Fenyloketonuria
Wprowadzenie
Wprowadzenie do fenyloketonurii Fenyloketonuria (PKU) jest dziedziczną chorobą spowodowaną niedoborem hydroksylazy fenyloalaniny (PAH) lub zmniejszoną aktywnością hydroksylazy fenyloalaniny, która jest zaburzeniem genetycznym w dziedzicznym metabolizmie aminokwasów. To jest bardziej powszechne. Wzorzec genetyczny tej choroby to autosomalne dziedziczenie recesywne, a objawy kliniczne nie są jednolite Główne cechy kliniczne to upośledzenie umysłowe, objawy psychiczne i neurologiczne, wyprysk, ślady zarysowań skóry oraz utrata pigmentu i zapach szczura oraz nieprawidłowy EEG. Jeśli dostępna jest wczesna diagnoza i wczesne leczenie, wyżej wymienione objawy kliniczne mogą nie wystąpić, inteligencja jest normalna, a zaburzenia EEG można przywrócić. Podstawowa wiedza Odsetek chorób: 0,002% Wrażliwi ludzie: więcej niż dzieci Tryb infekcji: niezakaźny Komplikacje: upośledzenie umysłowe
Patogen
Etiologia fenyloketonurii
Czynniki genetyczne (90%):
Choroba jest autosomalna recesywna, a zmutowany gen znajduje się na długim ramieniu chromosomu 12 (12q24.1). Mała mutacja tego genu może powodować chorobę, nie z powodu usunięcia genu, i jest spowodowana małżeństwem dwóch heterozygot. Choroby seksualne, potomstwo bliskich krewnych są częstsze, około 40% dzieci z rodzeństwem, z powodu mutacji genu hydroksylazy fenyloalaniny, co powoduje brak hydroksylazy fenyloalaniny w wątrobie, to jest Podstawowe biochemiczne nieprawidłowości choroby, jeśli pary zasad mutacji są różne, powodują poważne różnice w objawach klinicznych, które mogą objawiać się jako typowa PKU lub łagodna hiperfenyloalaninemia.
Patogeneza
Fenyloalanina (PA) jest niezbędnym aminokwasem, który bierze udział w tworzeniu różnych składników białkowych, ale nie może być syntetyzowany w ludzkim ciele. W normalnych okolicznościach około 50% spożywanego PA jest wykorzystywane do syntezy różnych rodzajów. Białko składnika, reszta jest zamieniana na tyrozynę pod wpływem hydroksylazy fenyloalaniny, a następnie przekształcana w dopę, dopaminę, adrenalinę, noradrenalinę i melaninę przez inne enzymy, fenyloalaninę Kwasowa hydroksylaza jest złożonym układem enzymatycznym, oprócz samej hydroksylazy, obejmuje również reduktazę dihydropteryny i koenzym tetrahydrobiopteryny, a każdy niedobór enzymu może powodować wzrost fenyloalaniny we krwi.
Gdy niedobór hydroksylazy PA jest fenyloalaniną, która nie bierze udziału w syntezie białka pierwszego etapu, jest przechowywana w osoczu i odkładana w tkankach całego ciała, w tym w mózgu, a fenyloalanina we krwi jest uwalniana poza próg nerkowy w celu wytworzenia aminokwasów fenyloalaniny. Mocz
Po zablokowaniu głównego szlaku PA (hydroksylacji) wtórny szlak metaboliczny PA jest kompensacyjnie nadaktywny, a ciężar właściwy PA przekształca się w fenylopirogronian, fenylomleczan, kwas n-hydroksyfenylooctowy i kwas fenylooctowy. Obejście metaboliczne odbywa się bardzo mało, więc zawartość tych metabolitów jest bardzo mała; gdy niedobór hydroksylazy PA, metabolity te osiągają nienormalnie wysoki poziom, nagromadzony w tkankach, osoczu i płynie mózgowo-rdzeniowym oraz duża ilość z moczu. Wydalany w celu wytworzenia fenyloketonurii.
1. Zgodnie z różnicą defektów biochemicznych można podzielić na:
(1) Typowy PKU: wrodzony niedobór hydroksylazy fenyloalaniny.
(2) utrzymująca się hiperfenyloalaninemia: stwierdzona w niedoborze izomerazy hydroksylazy fenyloalaniny lub heterozygotycznej fenyloketonurii, wzrost fenyloalaniny we krwi.
(3) przejściowa łagodna hiperfenyloalaninemia: częściej występująca u wcześniaków, spowodowana jest opóźnionym dojrzewaniem hydroksylazy fenyloalaninowej.
(4) Niedobór aminotransferazy fenyloalaninowej: Mimo że zawartość fenyloalaniny we krwi jest zwiększona, fenylopirogronian i kwas hydroksyfenylooctowy w moczu nie mogą być zwiększone, a tyrozyna we krwi nie zwiększa się po doustnym podaniu dużej ilości fenyloalaniny.
(5) Niedobór reduktazy dihydropteryny: całkowity lub częściowy brak aktywności enzymu, oprócz wpływu na rozwój mózgu, może powodować zwapnienie jąder podstawy.
(6) Wady syntezy dihydropteryny: brak dehydratazy metanolu i amoniaku lub innych różnych enzymów.
Typowe dzieci PKU mają normalny układ nerwowy od urodzenia Z powodu braku środków neuroprotekcyjnych u dzieci z homozygotami układ nerwowy jest narażony na fenyloalaninę przez długi czas. Jeśli matka jest homozygotyczna, poziom fenyloalaniny we krwi jest wysoki. Dzieci są heterozygotyczne, a uszkodzenie ośrodkowego układu nerwowego może wystąpić w macicy, co objawia się upośledzeniem umysłowym po urodzeniu.
Zwykłe PKU i niektóre łagodne i ciężkie warianty wczesny etap choroby można psychicznie zdegradować bez leczenia, prawdopodobnie mutację alleliczną, objawiającą się hiperfenyloalaninemią, bez fenyloketonurii Zaangażowany jest również układ nerwowy, a nawet niewielka liczba (około 3%) pacjentów kontroluje hiperfenyloalaninemię, nie może zapobiec postępowi chorób neurologicznych.
2. Badania biologii molekularnej Normalne ludzkie białko PAH ma fałd i ma miejsce wiązania żelaza Zachowanie struktury miejsca wiązania żelaza jest związane z seryną w pozycji 349 zlokalizowanej w strukturze 3D związanej z miejscem aktywnym. Ważna jest także stabilna polimeryzacja struktur serynowych i WWA oraz katalityczne właściwości WWA. Fusetti i wsp. Określili strukturę krystaliczną ludzkiego WWA (reszty 118–452) i stwierdzili, że każdy z tych enzymów oraz składowe strefy katalityczne i tetrameryczne Monomery pojawiają się jako kryształy tetrameru, a strefa tetramerizacji charakteryzuje się obecnością ramion wymiennych, które oddziałują z innymi gatunkami monomerycznymi, tworząc w ten sposób przeciwrównoległą spiralną cewkę i jest znacznie asymetryczna z powodu Obszar chelatujący, który powoduje spiralę spirali, jest spowodowany przez dwie naprzemienne konfiguracje, z których niektóre występują na styku obszarów katalitycznych i tetramerycznych.
Mutacje w różnych genach PAH mają różny wpływ na aktywność PAH i mają różny wpływ na strukturę PAH Camez i wsp. Ujawnili mutacje PAH z różnymi systemami ekspresji: Leu348Val, Ser349Leu, Val388Met powodują zwijanie defektów białka PAH, które będą mutowane. Ekspresja białka PAH w Escherichia coli wykazała niestabilność cieplną w porównaniu z białkiem PAH typu dzikiego, a przebieg czasowy degradacji był inny Bjorgo i wsp. Badali PAH 7 rodzajów mutacji punktowych błędnych, a mianowicie R252G / Q, L255V / S, A259V. / T i R270S, kolejną mutacją jest G272X. Gdy te zmutowane białka PAH ulegają koekspresji z maltazą jako białkiem fuzyjnym w Escherichia coli, udowodniono, że ludzkie białko PAH jest fałdowane i polimeryzowane do tego samego tetrameru / Zdolność dimerów jest wadliwa, większość z nich to nieaktywne agregaty, R252Q i R252G odzyskują katalitycznie aktywne tetramery i dimery, R252G odzyskuje niektóre dimery, a powyższe trzy mutacje powodują aktywność PAH Tylko 20%, 44% i 4,4% aktywności typu dzikiego, wyrażone in vitro przez sprzężony system transkrypcji-translacji, wszystkie zmutowane PAH odzyskały niefosfor o niskiej aktywności allospecyficznej Mieszanina chemokin i fosforylowanych form, wszystkie warianty białek PAH wyrażane przez mutacje w genie PAH mają wadę w oligomeryzacji, zwiększoną wrażliwość na restrykcję lizy białka in vitro i zmniejszoną stabilność w komórkach. Aktywność katalityczna jest również zmniejszona w różnym stopniu Wszystkie powyższe działania wydają się być spowodowane zaburzeniem struktury monomeru Zgodnie ze strukturą krystaliczną ludzkiego regionu katalitycznego PAH wpływ mutacji na fałdowanie i oligomeryzację monomeru zapewnia analizę. .
Są to korelacje między strukturą białka PAH a zmiennością aktywności spowodowaną niektórymi mutacjami genu PAH. 99% hiperfenyloalaninemii lub PKU jest spowodowanych mutacją genu PAH, tylko 1% jest spowodowany biosyntezą kofaktora lub Regeneracja jest spowodowana zaburzeniami. Mutacje genu PAH mogą obejmować egzony i introny. Mogą to być mutacje missense lub mutacje nonsensowne. Rodzaje mutacji są nieco zmutowane, wstawione lub usunięte, kodowanie zatrzymuje się wcześnie, splicing i polimorfizm oraz mutacje. Genotypy są homozygotami, heterozygotami i złożonymi heterozygotami. Scriver jest równoważny mutacji genu PAH poddanej przeglądowi w 1996 r. W 26 krajach na całym świecie 81 badaczy przeanalizowało 3986 zmutowanych chromosomów i zidentyfikowało 243 różnych mutacji. W marcu 1999 r. Zekanowski i wsp. Wskazali w artykule, że na świecie istnieje ponad 350 mutacji genu PAH Autor zbadał region regulacyjny enzymu PAH: część mutacji w eksonie 3 może powodować klasyczną PKU, łagodną PKU. I łagodna hiperfenyloalaninemia, ta ostatnia mutacja często znajduje się w resztach aminokwasowych 71-94, Wang Ning zauważył, że do kwietnia 1998 r. Globalna mutacja genu PAH wzrosła do 390, w naszym kraju 1996 Xu Ling W innych raportach zidentyfikowano ponad 20 mutacji PAH, co stanowi około 80% genu mutanta PAH. Większość uczonych uważa, że istnieje korelacja między genotypem mutacji PAH a fenotypem, z wyjątkiem kilku pacjentów. Guldberg i in. Niespójności między genotypami i fenotypami mutacji PAH mogą wynikać z metod stosowanych do badania mutacji lub różnic w klasyfikacji fenotypowej.
Mutacje genów PAH u pacjentów z PKU w różnych krajach i regionach są różne, a rozkład typów mutacji genu PAH w północnych i południowych Chinach jest również niespójny. Najczęstszą mutacją w podgrupie tureckich przodków jest IVS1O-11 G → A (według analizowanych alleli). 38% genów); mutacjami genu PAH u pacjentów z PKU w Rumunii były głównie Arg408Trp (47,72% alleli), Lys363fsdelG (13,63%) i Phe225Thr stanowiły 6,81%, a 3 mutacje stanowiły 70% zmutowanych alleli; Mutacja Arg408Trp u pacjentów z PKU stanowiła 54,9% Rozkład typów mutacji genu PAH w różnych regionach może odzwierciedlać wiele mechanizmów mutacji genu PAH, w tym efekt założyciela, dryf genetyczny i nadmierną zamianę. Hipermutowalność i wybór.
Powyżej znajduje się struktura genu PAH, natura oraz mutacje i mutacje spowodowane nieprawidłowościami białka PAH. Białko PAH ulega ekspresji w tkankach innych niż wątroba, w tym w nerkach, trzustce i mózgu oraz w poziomie PAH w nerkach. Struktura jest zgodna z tą w wątrobie, z wyjątkiem tego, że jego regulacja różni się od PAH w wątrobie, ale w równowadze fenyloalaniny w organizmie, PAH nerki może odgrywać pewną rolę.
Oprócz braku lub zmniejszenia aktywności PAH w wątrobie może powodować PKU, występują także zmiany w kofaktorach WWA, a głównym kofaktorem zaangażowanym w działanie PAH jest 5,6,7,8-tetrahydrobiopteryna (5,6). , 7,8-tetrahydrobiopterin), substancji niezbędnej do hydroksylacji fenyloalaniny, tyrozyny i tryptofanu. Genem odpowiedzialnym za kodowanie tej substancji jest syntaza 6-pirogronylotetrahydropteryny (6- Gen syntazy pirogronilotetrahydropteryny (PTPS), jeśli gen enzymu jest zmutowany, PTP jest niedobór, aktywność PAH może powodować PKU, nawet jeśli jest normalny, a innym enzymem, który powoduje PKU, jest reduktaza dihydropteryny. Patogeneza PKU obejmuje co najmniej trzy geny enzymów, z których jeden może powodować niedobór lub spadek aktywności PAH, co powoduje PKU.
3. Zmiany patologiczne w mózgu
Charakteryzuje się niespecyficznymi zmianami, zwykle zmiany istoty białej są oczywiste, i są mniej więcej następujące przypadki.
(1) Zaburzenie dojrzałości mózgu, płód zaczyna wykazywać nieprawidłowy rozwój mózgu w późnej ciąży, istota biała mózgu, rozwarstwienie istoty szarej jest niejasne, a istota biała jest ektopowa.
(2) Zaburzenia tworzenia się mieliny, najbardziej oczywiste jest tworzenie się mieliny w przewodzie wzrokowym, korowo-rdzeniowym, wiązce korowo-podniebienno-móżdżkowej.
(3) istota szara i cystyczna degeneracja istoty białej; ponadto istnieją istoty czarne mózgu, pigmentacja niebieskiej plamki znika, a masa mózgu jest zmniejszona.
Zapobieganie
Zapobieganie fenyloketonurii
(1) Stopniowo i kompleksowo promuj badania przesiewowe fenyloketonurii w okresie noworodkowym Wczesne wykrycie dzieci z fenyloketonurią wykryto w heterozygotycznych rodzinach, unikając małżeństwa bliskich krewnych, heterozygotycznych nie należy żenić i należy przeprowadzić poradę genetyczną. Aby ukierunkować planowanie rodziny i zmniejszyć liczbę urodzeń pacjentów z fenyloketonurią. W przypadku rodzin z istniejącymi dziećmi diagnozę prenatalną należy przeprowadzić po ponownym urodzeniu, tj. Kosmki płodowe lub płyn owodniowy pobiera się we wczesnej lub środkowej części ciąży, a diagnostykę genetyczną przeprowadza się za pomocą technologii rekombinacji DNA w celu zdiagnozowania, czy płód jest normalnym dzieckiem, nosicielem czy dzieckiem. Podejmuje to decyzję o kontynuowaniu lub przerwaniu ciąży.
(2) kobiety w ciąży powinny ograniczyć spożycie fenyloalaniny, jeśli stężenie fenyloalaniny we krwi przekracza 726,4-908 / μmol / L należy leczyć, tak aby stężenie we krwi utrzymało się na poziomie 363,2 - 484,3 μmol / L, stężenie jest zbyt niskie Niedobór fenyloalaniny może również powodować uszkodzenie płodu. Zapewnij wystarczającą ilość białka podczas ciąży, minimalna dzienna ilość to 75-80 g.
(3) Promuj karmienie piersią, znajdź nosiciele i dzieci z fenyloketonurią jak najwcześniej i rozpocznij leczenie wcześnie, aby zapobiec upośledzeniu umysłowemu. Popularyzuj środki takie jak pieluchy z chlorku żelaza
Powikłanie
Powikłania fenyloketonurii Komplikacje, upośledzenie umysłowe
Około 2/3 dzieci miało łagodne małe wady czaszki, prawidłowy dno, brak powiększenia trzewnego lub nieprawidłowe kości.
Objaw
Objawy fenyloketonurii typowe objawy fenyloalanina zaburzenie metaboliczne upośledzenie umysłowe włosy blade i brązowe wielokrotnie drgające wyprysk malformacji móżdżku
PKU jest chorobą dziedziczną, dlatego noworodki cierpią na hiperfenyloalaninemię. Ponieważ nie są karmione, stężenie fenyloalaniny we krwi i jej szkodliwych metabolitów nie jest wysokie, więc po urodzeniu nie ma objawów klinicznych. Dzieci nie były badane pod kątem fenyloketonurii. W miarę przedłużania czasu karmienia fenyloalanina i jej metabolity we krwi stopniowo rosły, a objawy kliniczne stopniowo się pojawiały.
1. Opóźnienie wzrostu: Oprócz somatycznego wzrostu i opóźnienia rozwoju, przejawia się ono głównie w upośledzeniu umysłowym, które objawia się niższym IQ niż normalne niemowlęta w tym samym wieku, może wystąpić od 4 do 9 miesięcy po urodzeniu, a IQ ciężkich wynosi mniej niż 50, około 14%. Powyższe dzieci osiągają poziom idiotów, zwłaszcza zaburzenia rozwoju języka, które sugerują zaburzenia rozwoju mózgu, ograniczając spożycie fenyloalaniny u noworodków w celu zapobiegania upośledzeniu umysłowemu oraz zaburzenia rozwoju umysłowego u dzieci z ciężkim PKU w porównaniu z lżejszą fenyloalaniną. Wysokie stężenie, zgodnie z którym można uznać, że upośledzenie umysłowe wiąże się z toksycznością fenyloalaniny, ale szczegółowy mechanizm patofizjologiczny pozostaje niejasny.
2. Objawy neuropsychiatryczne: Występują wady móżdżku z powodu atrofii mózgu, nawracających drgawek, ale wraz ze wzrostem wieku wzrasta napięcie mięśni, hiperrefleksja, często mają podniecenie, nadpobudliwość i nieprawidłowe zachowanie.
3. Wydajność skóry i włosów: Skóra jest często sucha, podatna na egzemę i zadrapania, ponieważ hamuje tyrozynazę, synteza melaniny jest zmniejszona, więc włosy dziecka są blade i brązowe.
4. Inne: Z powodu braku hydroksylazy fenyloalaniny fenyloalanina wytwarza fenylomleczan i kwas fenylooctowy z innej drogi, która jest wydalana z potu i moczu i ma zapach pleśni (lub zapach szczura).
Zasadniczo objawy kliniczne i typy mutacji genu PAH są związane z nasileniem klinicznych fenotypów, a niedobór kofaktorów jest mniej fenotypowy klinicznie niż nieprawidłowości białka PAH.
Zbadać
Badanie fenyloketonurii
1. Test fenylopirogronianu moczowego: Ze względu na wzrost fenylopirogronianu w moczu dzieci można przeprowadzić testy jakościowe.
(1) Test chlorku żelazowego: 5% chlorek żelazowy wkroplono do 5 ml moczu, a zielona reakcja natychmiast stała się dodatnia. Noworodek nie był karmiony, a test był ujemny. Mocz cukrzycy może być również dodatni, więc test Niska specyficzność.
(2) Test na 2,4-nitrofenylohydrazynę: wynik dodatni, jeśli powstaje żółty mętny osad.
2. Oznaczanie fenyloalaniny we krwi: normalna fenyloalanina we krwi ludzkiej wynosi 60 ~ 180 μmol / L, pacjenci PKU mogą osiągać nawet 600 ~ 3600 μmol / L, jeśli 258 μmol / L jest punktem podziału między pacjentami normalnymi a PKU, to Istnieje do 4% wyników fałszywie dodatnich. Chromatografia kolorowa może powodować fałszywie ujemne wyniki u noworodków po kilku dniach życia. MS / MS może obniżyć współczynnik fałszywie dodatnich. Ta metoda może jednocześnie mierzyć fenyloalaninę i tyrozynę we krwi. Kwas, i może obliczyć stosunek fenyloalaniny / tyrozyny. Jeśli stosunek 2,5 jest punktem odcięcia między normalnymi dziećmi a dziećmi z PKU, wynik fałszywie dodatni można zmniejszyć do 1%. Dlatego metoda ta jest obecnie stosowana do badania przesiewowego noworodkowego benzenu. Acetoneuria, ta metoda może być również stosowana do badań przesiewowych w kierunku galaktozemii, cukrzycy klonu, homocystynurii i wrodzonej niedoczynności tarczycy. Pojedyncze badanie może przesłać badania różnych wrodzonych chorób.
3. Elektroencefalogram (EEG): głównie powolna fala kręgosłupa, czasami zaburzenie rytmu o wysokiej amplitudzie, badanie uzupełniające EEG wykazało, że wraz ze wzrostem wieku, nieprawidłowy poziom EEG stopniowo się zwiększał, a nieprawidłowości EEG stopniowo zmniejszały się po 12 latach.
4. Badanie prenatalne: Ponieważ komórki kosmków i owodniowych płynów nie są w stanie wykryć aktywności hydroksylazy fenyloalaniny, problem diagnozy prenatalnej nie może być rozwiązany przez długi czas Obecnie w Chinach zidentyfikowano 25 mutacji genowych wywołujących chorobę PKU 80% genu zmutowanego hydroksylazy fenyloalaniny w Chinach z powodzeniem zastosowano w wykrywaniu zmutowanych mutacji i diagnozie prenatalnej u pacjentów z PKU.
5. Badanie rentgenowskie: widoczna małogłowie, tomografia komputerowa i rezonans magnetyczny mogą wykryć niespecyficzne zmiany, takie jak rozproszona atrofia kory.
Diagnoza
Identyfikacja diagnostyczna fenyloketonurii
Kryteria diagnostyczne
Rozpoznanie tej choroby powinno kłaść nacisk na wczesną diagnozę w celu uzyskania wczesnego leczenia w celu uniknięcia upośledzenia umysłowego, a badania przesiewowe w kierunku fenyloketonurii muszą zostać przeprowadzone u noworodków w celu wczesnego rozpoznania.
1. Metoda przesiewowa: Uznana na arenie międzynarodowej rutynowa metoda przesiewowa to metoda hamowania bakterii odkryta przez Guthrie Dostępny jest domowy zestaw przesiewowy PKU Metoda ta oparta jest na wzroście zmienności pasma wzrostu B. subtilis. Aby oszacować poziom fenyloalaniny we krwi, jeśli szacowany poziom fenyloalaniny we krwi jest dodatni przy 0,24 mmol / l, tę metodę można zastosować u dzieci w wieku 3–5 dni po urodzeniu, u noworodków z wywiadem rodzinnym Należy wykonać więcej badań przesiewowych noworodków.
2. Test obciążenia fenyloalaniną: test ten może bezpośrednio zrozumieć aktywność PAH, dawka obciążenia to doustna fenyloalanina 0,1 g / kg, a nawet podawana przez 3 dni, klasyczne dzieci PKU z poziomem fenyloalaniny we krwi na poziomie 1,22 Powyżej mmol / l, łagodne przypadki są często poniżej 1,22 mmol / l. Ten ostatni wynik sugeruje, że te dzieci mogą być hiperfenyloalaninemią bez PKU.
3. Diagnoza etiologiczna: Genem fenyloketonurii jest gen PAH. Diagnostyka etiologiczna polega na wykryciu mutacji genu PAH. Wykrywanie mutacji genu PAH może nie tylko zdiagnozować przyczynę pacjenta, ale także dokonać prenatalnej diagnozy dla płodu, genotypu. U większości pacjentów istnieje korelacja między fenotypem a fenotypem. Różne rodzaje mutacji mają różny wpływ na aktywność PAH, dlatego wykrycie mutacji genu PAH jest również przydatne do określenia rokowania i leczenia przewodniego.
Istnieje wiele metod wykrywania mutacji genu PAH, ale jedną z nich jest reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) połączona z jedną lub dwiema następującymi metodami wykrywania, w tym polimorfizmem konformacji jednoniciowej (SSCP), a długość fragmentów enzymów restrykcyjnych jest duża. Najnowocześniejszy (RFLP), denaturująca elektroforeza w gradiencie żelowym (DGGE), bezpośrednie sekwencjonowanie DNA, specyficzna dla miejsca mutacji sonda oligonukleotydowa (ASO), elektroforeza w żelu PCR-poliakryloamidowa-barwienie srebrem, dideoksy , system mutacji opornej na amplifikację (ARMS), metoda rozszczepiania niedopasowania enzymów itp., może analizować zamplifikowany DNA, może również przeprowadzać analizę SSCP na RNA, analizować limfocyty krwi obwodowej pod kątem próbek, diagnozę prenatalną Ciało polarne (produkt gamet) może być analizowane, a ciało polarne i ASO można wykorzystać do diagnozy prenatalnej. Gen PAH o znanym miejscu mutacji można również zbadać metodą ASO. W Chinach istnieje pięć rodzajów mutacji genu PAH: R243Q, Y204C, V399V, Y356X, R413P, te 5 mutacji genu PAH stanowiły 56,7%, najczęstsze mutacje punktowe w mutacji, odpowiadające 77,4% rodzaju mutacji, Huang Shangzhi zaproponował procedurę szybkiej diagnozy mutacji genu PAH: Krok 1 dla punktu mutacji Analiza swoistej sondy oligonukleotydowej, wskaźnik diagnostyczny Do 66%; Krok 2 dla analizy SSCP eksonu 4, wskaźnik diagnostyczny wzrósł do 80%; Krok 3 wykorzystuje analizę SSCP do wykrycia kilku popularnych miejsc mutacji, mianowicie R243Q (ekson 7), V339V i Y356X (Przykład 11) wskaźnik diagnostyczny może osiągnąć 87%.
Metoda wykrywania genu PTPS jest również oparta na PCR i połączona z metodą DGGE w celu przeszukiwania sześciu sekwencji kodujących genu i miejsc składania wszystkich genów PTPS.
Diagnostyka różnicowa
Pacjenci z PKU spowodowanym niedoborem klasycznym i kofaktorem mają hiperfenyloalaninemię, ale pacjenci z hiperfenyloalaninemią niekoniecznie powodują PKU, dlatego PKU należy odróżnić od innych pacjentów z hiperfenyloalaninemią. .
Przejściowa hiperfenyloalaninemia, chociaż przyczyną tej choroby jest również niedobór PAH, ale nie mutacja genu PAH, ale niedojrzałe PAH, co powoduje podwyższone stężenie fenyloalaniny we krwi o 1,22 mmol / l, Jednak z czasem stężenie fenyloalaniny we krwi można obniżyć do normy, co można zidentyfikować na podstawie kontrolnych poziomów fenyloalaniny we krwi.
Hiperfenyloalaninemia transaminazowa jest spowodowana brakiem aminotransferazy fenyloalaninowej, choroba ta nie powoduje fenyloketonurii, ogólnie poziom fenyloalaniny we krwi jest normalny, tylko przy jedzeniu diety wysokobiałkowej we krwi benzen Stężenie alaniny jest podwyższone, a poziom metabolitów fenyloalaniny jest normalny, więc identyfikacja z PKU nie jest trudna.
Lekki PKU ma także jedynie identyfikację PKU spowodowaną hiperfenyloalaninemią i kofaktorami Stosunek fenyloalaniny do tyrozyny można ustalić na podstawie diagnozy genetycznej i oznaczenia poziomu tyrozyny we krwi lub testu obciążenia fenyloalaniną. Identyfikacja
