Queratitis por Acanthamoeba
Introducción
Introducción a la queratitis por Acanthamoeba La queratitis por Acanthamoeba (AK) es una nueva queratopatía infecciosa causada por los protozoos de Acanthamoeba, descubierta por primera vez en 1973, y el número de casos ha aumentado año tras año en los últimos años. Debido a las complicadas manifestaciones clínicas de la enfermedad, es difícil de diagnosticar y tratar, y a menudo se diagnostica erróneamente como queratitis por herpes simple o queratitis micótica, por lo que es necesario fortalecer la comprensión y la investigación de esta enfermedad. Conocimiento basico La proporción de enfermedad: 0.8% Personas susceptibles: en su mayoría personas jóvenes y sanas, la mayoría tiene antecedentes de uso de lentes de contacto o traumatismos oculares Modo de infección: propagación por contacto Complicaciones: glaucoma, disco óptico, edema, atrofia óptica, neuropatía óptica opresiva, desprendimiento de retina, coroiditis
Patógeno
La causa de la queratitis por Acanthamoeba
(1) Causas de la enfermedad
Vida autóctona patógena La ameba es una estructura unicelular de protozoos, que se encuentra ampliamente en entornos naturales, como agua dulce, agua salada, tierra, polvo en el aire, suciedad, descomposición de plantas y desechos humanos y animales, en la bañera, filtración de aire. La ameba se ha aislado de la torre de enfriamiento de agua, lentes de contacto y solución de caja de espejo La vida autógena patógena de la ameba no solo puede vivir en la naturaleza, sino también proliferar en el huésped de sangre caliente. Se llama organismo anfibio y pertenece a un parásito facultativo.
Acanthamoeba
Es más común en el suelo o en la fuente de agua contaminada con heces, y tiene un trofozoíto y un período quístico. El trofozoíto es una forma de actividad e infección de Acanthamoeba. Es oblongo y tiene un diámetro de 15 a 45 m. Muchos procesos espinosos, llamados pseudopodos similares a la columna vertebral, generalmente se basan en bacterias y otros microbios para la alimentación, y se propagan de manera dividida en dos. El ciclo reproductivo promedio es de aproximadamente 10 h (6-24 h). Cuando las condiciones ambientales no son adecuadas. El trofozoíto se vuelve más pequeño y segrega una pared gruesa de doble pared para formar un quiste.
La cápsula es redonda y tiene un diámetro de 10 a 25 m. La pared interna es lisa y poligonal. La pared externa a menudo está arrugada. Las paredes interna y externa están conectadas entre sí para formar un agujero en la columna vertebral. Es un canal para el metabolismo del quiste, y la cápsula es resistente al ambiente externo. Fuerte, no sensible a los medicamentos antibacterianos generales, cloruros, desinfectantes químicos, etc., puede sobrevivir durante varios años en el entorno natural, la cápsula puede flotar en el aire y los quistes se han aislado de la nasofaringe de individuos asintomáticos. Cuando las condiciones ambientales son apropiadas, especialmente cuando los nutrientes son suficientes, los quistes se convierten en trofozoítos en 3 días.
Los protozoos de Acanthamoeba se consideraban previamente como protozoos no patógenos, y se descubrió en 1958 que Acanthamoeba puede causar infecciones fatales en animales. Se ha confirmado que Acanthamoeba puede causar encefalitis granulomatosa en humanos. Y queratitis.
Actualmente se encuentran 25 especies de Acanthamoeba, de las cuales al menos 8 especies (A. castellanii, A. culbertsoni, A. hatchetti, A. lugdunensis, A. polyphaga, A. quina, A. rhysodes, A. Griffini) puede causar queratitis en humanos.
2. Nergen
Los protozoos de F. striata se crían en agua dulce y también pueden causar infección corneal humana.El trofozoíto activo es largo amebiano, de 7 m × 20 m, con un gran pseudopodo en un extremo, nutritivo en un ambiente inadecuado. El cuerpo puede cambiarse a un tipo de flagelo con dos o incluso dos flagelos. También puede convertirse en un quiste. El flagelo no se divide y no forma una encapsulación. La cápsula del N. falciparum es más pequeña y tiene un diámetro de 9 m. La pared de la cápsula es lisa y porosa. En condiciones adecuadas, el tipo flagelar y el quiste se pueden convertir en trofozoítos.
3. Clasificación de Acanthamoeba
(1) Clasificación morfológica: en 1977, Pussard y Pons se dividieron principalmente en 18 especies y 3 grupos según la morfología del quiste. La Acanthamoeba patógena pertenecía principalmente al grupo II, y A.culbertsoni en el grupo III también tenía Patogenicidad
Las características principales del grupo I son: quistes grandes y trofozoítos, el diámetro promedio de la cápsula es 18 m, la distancia entre las paredes interna y externa de la cápsula es amplia, la cápsula externa es lisa o ligeramente arrugada, la cápsula interna tiene forma de estrella y las paredes interna y externa de la cápsula se encuentran en la pared interna. Conectado, el orificio de la columna cubre la cápsula interna.
Las características principales del grupo II son: el diámetro promedio de la cápsula es <18 m, la distancia entre las paredes interna y externa de la cápsula es grande o pequeña, la cápsula externa a menudo es ondulada o papilar, y la cápsula interna puede tener forma de estrella, poligonal y triangular, y algunas veces circular. O elíptica, no se forman protuberancias obvias, y la tapa de la columna se encuentra en la unión de las cápsulas interna y externa, y es una depresión formada por la cápsula interna.
Las características principales del grupo III son: el diámetro promedio de la cápsula es <18 m, la pared externa de la cápsula es delgada, con o sin arrugas, la cápsula interna es redonda y hay 3 a 5 brazos ligeramente sobresalientes. Es difícil clasificar el grupo III solo por las características morfológicas. 5 especies en el medio.
Como Acanthamoeba está ampliamente distribuida en la naturaleza y se divide en especies enfermas y no patógenas, es necesario identificar Acanthamoeba en el género y por debajo del nivel, pero la especie amorfa de Acanthamoeba tiene ciertas limitaciones. Por ejemplo, algunas condiciones externas pueden afectar la morfología de los quistes; las cápsulas son diferentes en diferentes períodos; las diversas formas en el mismo grupo son similares, especialmente los grupos II y III. Por lo tanto, muchos investigadores están buscando una clasificación más objetiva y precisa. Método
(2) Genotipado: actualmente se cree que el análisis de las diferencias en la secuencia de ADN es el método más prometedor para la tipificación exacta de Acanthamoeba en los siguientes niveles. Actualmente, se están realizando más estudios sobre la secuenciación del gen 18SrDNA.
Según la clasificación de 26 cepas de Acanthamoeba en 2004, el Beijing Eye Institute mostró que 25 cepas eran 18SrDNA genotipo T4, y solo 1 cepa era T3.
La identificación de genotipos es de gran importancia para el diagnóstico de laboratorio de la infección por Acanthamoeba. Muchos laboratorios han aplicado con éxito la tecnología de PCR para diagnosticar la queratitis por Acanthamoeba. Además de la morfología y el genotipado, existen laboratorios. Explorando la aplicación de isoenzima zimograma, anticuerpo monoclonal y otros métodos para la clasificación de Acanthamoeba, y luego estudie la relación entre varios tipos de Acanthamoeba y la patogenicidad y la eficacia del fármaco.
(dos) patogénesis
Vida autóctona patógena Los protozoos de la ameba pueden sobrevivir en la naturaleza sin la necesidad de parasitar en el huésped. Se alimenta de bacterias, hongos y otros protozoos. Alrededor del 25% de los trofozoítos transportan bacterias en la garganta de las personas normales. El intestino también ha aislado la acanthamoeba, una infección humana causada por la ameba patógena autoproducida, que es una infección de contacto accidental o una infección oportunista.
Los protozoos de ameba se unen primero al lipopolisacárido de la membrana de las células epiteliales corneales, se adhiere a la superficie del epitelio corneal y luego libera enzimas activas como la neuraminidasa, lo que hace que las células epiteliales corneales se vuelvan más delgadas y necrosis, causando la destrucción de la barrera epitelial. Invasión del estroma corneal, estudios recientes han encontrado que la ameba puede dañar las células epiteliales corneales de tres maneras:
Endocitosis
Similar a las células fagocíticas, fagocitosis directa de algunos componentes de la membrana celular.
2. Exocitosis espontánea.
En ausencia de un proceso de activación, los protozoos de ameba liberan espontáneamente enzimas líticas, lo que resulta en daño de la membrana epitelial.
3. Activación de membrana
Cuando la ameba está en contacto con el epitelio corneal, la combinación de la superficie de la membrana celular y el receptor o ligando de la superficie de la membrana epitelial activa el proceso de liberación de enzimas, causando daño a las células epiteliales.
Prevención
Prevención de queratitis por Acanthamoeba
Para los factores de riesgo de queratitis amebiana patógena viva espontánea, se deben tomar medidas preventivas apropiadas. En particular, se debe fortalecer la educación sobre el cuidado de los lentes de los usuarios de lentes de contacto. Se deben evitar estrictamente los lentes de contacto durante el sueño, y se debe evitar estrictamente evitarlos. Limpie la lente con agua del grifo o su propio líquido.
Complicación
Complicaciones de la queratitis por Acanthamoeba Complicaciones glaucoma disco óptico edema atrofia óptica neuropatía óptica opresiva desprendimiento de retina coroiditis
En algunos casos graves, puede ocurrir glaucoma refractario, y el segmento posterior del ojo rara vez se ve afectado, pero el edema del disco óptico, la neuropatía óptica, la atrofia óptica, el desprendimiento de retina, la inflamación coroidea y la formación de cicatrices maculares son visibles, e incluso la coroiditis coroidea contralateral es uniforme. Hay informes
Síntoma
Síntomas de queratitis por Acanthamoeba síntomas comunes dolor ocular úlcera corneal absceso queratitis
Vida autóctona patógena Los pacientes con queratitis amebiana son en su mayoría personas jóvenes y sanas, las proporciones masculinas y femeninas son iguales, la mayoría tienen antecedentes de desgaste de lentes de contacto o trauma ocular, la gran mayoría de la participación de un solo ojo, los pacientes individuales también pueden tener ambos ojos, El inicio es generalmente lento. La etapa temprana de la inflamación es principalmente la irregularidad del epitelio corneal, erosión epitelial áspera o repetida, que a veces muestra cambios pseudodendríticos. Los pacientes a menudo tienen dolor ocular obvio, y el grado a menudo excede los signos, formando síntomas. El fenómeno de la separación de los signos.
A medida que la enfermedad progresa, la inflamación invade gradualmente la capa del estroma, formando una placa, infiltración semianular o anular del estroma precorneal. Algunas lesiones son similares a los cambios en la queratitis discoide, y algunos pacientes pueden tener queratitis radial.
Si no se diagnostica y trata a tiempo, la infiltración corneal se convierte rápidamente en úlcera corneal, absceso matricial y formación de satélite y empiema de cámara anterior. En casos severos, se produce necrosis corneal. Si las úlceras corneales involucran el limbo, a menudo conduce al margen limbal. Inflamación, incluso escleritis.
En casos severos, ocurre más del 20% de las cataratas, especialmente después de una enfermedad prolongada, un trasplante de córnea y el uso a largo plazo de glucocorticoides.
Los protozoos de Acanthamoeba se pueden mezclar con bacterias, hongos y virus Las infecciones mixtas incluyen principalmente Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus y Corynebacterium.
El diagnóstico de queratitis por Acanthamoeba depende principalmente de las manifestaciones clínicas y las pruebas de laboratorio.El raspado corneal es un método comúnmente utilizado para el cultivo de Acanthamoeba.
Examinar
Examen de la queratitis por Acanthamoeba
1.10% de inspección de sello húmedo KOH
Tome el tejido de raspado corneal del área de la lesión, el cultivo de protozoos de Acanthamoeba o el material corneal extirpado quirúrgicamente, aplique o extienda sobre un portaobjetos de vidrio, agregue 1 gota de solución de KOH al 10% y muestre claramente la doble capa de los protozoos bajo el microscopio ordinario. La forma de la cápsula de pared es simple y práctica, y es adecuada para hospitales primarios.Los hospitales condicionales se pueden examinar mediante tinción Hemacolor, tinción triple, blanco Calcoflour y otros métodos de tinción.
2. Cultivo de protozoos Acanthamoeba
Coloque el tejido raspador corneal en la superficie de agar sin nutrientes al 2%. Coloque 1 gota de caldo de Escherichia coli vivo o muerto en la superficie del inóculo e incube en una incubadora a 35 ° C. Generalmente, se puede cultivar en 3 a 7 días. Los protozoos de Acanthamoeba pueden observar directamente los trofozoítos y quistes de los protozoos de Acanthamoeba y el proceso de la columna vertebral en el agua destilada tibia con un microscopio invertido.
3. Verificación de la técnica de inmunofluorescencia
En la actualidad, al menos 8 especies de Acanthamoeba pueden causar queratitis humana, y se pueden usar diferentes especies de anticuerpos contra los protozoos de Acanthamoeba para identificar las especies de Acanthamoeba por inmunofluorescencia indirecta. Actualmente, no existe tal especie en China. Los anticuerpos se pueden enviar a los Centros para el Control de Enfermedades de los EE. UU. (CDC) para su identificación si es necesario.
4. Examen de tinción de la sección patológica.
Se tomaron materiales de lesiones queratóticas perforadas con trefina y queratopatía resecada quirúrgicamente, fija, deshidratada, sumergida en cera, incrustada, seccionada y luego hematoxilina-eosina (HE) o ácido-Schiff periódico (PAS), la tinción mediante los dos métodos anteriores puede mostrar claramente la encapsulación de ameba quística en la córnea, y los resultados del raspado o cultivo de protozoos pueden verificarse mediante examen patológico, y la sección patológica puede confirmarse de acuerdo con las necesidades y condiciones. Los métodos de teñido como Giemsa, Wright, Triple y Calcoflour white se utilizan para el diagnóstico.
5. Inspección directa del microscopio confocal
Los métodos de examen mencionados anteriormente son todas técnicas de diagnóstico invasivas. Para obtener tejido, debe tomarse en el sitio de la lesión, causando cierto daño a la córnea. El microscopio confocal recientemente introducido puede observar directamente a los pacientes con AK, que no es invasivo, Un método de diagnóstico rápido temprano con alto contraste y gran aumento puede detectar imágenes de Acanthamoeba en varias capas de la córnea (desde el epitelio hasta el endotelio) y, a veces, incluso seudópodos que sobresalen de los protozoos de Acanthamoeba, o no Imagen regular de inflamación nerviosa y bordes gruesos.
Diagnóstico
Diagnóstico y diferenciación de la queratitis por Acanthamoeba
La vida espontánea patógena queratitis amebiana, la identificación temprana de las lesiones epiteliales de la queratitis monocística, la tasa de diagnóstico erróneo es mayor, las lesiones epiteliales del inicio inicial, hay una tendencia a prolongar el no curado, al mismo tiempo Los pacientes con antecedentes de trauma o uso de lentes de contacto deben sospechar mucho, y la citología de raspado corneal oportuna es útil para el diagnóstico diferencial. Cuando se produce infiltración y ulceración del estroma corneal, debe asociarse con queratitis discoide monosporosa. La identificación de queratitis bacteriana y fúngica, la historia de dolor ocular intenso o la aparición de queratitis radial han contribuido al diagnóstico diferencial. En los últimos años, la aplicación de microscopía confocal corneal ha sido un diagnóstico rápido temprano de queratitis por Acanthamoeba. Se proporcionan nuevos medios: a través del microscopio confocal corneal, se puede observar el quiste acanthamoe en la córnea viva, lo que es útil para el diagnóstico clínico, pero la microscopía confocal es negativa y no se puede negar por completo el diagnóstico clínico.
