětí s gastritidou infikovanou Hp detekovat protilátku CagA, ale 68,96% dětí s duodenálním vředem může měřit jak cagA, tak vacA, což naznačuje, že vacA je spojena s dětským peptickým vředem.
Prevence
Prevence infekce Helicobacter pylori u dětí
Vzhledem k tomu, že zdroj infekce a cesta přenosu infekce Hp není dobře známá, přinesla potíže při prevenci infekce Hp. Od 90. let se výzkum vakcíny proti Hp výrazně posunul a očekává se, že v blízké budoucnosti bude vakcína přijata. Prevence a léčba infekce Hp se stane skutečností a v budoucnu může být také důležitým opatřením pro prevenci a léčbu nemocí souvisejících s Hp.
Komplikace
Komplikace infekce Helicobacter pylori u dětí Komplikace anémie peptický vřed atrofická gastritida rakovina žaludku žaludeční vřed duodenální vřed nadýmání bolest břicha
Dokud dítě není hubené, nedostatek výživy a anémie, může být komplikován peptickým vředem, může způsobit gastrointestinální krvácení, malou až atrofickou gastritidu a rakovinu žaludku.
1. Krvácení: Komplikace krvácení mohou být někdy prvním příznakem vředů bez jakéhokoli prodromálního výkonu. Hemateméza se obvykle vyskytuje u žaludečních vředů. Pliva je podobná kávě, zatímco melena je častější u dvanáctníkových vředů. Po dlouhou dobu může jakýkoli druh vředů současně vykazovat hematemézu a melenu. V dětském žaludku je odtok krve spíše svědčivý pro žaludeční krvácení, ale ti s negativním odtokem nemohou vyloučit možnost duodenálního vředu kombinovaného s krvácením (protože krev nemůže projít pylorusem) Zpět do žaludku).
2. Perforace: Perforace je mnohem méně častá než krvácení, perforace vředů se často objevuje náhle, bez jakýchkoli symptomů aury, malý počet dětí nemůže mít v anamnéze vředy, komplikace perforace jako první symptom potvrzené chirurgickým výkonem jako dvanáctníkový vřed s perforací, V časném novorozeneckém období lze také pozorovat perforaci žaludečních vředů se stresem, které vykazují bolest břicha a nadýmání.
Příznak
Příznaky infekce Helicobacter pylori u dětí Časté příznaky Podráždění kýly, distenze břicha, únava, dyspepsie, nauzea, peptický vřed, anorexie, bolest břicha, bolesti břicha
Hp je chronický zdroj infekce, po vstupu do těla se usazuje hlavně v žaludeční sliznici, což má za následek řadu patologických změn, které vedou k různým klinickým důsledkům. Mezi běžné nemoci související s Hp patří u dětí především chronická aktivní gastritida, dvanáctníkový vřed a žaludek. Vředy, vzácný žaludeční MALT lymfom, vzácný žaludeční adenokarcinom, takže klinické projevy infekce po Hp jsou příznaky těchto nemocí, jako je bolest břicha, plnost, časná sytost, anorexie nebo krvácení do horní části gastrointestinálního traktu.
1. Děti s chronickou gastritidou
Existují různé stupně dyspeptických symptomů, závažnost klinických projevů se liší a průběh onemocnění se prodlužuje. Hlavním projevem je opakovaná bolest břicha, žádná zjevná pravidelnost, obvykle zhoršená po jídle, bolest není přesná, většinou v pupeční šňůře a bolest břicha dítěte může být Změňují se pouze projevy neklidu a normálního chování při jídle, starší děti se symptomy jako dospělí, často si stěžují na bolesti břicha, následuje kýla, časná sytost, nevolnost, diskomfort v horní části břicha, kyselý reflux, jíst tvrdě, studené, kořeněné jídlo nebo nachlazení, pokles teploty Když to může způsobit nebo zhoršit příznaky, některé děti mohou mít ztrátu chuti k jídlu, únavu, hubnutí a závratě. Děti s erozí žaludku mohou mít černé stolice a příznaky nejsou zřejmé.Někkost může být v horní části břicha nebo v pupku. Rozsáhlé.
2. Pediatrický peptický vřed
Klinické projevy jsou různé a příznaky různého věku jsou zcela odlišné.
(1) Novorozenecké období: hlavní rysy náhlého krvácení nebo perforace z horní části gastrointestinálního traktu, často akutního nástupu, zejména v důsledku hematemézy, krve ve stolici, břišní distenze a peritonitidy, snadno misdiagnozovaných, toto období je většinou akutní stres Vřed, úmrtnost je vyšší, nejčastější incidence 24 až 48 hodin po narození.
(2) Kojenec a dítě: V tomto období mohou mít děti s akutním nástupem, podrážděností, špatnou chutí k jídlu, náhlou hematemézou, melenou ztrátu chuti k jídlu v rané fázi, opakované zvracení a bolesti břicha, zpomalení růstu.
(3) Věk předškolního věku: Příznaky bolesti břicha v tomto období jsou zřejmé, většinou se vyskytují v pupeční šňůře, s občasnými záchvaty a vztah ke stravě není jasný, nevolnost, zvracení, kyselý reflux, anémie a krvácení do horní části gastrointestinálního traktu jsou také častější.
(4) Školní věk: S rostoucím věkem jsou klinické projevy blízké dospělým, bolesti břicha nad příznaky, zejména bolesti břicha v pupeční šňůře, někdy bolest v noci nebo kyselý reflux, kýla nebo chronická anémie a několik lidí projevuje bezbolestnou černou stolici. Mdloby, dokonce i šok.
Přezkoumat
Vyšetření infekce Helicobacter pylori u dětí
Existuje mnoho diagnostických metod pro Hp, které jsou hlavně rozděleny do dvou kategorií: přímá metoda a nepřímá metoda.
1. Přímá kontrola bakterií
Hp v žaludeční sliznici byl přímo detekován kulturou, PCR a histologií.
(1) Kultivační metoda: Kultura Hp gastroskopickými kleštěmi pro Hp kulturu je nejpřesnější diagnostickou metodou, kterou lze použít jako zlatý standard pro ověření dalších diagnostických testů. Kromě toho může také poskytnout bakteriálním testům citlivost na léky, které povedou klinický výběr léčiv. Zejména při selhání léčby nebo v zemích a regionech, kde je vysoká rezistence vůči Hp, se metoda kultivace Hp vyznačuje vysokou specifičností, ale citlivost je střední, provozní technologie je obtížná a trvá dlouho a kultivace trvá 3–6 dní, i když Je to zkušený experimentátor a úspěšnost kultivace je pouze 75% ~ 95%, což ovlivňuje růst Hp. Existuje mnoho faktorů, které způsobují falešně negativní výsledky, jako jsou kultivační vzorky bez Hp, polykání povrchového anestetika během gastroskopie, biopsie zachycuje kontaminaci Nebo nedávno použitá antibiotika nebo tinktury, které mohou inhibovat bakteriální růst, a doba naočkování vzorků souvisí také s tím, zda je kultivační médium čerstvé.
Nedávno bylo hlášeno, že Hp může být kultivován také z lidských výkalů, ale k získání bakterií musí být odstředěn v prostředí s mikro kyslíkem, protože může být detekován pouze ve stolici 50% kolonizovaných pacientů s Hp, takže tato neinvazivní metoda Je zapotřebí dalšího výzkumu.
(2) Metoda dělení tkáňových řezů: Další metoda přímého zkoumání Hp může poskytnout informace o histomorfologii, protože Hp se usazuje v mukózní vrstvě lidského žaludečního hlenu, na povrchu epiteliálních buněk, za normálních okolností neexistují v této části žádné další bakterie, takže Podle morfologických charakteristik a distribučních charakteristik tkáňových řezů (přítomnost Helicobacter v žaludečním hlenu a žaludeční dutině) je to spolehlivá metoda diagnostiky infekce Hp. Histologické vyšetření se vyznačuje vysokou citlivostí a současným Proveďte patologické vyšetření a můžete data trvale ukládat. Existuje mnoho způsobů barvení, včetně barvení HE, barvení Gramem, barvením červeného uhličitanu, barvením WS (Warthin-Starry), barvením Giemsa, barvením Gramem, detekční rychlostí. Nízká je téměř zbytečná, standardní HE barvení dokáže detekovat Hp, ale není to spolehlivá metoda. WS stříbro stříbrem je dobrá technologie. Ačkoli jsou ceny a technické požadavky vysoké, kvůli efektivní detekci je klinická aplikace běžnější a náklady na barvení Giemsa jsou vyšší. Méně se někteří autoři domnívají, že tato metoda má stejnou kvalitu jako WS stříbro.
Kromě rutinních histologických vyšetření existují imunochemické a imunofluorescenční metody, ale použití imunofluorescenčních a imunologických protilátek ztěžuje inspekce a neposkytuje informace nad rámec rutinních histologických nálezů, a proto je nelze běžně používat. , nejčastěji používané v laboratorním výzkumu.
(3) Přímé barvení stěrem: Hp byl přímo vyšetřen mikroskopem s fázovým kontrastem na žaludeční hlen aplikovaný na sklíčko, obarvený akridinovou oranžovou barvou, obarven Gram a obarven Giemsa.
(4) PCR (polymerázová řetězová reakce): PCR je další metoda pro detekci přítomnosti nebo nepřítomnosti Hp. Je charakterizována rychlou detekcí Hp ve vzorcích čerstvého hlenu žaludku, jakož i detekcí vzorků biopsie vložených do parafinu, PCR primerů. Je specifický pro všechny kmeny Hp a je vysoce specifický. Ve srovnání s rychlou ureázou, kulturou a histologií je PCR vysoce citlivá, ale některé skryté faktory mohou ovlivnit tuto vysokou citlivost a specificitu, jako je Čištění endoskopií a biopsií, nedostatek dezinfekce vede ke kontaminaci DNA, takže se snižuje specificita, faktory, které snižují citlivost, jsou přítomnost bakteriální kolonizace nebo inhibiční faktory PCR v žaludeční sliznici. PCR lze použít pro klinickou diagnostiku infekce Hp. Epidemiologické výzkumy, výzkum molekulární genetiky Hp.
2. Nepřímé zkoumání bakterií
Pomocí biologických charakteristik bakterií, zejména schopnosti Hp hydrolyzovat močovinu na dechový test, ureázový test, sérologické faktory nemohou poskytnout základ pro existenci bakterií, nelze ji použít k diagnostice současné infekce, zejména pro screening nebo populární V případě lékařů je důležité, aby si kliničtí lékaři vybrali vhodnou metodu pro pacienta podle podmínek nemocnice, v současné době se kloubní metoda používá hlavně pro diagnostiku.
(1) Rychlý test ureázy: Protože Hp je jediná bakterie v lidském žaludku, která může produkovat velké množství ureázy, infekce Hp může být diagnostikována detekcí ureázy. Urease rozkládá močovinu v žaludku za vzniku amoniaku a oxidu uhličitého, což snižuje koncentraci močoviny. Koncentrace amoniaku je zvýšena a na základě tohoto principu byly vyvinuty různé detekční metody.
Rychlý ureázový test biopsie žaludeční sliznice je v klinické praxi nejpoužívanější metodou, má výhody jednoduchosti, praktičnosti, rychlosti a citlivosti, avšak vzhledem k počtu bakterií, kdy je počet Hp v biopsické tkáni malý, je náchylný k falešně negativním. Po léčbě tinkturou, ampicilinem a dokonce i antagonisty H2 receptoru je citlivost ureasového testu významně snížena, a proto se tato metoda používá hlavně pro počáteční detekci infekce Hp. V současné době existují dvě metody.
Metoda indikátoru 1pH: činidlo obsahuje močovinu a indikátor pH (jako je žlutá barva, když fenolová červeň pH 6,8, růžová při pH 8,4), vzorek odebraný ze žaludku je obvykle kyselý (pH <6,0), za normálních okolností Barva reagentu se nezmění: Pokud je v žaludku infekce Hp, když je do sliznice vložen vzorek sliznice, ureasa produkovaná Hp rozkládá močovinu na amoniak, takže hodnota pH stoupá a reagencie zbarví do růžova.
2 Analytická chemie: Konečný produkt Hp ureázy je detekován analytickou chemií. Protože pozitivní barevná reakce nezávisí na změně pH v činidle, lze se vyhnout některým falešným negativům způsobeným faktory pH. Fujian Sanqiang Biochemical Co., Ltd. Souprava CPUT patří k této metodě a může semikvantitativně indikovat rozsah infekce Hp.
(2) Dechový test: značení močoviny radionuklidem, měření množství CO2 ve výdechu po perorálním podání, může nepřímo odrážet množství ureázy, je neinvazivní test a dechový test je rychlý, spolehlivý, bezpečný a bezbolestný. Výhody jsou vhodné pro rozsáhlé epidemiologické výzkumy, které naznačují, zda v současné době existuje infekce Hp, než aby byla infikována, takže je lepší než sérologické vyšetření. Některé studie zjistily, že po 2hodinovém užívání citronanu bizmutu na bázi želatiny můžete vidět Množství 14CO2 je významně sníženo, takže je citlivým indikátorem pro terapeutické pozorování. Je také ideální metodou pro následné sledování. Dechový test je rozdělen na dechový test močoviny 13C a 14C- podle různých markerů. Urea dechová zkouška.
(3) 13C-močovinový dechový test: subjekt odebral perorální 13C-močovinu 5 mg / kg, poté odebral vzorek dechu každých 10 minut po dobu 3 hodin, pokud je v žaludku infekce Hp, perorální roztok 13C-močoviny v ureáze Při této akci se rozloží na 13CO2, vydechuje absorpcí gastrointestinálním traktem a odebrané vzorky plynu se analyzují pomocí hmotnostního spektrometru pro výpočet obsahu 13CO 2. V případě infekce Hp stoupá 13CO2 20 minut po orálním testovacím roztoku a stoupá do 100 minut. Při nepřítomnosti infekce Hp nedochází k výdechu 13CO2, 13C jsou stabilní nuklidy, žádná radioaktivita a lze je opakovaně kontrolovat, ale měření 13CO2 je komplikovanější a je vyžadován hmotnostní spektrometr, což je nákladné a většina nemocnic nemůže provádět.
(4) 14C-močovinová dechová zkouška: Aby se překonaly nevýhody komplikované operace a vysokých nákladů na dechovou zkoušku 13C-močoviny, používá se 14C-močovina k nahrazení 13C-močoviny a získá se stejný uspokojivý účinek. Může být detekován kapalinový scintilační počítač pro 14C. Nevýhodou je, že 14C má určitou radioaktivitu a není vhodný pro těhotné ženy a děti.
Faktory ovlivňující přesnost dechového testu: Nejčastější příčinou falešně negativních výsledků je dechový test s antibiotiky, expektorancemi nebo omeprazolem (obvykle se nevyžaduje alespoň 1 měsíc po ukončení léčby); následuje močovina Vyprázdnění žaludku je příliš rychlé nebo sběr vzorků je příliš pozdě, falešně pozitivním výsledkem je přítomnost bakterií s ureázovou aktivitou v těle nebo v ústní dutině.
Avšak dechový test může poskytnout pouze informace o Hp, ale nedokáže rozlišit onemocnění zažívacího traktu, nemůže nahradit gastroskopii, nemůže být použit jako počáteční metoda hodnocení u dětí s horními gastrointestinálními příznaky.
(5) Sérologické vyšetření: Sérologická diagnóza Hp je neinvazivní a nepřímá metoda, používaná hlavně pro epidemiologii nebo screening, a nemůže být použita jako výchozí diagnostický nástroj pro infekci Hp, pokud není kombinována s jinými metodami, základem sérologického vyšetření. Hp má schopnost indukovat lokální a systémové imunitní odpovědi Hp protilátku lze detekovat bakteriální aglutinací, vazbou komplementu a ELISA ELISA je jednoduchá díky jednoduché operaci, rychlé diagnostice, nízké ceně a vysoké citlivosti. Více.
Existují dva typy metod ELISA:
1 Kvalitativní test: vyjádřený v jin nebo pozitivní, nejen pro sérum, ale také pro sliny, dásní sekrece, zejména pro děti. Nevýhodou je, že falešně pozitivní míra je vysoká, takže pozitivní výsledek musí být často doplněn jinou pozitivní metodou.
2 Kvantitativní test: Je testován strojem a výsledek je přesnější, lze jej také použít pro následné vyšetření po ošetření.
Sérologické testy jsou ideálním skríningovým testem, protože jsou neinvazivní a snadno použitelné u dětí. U dětí, protože infekce Hp je nižší než u dospělých, jsou pozitivní nálezy pro diagnostiku užitečnější než dospělí. V literatuře je uveden obsah protilátek IgG u dětí. Existuje určitá korelace s počtem bakterií nebo závažností histologie gastritidy, ale sérologie nemůže být použita jako jediný diagnostický test a vzhledem k pomalému poklesu protilátek po eradikaci Hp nemůže být použita pro okamžité sledování po antibakteriální terapii.
Krevní Hp imunoblotting: Hp-IgG protilátka, cagA, vacA proteinová protilátka, lze použít k rozlišení typu infikovaného kmene, ale je to drahé.
Rutinní vyšetření a B-ultrazvukové vyšetření se běžně provádějí, s výjimkou některých chronických onemocnění, jako je tuberkulóza a hepatitida.
Diagnóza
Diagnostika a diagnostika infekce Helicobacter pylori u dětí
Diagnóza
Charakteristické jsou klinické projevy chronické gastritidy a vředů, které se opírají hlavně o laboratorní vyšetření a diagnostiku.V červenci 1999 se v Kunmingu konala druhá konference o dětské trávicí endoskopii a chorobách zažívacího ústrojí a diskutovala se o diagnóze infekce Hp. A kritéria léčby jsou následující:
Diagnostická kritéria infekce Hp:
1. Kultura pozitivní.
2. Zbarvení řezu vidělo velké množství typických bakterií.
3. Sekce viděla malé množství bakterií, ureázový test, 13C-močovinový dechový test, sérologické Hp-IgG, Hp nukleové kyseliny jakékoli dvě pozitivní.
4. Ti, kteří vezmou antibiotika v rámci výše uvedeného testu, mohou být falešně negativní.
Kritéria eradikace Hp: stažení na více než 1 měsíc k přezkoumání, výše uvedené vyšetření se ukázalo jako negativní pro radikální léčbu.
Diferenciální diagnostika
Na rozdíl od chronické gastritidy, duodenálního zánětu a vředů se určuje hlavně výsledky laboratorních testů. Hp má vysokou ureázovou aktivitu, může rozložit močovinu na produkci NH + 4 a nepřímo posoudit, zda existuje infekce Hp měřením přítomnosti nebo nepřítomnosti NH + 4. Pacientovi bylo perorálně podáno močovinu 14 C. Pokud došlo k infekci Hp, pacient po 20 minutách vydechoval plyn 14 CO2 a bez Hp nevydechoval žádný 14CO2. Anti-Hp IgG nebo anti-Hp IgA v séru nebo ve slinách byly detekovány pomocí ELISA na specificitu a citlivost.
